小兒吐瀉寧散的薄層色譜鑒別方法研究

劉銳玲, 曲婷麗, 趙正保

(山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥物化學(xué)教研室, 太原 030001; *通訊作者,E-mail:zhengbao_Z@163.com)

小兒吐瀉寧散由廣藿香、姜半夏、白術(shù)(炒)、厚樸、陳皮、茯苓等七味藥材精制而成,具有理氣和中、健脾化濕的功效。臨床主用于小兒脾胃不和引起的吐瀉、腹脹、不思飲食等癥。小兒吐瀉寧散原部頒標(biāo)準(zhǔn)中僅有理化鑒別內(nèi)容[1],缺乏薄層鑒別和含量測(cè)定,因此我們前期采用氣相色譜法對(duì)其君藥廣藿香進(jìn)行含量測(cè)定,本實(shí)驗(yàn)定性鑒別從其他六味藥中選出四味進(jìn)行薄層鑒別。試驗(yàn)結(jié)果表明所建立的薄層色譜鑒別法專屬性強(qiáng)、簡(jiǎn)便、穩(wěn)定性好,可為小兒吐瀉寧散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供依據(jù)。

1 儀器、藥品及試劑

1.1 儀器 UV-1型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠)。

1.2 藥品 小兒吐瀉寧散(山西華康藥業(yè)股份有限公司提供,批號(hào):20060101,20060102,20060103);陳皮對(duì)照藥材(批號(hào):120969-200204),厚樸對(duì)照藥材(批號(hào):121285-200301),茯苓對(duì)照藥材(批號(hào):121117-200403),甘草對(duì)照藥材(批號(hào):120904-200511),均購于中國(guó)藥品生物制品檢定所;陰性對(duì)照品(自制)。

1.3 試劑 正丁醇、環(huán)乙烷、冰醋酸、乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醚、石油醚(北京化工廠),均為分析純;硅膠 G、硅膠 GF254(青島海洋化工廠分廠)。

2 方法與結(jié)果

2.1 陳皮的薄層色譜鑒別 取小兒吐瀉寧散6 g,研細(xì),加甲醇40 ml,超聲處理 15 min,濾過,濾液濃縮至1ml,作為供試品溶液[2-5]。另取陳皮對(duì)照藥材1 g,同法制成對(duì)照藥材溶液。處方中除去陳皮,按供試品溶液制備方法,制得去陳皮陰性供試品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典 2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn),吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照藥材溶液 2μl,陰性對(duì)照溶液 5μl分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上,以二氯甲烷-甲醇(19∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),陰性對(duì)照樣品溶液在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,無相同顏色的斑點(diǎn),無干擾(見圖1)。

2.2 厚樸的薄層色譜鑒別 取小兒吐瀉寧散6g,研細(xì),加鹽酸 2滴和二氯甲烷 50ml,超聲處理30min,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)蛹状?1 ml使溶解,作為供試品溶液[2,4]。另取厚樸對(duì)照藥材1g,同法制成對(duì)照藥材溶液。處方中除去厚樸,按供試品溶液制備方法,制得去厚樸陰性供試品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典 2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn),吸取上述 3種溶液各 5μl,分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上,以環(huán)己烷-乙酸乙酯(4∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(254 nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),陰性對(duì)照樣品溶液在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,無相同顏色的斑點(diǎn),無干擾(見圖2)。

圖1 陳皮的薄層色譜圖Fig 1 Thin layer chromatogram of Pericarpium citri reticulatae

圖2 厚樸的薄層色譜圖Fig 2 Thin layer chromatogram of Magnolia bark

2.3 茯苓的薄層色譜鑒別 取小兒吐瀉寧散 18 g,研細(xì),加甲醇 50 ml,超聲處理 30 min,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)佣燃淄槭谷芙?濾過,濾液濃縮至 1 ml,作為供試品溶液[2,3]。處方中除去茯苓,按供試品溶液制備方法,制得去茯苓陰性供試品溶液。取茯苓對(duì)照藥材 2 g,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典 2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn),吸取上述 3種溶液各 5μl,分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上,以石油醚(60-90℃)-乙醚(3∶2)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),陰性對(duì)照樣品溶液在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,無相同顏色的斑點(diǎn),無干擾(見圖3)。

圖3 茯苓的薄層色譜圖Fig 3 Thin layer chromatogram of Indian Bread

2.4 甘草的薄層色譜鑒別 取小兒吐瀉寧散 6 g,研細(xì),加乙醚 40 ml,置水浴上加熱回流 1 h,濾過,藥渣加甲醇 30 ml,置水浴上加熱回流 1 h,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)铀?30 ml使溶解,水溶液用正丁醇萃取3次,每次 15 ml,合并正丁醇液,用水洗滌 3次,每次15 ml,棄去水液,將正丁醇液置水浴上蒸干,殘?jiān)蛹状?1 ml使溶解[2-7]。另取甘草對(duì)照藥材 1 g,同法制備對(duì)照藥材溶液。處方中除去甘草,按供試品溶液制備方法,制得去甘草陰性供試品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典 2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn),取上述 3種溶液各 5μl,分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上,以正丁醇-冰醋酸-水 (4∶1∶2)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(254 nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),陰性對(duì)照樣品溶液在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,無相同顏色的斑點(diǎn),無干擾(見圖4)。

圖4 甘草的薄層色譜圖Fig 4 Thin layer chromatogram of Radix Glycyrrhiza

3 討論

3.1 在厚樸的薄層鑒別中,曾參照 2005年版藥典一部“厚樸”藥材項(xiàng)下的鑒別方法,但由于本試驗(yàn)研究的是復(fù)方制劑,其他成分對(duì)其鑒別有影響,沒有達(dá)到良好的分離。同時(shí),藥典上所使用的展開劑中含有苯,苯的毒性較大,對(duì)人體有危害,因此試驗(yàn)最終選用了本文的薄層鑒別條件,在此條件下,供試品與對(duì)照藥材在相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn);而陰性供試品沒有相應(yīng)的斑點(diǎn),表明本方法專屬性較強(qiáng),可作為小兒吐瀉寧散中厚樸的定性鑒別的方法。

3.2 在陳皮的鑒別中,曾參照 2005年版藥典一部“陳皮”藥材項(xiàng)下的方法,但在陳皮的展開劑中含有甲苯,甲苯也為毒性試劑,因此試驗(yàn)參考資料[2-5],將展開劑換為二氯甲烷-甲醇,同時(shí)直接在 365 nm下檢視,省去了藥典中的顯色過程,簡(jiǎn)化了試驗(yàn)操作。

3.3 本試驗(yàn)采用薄層色譜法對(duì)小兒吐瀉寧散中的陳皮、厚樸、茯苓、甘草四味藥材進(jìn)行了定性鑒別,試驗(yàn)結(jié)果表明:所建立的方法專屬性較強(qiáng)、分離效果良好,陰性均無干擾,可為將來修訂小兒吐瀉寧散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

[1] 衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑(第4冊(cè))[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,1991:16.

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典 2005年第一部[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:59,132,176.

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