酸堿性對舒胸片6種成分在4種大孔樹脂上靜態(tài)吸附性能的影響

楊 平， 夏新華， 李淑輝， 彭買姣， 鄒婉婷

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南 長沙 410208）

舒胸片系《中國藥典》2005版一部收載的復(fù)方中藥制劑，由三七、川芎、紅花三味中藥組方制備而成，具有活血、祛瘀、止痛的功效，臨床主要用于瘀血阻滯、胸痹心痛、跌打損傷、瘀血腫痛、冠心病、心絞痛［1］、心律失常、軟組織挫傷等。三七含皂苷類成分(人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1)，川芎含生物堿類成分(川芎嗪)與有機酸類成分(阿魏酸)，紅花含黃酮類成分(羥基紅花黃色素A)。為便于應(yīng)用大孔樹脂對該方混合提取液進行精制，以進一步開發(fā)其新劑型，本文在不同pH條件下對舒胸片混合提取液中上述6種有效成分在4種大孔樹脂上的靜態(tài)吸附性能進行了研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 shimadzu LC-10Atvp型高效液相色譜儀；shimadzu SPD-10Avp型紫外檢測器；N3000色譜工作站；AY120 SHIMADZU分析天平。

1.2 試藥 人參皂苷Rg1(批號:110703-200322，供含量測定用)、人參皂苷Rb1(批號:110704-200318，供含量測定用)、人參皂苷 Re(批號:110754-200319，供含量測定用)、三七皂苷 R1(批號:110745-200312)、川芎嗪(批號:110817-200305 ，供含量測定用)、阿魏酸(批號:07733-9910，供含量測定用)、羥基紅花黃色素A對照品(批號:111637-200502，供含量測定用)，均由中國藥品生物制品檢定所提供。乙腈為色譜純(Caledon Laboratories LTD.)，水為重蒸水，其余試劑均為分析純。三七、川芎、紅花藥材由湖南三湘中藥飲片有限公司提供。LSA-7、LSA-30型大孔吸附樹脂，由西安藍(lán)深交換吸附材料有限責(zé)任公司提供；D101-A大孔吸附樹脂由天津市骨膠廠提供；HPD-100型大孔吸附樹脂由滄州寶恩化工有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 舒胸片提取液的制備 按《藥典》舒胸片處方各藥味比例，取三七細(xì)粉，加50%乙醇浸泡2.5 h，回流提取2次，加醇量分別為藥材的8倍、6倍量，提取時間分別為2.5、2.0 h，收集醇提液，回收乙醇，備用；取川芎，加10倍量水煎煮2 h，濾過，濾液另存，藥渣與紅花加8倍量水煎煮2次，每次1 h，合并3次煎液，60℃減壓濃縮至每1 mL含1 g生藥，在攪拌下緩緩加入乙醇使含醇量達70%，靜置24 h，濾過，濾液回收乙醇，與上述醇提濃縮液合并，60℃減壓濃縮至適當(dāng)濃度(0.3 g生藥/mL)，濾過，即得。

2.2 不同pH下樹脂的靜態(tài)吸附實驗 稱取LSA-7、LSA-30、D101A、HPD-100四種型號的濕樹脂各2 g，每種型號4份，共16份，置于具塞三角錐型瓶中，分別加入濃度為0.3 g生藥/mL的樣品溶液，其pH值分別為 4.0、5.0、6.0、7.0，密封置于 25℃恒溫水浴中并定時振搖，24 h后分別精密吸取上清液2 mL，分別用 HPLC法測定三七皂苷 R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、川芎嗪、阿魏酸、及羥基紅花黃色素A的含量，同時測定原液(未經(jīng)吸附的舒胸片提取液)中上述各有效成分的含量，并按下式計算各有效成分在大孔樹脂上的比吸附量(A)。

式中:A為比吸附量(absorbtion ratio，mg/g)，即單位質(zhì)量干樹脂吸附某成分的量；M1為起始濃度(mg/mL)；M2為剩余濃度(mg/mL)；V為溶液體積(mL)；W為干樹脂重量(g)，可根據(jù)樹脂的含水量由濕樹脂重折算得到。

2.3 pH對三七皂苷R1在不同樹脂上吸附性能的影響 結(jié)果見圖1。

圖1 不同pH下三七皂苷R1在四種樹脂上的比吸附量

由圖 1 可見，LSA-7、LSA-30、HPD-100、D101A四種樹脂對三七皂苷R1的比吸附量在pH4時較為相近。隨pH增加，LSA-7樹脂對三七皂苷R1的比吸附量明顯增加，LSA-30、HPD-100兩種樹脂的比吸附量則呈現(xiàn)下降趨勢；D101A樹脂的比吸附量開始變化不大，到pH7時有所增加。

2.4 pH對人參皂苷Rg1在不同樹脂上吸附性能的影響 結(jié)果見圖2。

圖2 不同pH下人參皂苷Rg1在4種樹脂上的比吸附量

由圖 2 可見，LSA-7、LSA-30、HPD-100、D101A四種樹脂對人參皂苷Rg1的比吸附量在pH4時亦較為相近。隨pH增加，LSA-7樹脂對人參皂苷Rg1的比吸附量開始稍有下降，然后逐漸增加；HPD-100樹脂的比吸附量則呈現(xiàn)下降趨勢；LSA-30、D101A兩種樹脂的比吸附量變化不大。

2.5 pH對人參皂苷Rb1在不同樹脂上吸附性能的影響 結(jié)果見圖3。

圖3 不同pH下人參皂苷Rb1在4種樹脂上的比吸附量

由圖3可見，LSA-7、HPD-100、D101A 3種樹脂對人參皂苷Rb1的比吸附量在pH4時較為相近，而LSA-30的比吸附量則明顯低于上述三者。隨pH增加，LSA-7樹脂對人參皂苷Rb1的比吸附量類似于上述人參皂苷Rg1，亦呈先抑后揚的趨勢；HPD-100樹脂的比吸附量呈逐步下降趨勢；LSA-30、D101A兩種樹脂的比吸附量開始變化不大，然后有所下降。

2.6 pH對阿魏酸在不同樹脂上吸附性能的影響結(jié)果見圖4。

圖4 不同pH下阿魏酸在4種樹脂上的比吸附量

由圖 4 可見，LSA-7、LSA-30、HPD-100、D101A四種樹脂對阿魏酸的比吸附量在pH4時亦較為相近。隨pH增加，HPD-100、D101A兩種樹脂對阿魏酸的比吸附量呈明顯的單邊下降趨勢；而LSA-30、LSA-7二種樹脂的比吸附量開始逐步下降，pH7時出現(xiàn)明顯回升現(xiàn)象，尤其是LSA-7樹脂。

2.7 pH對川芎嗪在不同樹脂上吸附性能的影響結(jié)果見圖5。

圖5 不同pH下川芎嗪在4種樹脂上的比吸附量

由圖5可見，在pH4時，3種非極性樹脂(LSA-30、HPD-100、D101)對川芎嗪的比吸附量相近，而極性樹脂(LAS-7)對川芎嗪的比吸附量則明顯少于上述三者。隨pH的升高，3種非極性樹脂(LSA-30、HPD-100、D101)的比吸附量變化不明顯，而LAS-7樹脂的比吸附量則呈明顯增加趨勢。

2.8 pH對羥基紅花黃色素A在不同樹脂上吸附性能的影響［2］結(jié)果見圖6。

圖6 不同pH下羥基紅花黃色素A在4種樹脂上的比吸附量

由圖6可見，4種樹脂對羥基紅花黃色素A的吸附力均以pH4為佳，pH5～7范圍內(nèi)，吸附量均明顯下降。羥基紅花黃色素A屬黃酮類，結(jié)構(gòu)中含有多個酚-OH，且本身的極性大，水溶性強，故在大于pH4的溶液中，可能酚-OH中的氫更易解離，使其極性偏大，親水性更強，不易被樹脂吸附。

3 討論

pH是影響中藥復(fù)方有效成分在大孔樹脂上吸附性能的一個重要因素［3］。上述研究表明，在3種非極性樹脂(LSA-30、D101A、HPD-100)上，6 種成分中以阿魏酸、羥基紅花黃色素A受pH影響較大，pH越低，比吸附量越大，這與其具有酸性基團(羧基-COOH)或酚-OH的結(jié)構(gòu)在酸性溶液中溶解性降低而易被吸附有關(guān)。對于相同成分，樹脂不同，pH影響的趨勢亦有差異，其中極性樹脂LSA-7與3種非極性樹脂有明顯的不同，除羥基紅花黃色素A外，其它5種成分當(dāng)pH較高(pH=7)時在樹脂LSA-7上均有較好的吸附性能。因此，采用大孔樹脂吸附分離復(fù)方多組分時，根據(jù)所選樹脂的種類調(diào)節(jié)適宜的pH以滿足多數(shù)成分的吸附分離是十分必要的。

［1］楊春艷.中藥治療冠狀動脈粥樣硬化心臟病心絞痛的臨床觀察［J］.中華中西醫(yī)學(xué)雜志，2008，6(6):59.

［2］施 峰，王光忠，劉焱文.大孔樹脂分離純化紅花黃色素的研究［J］.湖北中醫(yī)學(xué)院院報，2007，9(1):47-48.

［3］胡秀峰，馮長根，曾慶軒，等.大孔樹脂在紅霉素提取中的應(yīng)用進展［J］.國外醫(yī)藥抗生素分冊，2004，25(1):17-19.