褐蘑菇提取物對四氧嘧啶型糖尿病小鼠降血糖活性研究

劉 瑩,劉 政,黃 靜,李芳亮

遼寧工程技術(shù)大學(xué)理學(xué)院,遼寧阜新 123000

褐蘑菇提取物對四氧嘧啶型糖尿病小鼠降血糖活性研究

劉 瑩,劉 政,黃 靜,李芳亮

遼寧工程技術(shù)大學(xué)理學(xué)院,遼寧阜新 123000

本文通過對褐蘑菇提取物的降血糖作用研究,旨在開發(fā)降血糖藥物新資源。試驗數(shù)據(jù)顯示褐蘑菇提取物能顯著降低四氧嘧啶所制備的糖尿病小鼠血糖濃度。褐蘑菇提取物高、中、低劑量組對糖尿病小鼠的降糖率分別是 16.9%,20.2%和 15.1%.陽性對照組的降糖率是 25.1%.褐蘑菇提取物中劑量組降糖效果要優(yōu)于高、低劑量組。

褐蘑菇提取物;降血糖;糖尿病

褐蘑菇 (Agaricus bisporus)是雙孢蘑菇的近緣種,遼寧田園實業(yè)有限公司獨家生產(chǎn)的品種。是歐美市場最暢銷的食用菌名貴品種,其特點是菌蓋豐滿,肉質(zhì)感強,食用時,即有肉的口感,又沒有肉類對人體的危害,被譽為“素牛排”。在瘋牛病和禽流感多發(fā)時期,褐蘑菇作為肉的替代品倍受青睞,褐蘑菇除具備一般蘑菇所具有的高蛋白、低脂肪、低膽固醇特點外,還具有提高人體免疫力、防癌抗癌、保肝護肝、美容駐顏等作用。常食用褐蘑菇對人體健康非常有益[1]。

但有關(guān)褐蘑菇降血糖的研究國內(nèi)外文獻報道很少[2]。本文選用褐蘑菇作為研究材料,對褐蘑菇提取物有無降血糖的生物活性進行研究,為褐蘑菇藥用價值研究奠定一定的基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與設(shè)備

KDC-160 HR型高速冷凍離心機 (沈陽博騰儀器設(shè)備公司)、島津 GC-2010氣相色譜儀(沈陽博騰儀器設(shè)備公司)、UV-1200紫外可見分光光度計 (上海精密儀器公司)、ATN-300凱氏定氮儀 (上海宏紀儀器公司)

1.2 試劑

Serharose CL-6B、NaOH、乙醇、苯酚、硫酸、3,5-二硝基水楊酸(購于沈陽化玻試劑公司)

1.3 材料

褐蘑菇是遼寧田園實業(yè)有限公司提供;雄性昆明小鼠(體重 18～22 g)

1.4 褐蘑菇提取物的提取方法[3]

將褐蘑菇濾渣(經(jīng)過乙醇和水分別提取小分子和多糖)用 0.5 mol/LNaOH浸提三次,合并濾液,離心,上清液濃縮后加入 3倍體積 95%工業(yè)酒精醇沉,靜置 24 h,離心,再經(jīng)干燥得到粗提取物。褐蘑菇堿提水溶性提取物的收率為 29.3%.

2 實驗方法

2.1 褐蘑菇提取物對正常小鼠血糖的影響[4]

取雄性昆明小鼠 40只,隨機分為 4組,即空白對照組,褐蘑菇提取物高、中、低劑量組 (100,200, 400 mg/kg),連續(xù)灌胃 7 d,空白對照組在同樣條件下灌胃生理鹽水,末次給藥前 12 h禁食 (不禁水),末次給藥后 2 h,摘眼球取血,分離血清,采用血糖試劑盒測定空腹血糖值。

2.2 褐蘑菇提取物對四氧嘧啶誘發(fā)糖尿病小鼠血糖的影響[5]

取雄性昆明小鼠 80只。從中隨機抽取小鼠 70只,小鼠禁食 16 h(自由飲水),每只以 70 mg/kg尾靜脈注射新鮮配制的四氧嘧啶溶液。飼養(yǎng) 72 h后,斷尾取血,取造成高血糖模型 (禁食 12 h,血糖大于11.1 mmol/L)者,隨機分為 5組,即模型對照組,陽性對照組 (消渴丸組,600 mg/kg),褐蘑菇提取物高、中、低劑量組 (100,200,400 mg/kg),另 10只作為正常對照組。褐蘑菇提取物組以褐蘑菇提取物溶液連續(xù)灌胃 7 d,模型對照組與正常對照組以生理鹽水連續(xù)灌胃 7 d,陽性對照組灌胃消渴丸溶液連續(xù) 7 d。末次給藥前 12 h禁食 (不禁水),末次給藥后 2 h,摘眼球取血,分離血清,采用血糖試劑盒測定空腹血糖值。

2.3 血糖的測定方法[6](血清葡萄糖氧化酶法)

(1)原理:葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸內(nèi)酯,并產(chǎn)生一分子過氧化氫。

在過氧化物酶作用下,過氧化氫分解,將無色的4-氨基安替比林偶聯(lián)酚,氧化縮合生成紅色的醌類化合物。其顏色深淺在一定范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正比。在 505 nm測定吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)管比較可計算血糖濃度。

(2)操作:取 3支試管,按表 1進行操作。置于37℃水浴中,保溫 15 min鐘,用分光光度計波長505 nm,以空白管調(diào)零,分別讀取標(biāo)準(zhǔn)管及測定管吸光度。用此公式計算:

表 1 葡萄糖測定結(jié)果Table 1 The results of glucose

3 褐蘑菇提取物調(diào)節(jié)小鼠血糖的結(jié)果與討論

3.1 褐蘑菇提取物對正常小鼠血糖的影響

對正常小鼠連續(xù)灌胃褐蘑菇提取物 7 d,測此提取物對正常小鼠血糖的影響,實驗結(jié)果見表 2。

表 2 褐蘑菇提取物對正常小鼠血糖的影響Table 2 The impact of brown mushroom extract base of the normal blood sugar in mice

表 2的結(jié)果表明,灌胃褐蘑菇提取物對正常小鼠血糖有降低作用,褐蘑菇提取物高、中、低劑量組與空白對照組相比,均到達顯著水平 (p<0.05),其中褐蘑菇提取物中劑量組的降血糖效果要優(yōu)于高、低劑量組。

3.2 褐蘑菇提取物對四氧嘧啶誘發(fā)糖尿病小鼠血糖的影響

褐蘑菇提取物對四氧嘧啶誘發(fā)糖尿病小鼠的影響,結(jié)果如下表 3所示。

表 3 褐蘑菇提取物對四氧嘧啶誘發(fā)糖尿病小鼠血糖的影響Table 3 The impact of brown mushroom extract base of alloxan-induced tetraoxypyrimidine blood sugar in diabetic mice

由表 3的實驗結(jié)果可見,褐蘑菇提取物能顯著降低四氧嘧啶所制備的糖尿病小鼠血糖濃度。褐蘑菇提取物高、中、低劑量組對糖尿病小鼠的降血糖率分別是 16.9%,20.2%和 15.1%。同時,表中數(shù)據(jù)顯示褐蘑菇提取物中劑量組降血糖效果要優(yōu)于高、低劑量組。

4 結(jié)論

本論文通過對堿提褐蘑菇提取物降血糖作用的研究,得出實驗結(jié)果如下:

4.1 褐蘑菇提取物能顯著降低四氧嘧啶所制備的糖尿病小鼠血糖濃度。

4.2 褐蘑菇提取物高、中、低劑量組對糖尿病小鼠的降糖率分別是 16.9%,20.2%和 15.1%.同時,從數(shù)據(jù)中能夠看出褐蘑菇提取物中劑量組降糖效果要優(yōu)于高、低劑量組。有無臨床應(yīng)用價值有待進一步深入研究。

1 Liu Y(劉瑩).Nutritional component analysis and corn straw material for cultivation research of portobello mushroom. NortheastNormalUniv(東北師范大學(xué)),PhD.2007.

2 Liu Y(劉瑩),Zhang LP(張麗萍),Study on methods of deproteinization from portobello mushroom polysaccharide. Guangdong Agric Sci(廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)),2008,221:114-115.

3 FuBQ(傅博強),XieMY(謝明勇),Zhou P(周鵬).A survey of the studies on the extraction,purification,composition and pharmaceutical effectsof tea polysaccharide.J Nanchang Univ,Nat Sci(南昌大學(xué)學(xué)報,理科版),2001,25:358-364.

4 Wang TX(王庭欣),Zhao W(趙文),Jiang DS(蔣東升). The hypoglycemic effect of laminarina japonica polysaccharides in diabetic mice.Acta Nut Sin(營養(yǎng)學(xué)報),2001,23: 137-139.

5 Li FC(李福川),Tang ZH(唐志紅),Cui BW(崔博文). Hypoglycemic activity of three polysaccharides from laminaria japonica.Chin J M arineD rugs(中國海洋藥物),2000,19 (5):12-15.

6 Yu j(余杰),Cui PJ(崔鵬舉),Cen MZ(陳美珍).Selenium-enriched fer mentation mycelia of Coprinus comatus enhance the antihyper-glycemia and antioxidant activities in alloxan-induced diabetic mice.M ycosystema(菌物學(xué)報), 2009,28:120-128.

Brown M ushroom Extract Falls the Blood Sugar Activeness Research to the Alloxan D iabetic M ice

L IU Ying,L IU Zheng,HUANG Jing,L I Fang-liang
B iological Science and Engineering Departm ent,Liaoning Technological University,Liaoning,Fuxin 123000,China

This article base on the research of brown mushroom hypoglycemic activity,in order to development new resources of Hypoglycemic drug.Test data show that the brown mushroom extract can significantly reduce the prepared alloxan diabetic mice blood glucose levels.Brown mushroom extract high,medium and low-dose group of diabetic mice hypoglycemic rateswere 16.9%,20.2%and 15.1%.Positive control group of hypoglycemic rate is 25.1%.Brown mushroom extract hypoglycemic effect ofmiddle dose group is superior to high-and low-dose group.

brown mushroom extract;regulate blood sugar;diabetic

1001-6880(2010)02-0323-03

2009-07-20 接受日期:2009-10-26

國家發(fā)改委重點資助項目子課題:發(fā)改辦工業(yè)[2006] 1852號

＊通訊作者 Tel:0418-6811582;E-mail:liuyingfx02@126.com

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