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    食管癌患者血清TGF-β1水平的監(jiān)測及臨床意義*

    2010-10-10 12:16:02唐任光韋葉生陳宏明方文珠李榮顏滕建昆梁華清凌彩霞
    重慶醫(yī)學(xué) 2010年3期
    關(guān)鍵詞:食管癌血清基因

    唐任光,韋葉生,陳宏明,方文珠,黃 慶,李榮顏,滕建昆,農(nóng) 珺,梁華清,凌彩霞

    (右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院:1.檢驗中心;2.胸外科;3.核醫(yī)學(xué)科,廣西百色533000)

    食管癌(esophageal cancer)病因和發(fā)病機制尚未完全闡明,但細(xì)胞因子在其中的作用越來越受到重視。轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)是一種多功能細(xì)胞因子,具有廣泛的生物學(xué)作用,它可誘導(dǎo)局部血管增生、胞外基質(zhì)生成以及抑制免疫監(jiān)視作用等,同時還可增加細(xì)胞的異質(zhì)性黏附,促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移,因而它在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用[1]。TGF-β1基因位于第19號染色體長臂上,含7個外顯子和6個內(nèi)含子。分子生物學(xué)研究表明TGF-β1基因存在著基因變異及基因多態(tài)性,這種基因多態(tài)性與乳腺癌、前列腺癌、肝癌、食管癌等[2-5]多種疾病存在密切相關(guān)性,但對TGF-β1血清水平的變化與食管癌病理分期及手術(shù)前后相互關(guān)系的研究報道甚少。為此,本研究探討了食管癌患者外周血TGF-β1水平與病理分期及轉(zhuǎn)移的關(guān)系,同時對食管癌患者進(jìn)行了手術(shù)前后血清TGF-β1水平的檢測,旨在探討其臨床價值,為判斷食管癌病情進(jìn)展提供了重要指標(biāo),并闡明其在食管癌的臨床分期、療效、預(yù)后評價等方面具有重要的臨床意義。

    1 臨床資料

    1.1 一般資料 食管癌組:選擇2007年1月至2009年1月本院收治的食管癌住院患者,共118例,其中男75例,女43例,年齡41~79歲,平均(58.9±8.7)歲。全部研究對象均經(jīng)臨床病理檢查確診為食管鱗狀細(xì)胞癌患者,其中Ⅰ~Ⅱ期72例,Ⅲ~Ⅳ期46例,所有病例均經(jīng)手術(shù)病理確診,且按有否器官、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分為轉(zhuǎn)移組48例,無轉(zhuǎn)移組70例。正常對照組:共130例,其中男 82例,女 48例,年齡 35~78歲,平均(57.9±7.9)歲,為正常體檢標(biāo)本,均無心、肝、腎等重要臟器疾病,肝、腎功能試驗正常,無腫瘤病史,血液標(biāo)本均取自同期在廣西右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院健康體檢的廣西籍人群,且無血緣關(guān)系。所有入選對象均由臨床醫(yī)師提前征得患者同意并填寫知情同意書。

    1.2 研究方法 標(biāo)本收集:抽取正常對照組、食管癌患者術(shù)前及術(shù)后6個月各1次,空腹不抗凝靜脈血2m L,置-70℃凍存,用于檢測血清 TGF-β1水平。TGF-β1的測定:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),酶聯(lián)免疫檢測儀以VIDAS型酶標(biāo)儀(德國產(chǎn)),每次操作步驟嚴(yán)格按產(chǎn)品說明書要求。主要試劑:TGF-β1試劑盒由比利時BioSource公司提供;所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

    1.3 觀察指標(biāo) 食管癌組與對照組年齡均衡性、TGF-β1水平比較;血清TGF-β1水平與食管癌臨床分期之間的關(guān)系;食管癌轉(zhuǎn)移組與無轉(zhuǎn)移組血清 TGF-β1水平比較。

    2 結(jié) 果

    2.1 食管癌組與對照組年齡均衡性比較和TGF-β1水平的變化 食管癌組與對照組年齡均衡性比較,兩組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),說明結(jié)果有可比性。食管癌患者組血清TGF-β1水平均顯著高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),見表 1。

    2.2 血清TGF-β1水平與食管癌臨床分期的關(guān)系 食管癌早期(Ⅰ~Ⅱ期)患者組(n=72)和食管癌晚期(Ⅲ~Ⅳ期)患者組(n=46)血清 TGF-β1水平〔早期:(45.88±11.13)μg/L,晚期(60.41±12.12)μg/L〕均顯著高于正常對照組〔n=130,(21.38±6.25)μg/L〕(P<0.01),晚期患者較早期升高(P<0.05),且隨腫瘤分期增加而增高。

    2.3 食管癌轉(zhuǎn)移組與無轉(zhuǎn)移組手術(shù)前后血清TGF-β1水平比較 手術(shù)前轉(zhuǎn)移組與無轉(zhuǎn)移組TGF-β1水平相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。術(shù)后轉(zhuǎn)移組 TGF-β1水平再度升高,手術(shù)后轉(zhuǎn)移組血清TGF-β1水平與無轉(zhuǎn)移組相比差異仍有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),轉(zhuǎn)移組患者 TGF-β1水平持續(xù)異常,此變化與病情的惡性及轉(zhuǎn)移可能有關(guān)。手術(shù)后無轉(zhuǎn)移組TGF-β1持續(xù)低水平,與手術(shù)前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),見表2。

    表1 食管癌組與對照組年齡均衡性、TGF-β1水平比較±s)

    表1 食管癌組與對照組年齡均衡性、TGF-β1水平比較±s)

    與對照組比較,*:t=0.949,P>0.05;#:t=30.123,P<0.01。

    組別 n 年齡(歲) TGF-β1(μg/L)食管癌組 118 58.9±8.7* 49.37±8.32#對照組 130 57.9±7.9 21.38±6.25

    表2 食管癌轉(zhuǎn)移組與無轉(zhuǎn)移組血清 TGF-β1水平比較(±s)

    表2 食管癌轉(zhuǎn)移組與無轉(zhuǎn)移組血清 TGF-β1水平比較(±s)

    TGF-β1(μg/L)組別 n手術(shù)前 手術(shù)后6個月轉(zhuǎn)移組 48 65.14±14.55 72.36±15.56無轉(zhuǎn)移組 70 44.86±12.69△ 35.68±10.66

    3 討 論

    食管癌的發(fā)生和發(fā)展是由多種遺傳改變累積造成的,遺傳改變包括癌基因、抑癌基因和腫瘤易感基因的異常等,對食管癌的易感基因已做了廣泛深入的研究,迄今已證實腫瘤易感基因p53和 TGF-β1基因多態(tài)性與食管癌的發(fā)生具有相關(guān)性[5-6]。TGF-β1系迄今發(fā)現(xiàn)的功能最為廣泛的細(xì)胞因子之一,出現(xiàn)在炎癥反應(yīng)的早期,可誘導(dǎo)包括自身在內(nèi)的多種細(xì)胞因子以及一些炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生,與多種感染性疾病和免疫炎性疾病相關(guān)。適量TGF-β1可參與免疫細(xì)胞的激活和炎癥反應(yīng)的免疫調(diào)節(jié),但生成失調(diào)(表達(dá)減少或過度)則可造成一些病理傷害如組織損傷、休克、死亡等的發(fā)生。為了進(jìn)一步探討TGF-β1血清水平與食管癌的關(guān)系,本研究采用ELISA免疫學(xué)技術(shù)檢測了食管癌患者和對照者可溶性TGF-β1的血清水平,結(jié)果發(fā)現(xiàn)食管癌患者TGF-β1血清水平顯著高于對照者,這一結(jié)果表明,患者血中TGF-β1水平的升高與食管癌的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)。出現(xiàn)這一結(jié)果的可能原因是,食管癌患者自分泌TGF-β1因子增強,高表達(dá)的TGF-β1使腫瘤細(xì)胞迅速地自主性生長而不受機體的控制,導(dǎo)致體內(nèi) TGF-β1水平的升高。

    本實驗結(jié)果表明,食管癌患者血清中 TGF-β1水平明顯地高于正常人組,顯現(xiàn)出高度的表達(dá),提示TGF-β1的活性平衡失調(diào)會影響機體整個內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,進(jìn)而導(dǎo)致免疫功能的紊亂,直至誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。術(shù)后 6個月隨訪轉(zhuǎn)移組TGF-β1水平再度升高,手術(shù)后轉(zhuǎn)移組血清 TGF-β1水平與無轉(zhuǎn)移組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),轉(zhuǎn)移組患者TGF-β1水平持續(xù)異常,此變化與病情的惡性及轉(zhuǎn)移可能有關(guān)。手術(shù)后無轉(zhuǎn)移組TGF-β1持續(xù)低水平,與手術(shù)前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),這一結(jié)果說明食管癌患者血清中TGF-β1高表達(dá)可以反映食管癌患者的免疫抑制狀態(tài)和判斷治療效果。有研究表明,術(shù)后TGF-β1的上升與疾病不良預(yù)后有直接相關(guān)[7],降低 TGF-β1的反應(yīng)程度,有利于術(shù)后的康復(fù)。進(jìn)一步研究顯示,自Ⅲ~Ⅳ期,TGF-β1水平依次升高,而且與轉(zhuǎn)移程度變化有關(guān),這說明隨著腫瘤的進(jìn)展,瘤組織分泌的 TGF-β1就越多,TGF-β1的表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展機制是有關(guān)聯(lián)的。因此食管癌患者外周血TGF-β1水平顯著升高,對其的測定及動態(tài)觀察對于判斷食管癌病情進(jìn)展具有重要臨床價值,同時也為免疫調(diào)節(jié)的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。因此,可以把TGF-β1作為食管癌診斷的一個有效的輔助指標(biāo),也可以把它作為食管癌免疫療效、術(shù)前評估食管癌患者腫瘤的發(fā)展進(jìn)程、預(yù)后及復(fù)發(fā)狀況的一個重要觀察指標(biāo)。

    綜上所述,TGF-β1在食管癌中的發(fā)生和發(fā)展過程中可能起著重要作用,血清TGF-β1水平的觀察可以反映食管癌病情的發(fā)生、發(fā)展,可作為食管癌病情的一種監(jiān)測指標(biāo),這將有利于臨床了解食管癌患者的病情發(fā)展?fàn)顩r、治療效果及預(yù)后判斷,對臨床有積極的指導(dǎo)意義。

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