促進(jìn)難育奶牛受孕的技術(shù)措施

■ 李銘 吳柱月 顧國(guó)才 蔣玉秀 劉瑞鑫 羅蒙和 廣西畜牧研究所 ■ 黃恒 廣西牧草工作站

由各種原因引起的暫時(shí)性不育稱為難育，母牛難育直接影響到繁殖效率及養(yǎng)牛業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益[1]。2003～2007年，在生產(chǎn)實(shí)踐中，筆者對(duì)難育奶牛采取了相應(yīng)的技術(shù)措施，促進(jìn)了奶牛的發(fā)情和受孕，達(dá)到了較好的效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 引起奶牛難育的主要因素

1.1 營(yíng)養(yǎng)

營(yíng)養(yǎng)是導(dǎo)致奶牛難育的重要因素。據(jù)報(bào)道，奶牛分娩后，采食高峰落后于泌乳高峰，奶牛機(jī)體內(nèi)能量出現(xiàn)負(fù)平衡。擠奶和哺乳會(huì)刺激奶牛抑制體內(nèi)CnRH和LH的分泌。能量不足則會(huì)加重這種抑制作用，最終導(dǎo)致奶牛不發(fā)情和難育。能量過(guò)度也會(huì)導(dǎo)致繁殖力下降，在泌乳末期或干乳期，過(guò)度飼養(yǎng)的奶牛會(huì)出現(xiàn)“肥胖綜合癥”，容易出現(xiàn)代謝性、感染性、消化性疾病和繁殖障礙，使產(chǎn)后發(fā)情配種延遲，造成難育[1]。

蛋白質(zhì)對(duì)奶牛繁殖力的影響，受蛋白質(zhì)來(lái)源、奶牛年齡、日糧能量水平調(diào)節(jié)等方面的影響。研究表明，飼喂高濃度的粗蛋白可降低繁殖力，日糧中粗蛋白含量過(guò)度增加，那么配種次數(shù)就會(huì)相應(yīng)增加，空懷天數(shù)也會(huì)增加，導(dǎo)致難育[2]。

維生素和礦物質(zhì)對(duì)奶牛繁殖力的影響，主要是通過(guò)調(diào)節(jié)體內(nèi)各種物質(zhì)的合成和代謝過(guò)程而引起的，間接地作用于生殖系統(tǒng)而造成不同程度的難育[1]。

1.2 環(huán)境變化

▲ 通過(guò)使用電風(fēng)扇，減少熱應(yīng)激，維持正常的生殖機(jī)能

季節(jié)變化對(duì)母牛繁殖力有明顯的影響，春季母牛卵巢上的卵泡數(shù)量多而大，容易懷孕。炎熱的夏季會(huì)導(dǎo)致母牛常不發(fā)情和短發(fā)情，而且夏季受胎率較低，胚胎死亡率較高。突然改變奶牛的生活環(huán)境，包括調(diào)欄、混群，會(huì)引起奶牛應(yīng)激反應(yīng)，影響生殖機(jī)能，從而造成難育。

1.3 疾病

引起難育的疾病包括生殖系統(tǒng)和全身性疾病，而以生殖系統(tǒng)疾病造成的難育為主。在實(shí)際工作中，生殖系統(tǒng)疾病主要表現(xiàn)為卵巢疾病和子宮炎癥。卵巢疾病主要是由于奶牛營(yíng)養(yǎng)失調(diào)和使用大量性激素引起的，如卵巢囊腫、卵巢持久黃體、卵巢靜止等；子宮炎癥主要是由于流產(chǎn)、難產(chǎn)時(shí)助產(chǎn)、供體母牛沖胚、胎衣不下等引起的。

1.4 繁殖技術(shù)

配種工作組織不當(dāng)或方法不對(duì)，也是造成奶牛難育的原因之一。對(duì)奶牛發(fā)情表現(xiàn)觀察不足或因工作疏忽大意觀察不到，可造成漏配或配種不及時(shí)，直接導(dǎo)致受胎率下降。人工輸精技術(shù)不良，精液處理不當(dāng)也會(huì)導(dǎo)致奶牛的不孕。

2 采取的技術(shù)措施

2.1 實(shí)現(xiàn)能量、蛋白質(zhì)的平衡

為了防止?fàn)I養(yǎng)性難育的發(fā)生，應(yīng)根據(jù)奶牛的體況制定相應(yīng)的飼養(yǎng)管理方案，達(dá)到能量、蛋白質(zhì)的平衡。根據(jù)當(dāng)?shù)氐娘暳蟻?lái)源和從外地購(gòu)進(jìn)的飼料情況，體況較瘦、表現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良的奶牛，在一定的時(shí)間內(nèi)要加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)的補(bǔ)給，力求營(yíng)養(yǎng)均衡，即增加優(yōu)質(zhì)干草如苜蓿、柱花草和其它粗飼料如玉米青貯等的飼喂。體況較肥、表現(xiàn)為“肥胖綜合癥”的奶牛要減少能量飼料的飼喂量，特別是要減少精飼料飼喂，同時(shí)補(bǔ)充適量的粗飼料，并加大奶牛的運(yùn)動(dòng)量，每晝夜應(yīng)讓其自由活動(dòng)18h。根據(jù)奶牛的生理狀態(tài)在日糧中添加維生素ADE粉或注射補(bǔ)充維生素ADE，以及添加微量元素硒，有利于增加生殖道的抗感染力，提高配種時(shí)的受胎率和胚胎的成活率。鈣和磷的比例保持在（1.5～2.0）：1之間[1]。

2.2 保持飼養(yǎng)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定

保持牛群飼養(yǎng)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定，不能隨意更換飼養(yǎng)場(chǎng)地、飼料種類和飼養(yǎng)管理人員。牛舍和周圍環(huán)境要保持清潔，且通風(fēng)要良好。在炎熱季節(jié)要做好降溫工作，如使用電風(fēng)扇、噴淋等措施，減少牛群的熱應(yīng)激。要避開(kāi)在炎熱季節(jié)里配種；在這個(gè)階段要做好預(yù)防接種工作，為在適宜的季節(jié)里發(fā)情配種做好準(zhǔn)備。

2.3 子宮炎癥的治療

子宮炎癥治療的原則是抗菌消炎，促進(jìn)吸收，制止感染擴(kuò)散，排除分泌物，促進(jìn)子宮收縮，恢復(fù)子宮機(jī)能[3]。

2.3.1 子宮沖洗療法

通過(guò)直腸檢查子宮，可以進(jìn)行沖洗的，使用供體牛沖胚儀器來(lái)沖洗雙側(cè)子宮角。具體操作是采用二路式?jīng)_卵器沖洗。二路式?jīng)_卵器由帶氣囊的導(dǎo)管與單路管組成。導(dǎo)管用直腸把握法從子宮頸導(dǎo)入子宮角。導(dǎo)管中一路為注入和回收沖洗液用。通過(guò)氣囊導(dǎo)管打入空氣，使氣囊膨脹以固定導(dǎo)管在子宮角內(nèi)的位置和防止沖洗液倒流。氣囊膨脹固定導(dǎo)管的位置盡量靠近子宮角的基部，以便沖洗到整個(gè)子宮角。沖洗液經(jīng)單路管注入子宮角，每次30～60mL，然后將沖洗液回收。沖洗5次左右，回收液達(dá)到透明，就不必再?zèng)_洗，以免炎癥擴(kuò)散。為更好地沖洗子宮，可以用直腸內(nèi)的手掌輕輕擺動(dòng)子宮，但不要用力按摩子宮角，以免炎癥擴(kuò)散。

沖洗子宮時(shí)應(yīng)注意：嚴(yán)格遵守操作規(guī)程與無(wú)菌原則[3]。沖洗液為生理鹽水，溫度應(yīng)為45～50℃[3]，每500mL沖洗液要加入青霉素80萬(wàn)單位，以防止生殖道再次感染。視具體情況可以隔天1次或3～5天沖洗1次，沖洗完畢后給子宮內(nèi)注入適量的抗生素，每側(cè)20mL左右。這樣沖洗后注入抗生素處理2～4次有較好療效。

2.3.2 子宮內(nèi)灌注療法

（1）抗生素

由于子宮感染病原菌復(fù)雜，在治療時(shí)難以對(duì)病原菌進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，所以常常聯(lián)合使用抗生素，如土霉素與紅霉素配合，青霉素與鏈霉素配合等。藥液使用20mL左右，用無(wú)菌輸精器分別注入兩側(cè)子宮角。

（2）新宮得康

用無(wú)菌的輸精器將1支新宮得康平均分成2份，分別注入兩側(cè)子宮角，7天后重復(fù)1次，3或4次可達(dá)到療效。

（3）抗生素與新宮得康交叉使用

在使用抗生素注入子宮1天后，再用新宮得康1支注入子宮；或先使用新宮得康1支，7天后再使用抗生素。這樣反復(fù)3次左右也可以取得好的療效。

（4）露它凈與新宮得康聯(lián)合使用

先用無(wú)菌輸精器將露它凈注入雙側(cè)子宮角，讓子宮內(nèi)分泌物排除，3天后再用同樣方法注入1支新宮得康，輕者2次可以痊愈，重者4或5次可以痊愈。

2.4 利用激素促進(jìn)正常發(fā)情的技術(shù)

卵巢疾病主要為卵巢囊腫、卵巢持久黃體、卵巢靜止等，表現(xiàn)出不發(fā)情或發(fā)情不正常，技術(shù)熟練者可以通過(guò)直腸檢查和發(fā)情表象進(jìn)行基本診斷。通過(guò)使用以下技術(shù)能促進(jìn)奶牛的正常發(fā)情。

2.4.1 PG＋LHRH-A3肌肉注射法

▲ 患卵巢疾病的奶牛

PG即獸用前列腺素，由齊魯動(dòng)物保健品廠生產(chǎn)，規(guī)格0.322mg/支；LHRH-A3，由寧波激素制品有限公司生產(chǎn)，規(guī)格25μg/支。這種技術(shù)適用于卵巢黃體囊腫和卵巢持久黃體等卵巢疾病。給奶牛肌肉注射PG 0.644mg后24～72h內(nèi)觀察到發(fā)情的，可通過(guò)外觀觀察黏液和直腸檢查卵泡發(fā)育情況，確定奶牛配種時(shí)間。配種后1h內(nèi)再肌肉注射50～75μg LHRH-A3。

2.4.2 FSH+PG＋LHRH-A3肌肉注射法

促卵泡素（FSH），分國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口2種。國(guó)產(chǎn)的由中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所生產(chǎn)，規(guī)格為10mg/瓶；進(jìn)口的由加拿大Vetrephaim Canada Inc生產(chǎn)，規(guī)格為400 mg/瓶（內(nèi)容物含有大量佐劑）。這種技術(shù)適用于卵巢囊腫、卵巢靜止和卵巢持久黃體。FSH的使用量視奶牛體況而定，國(guó)產(chǎn)的使用3～5mg，進(jìn)口的使用120～200mg，分3天做遞減肌肉注射。在注射FSH的第2天注射0.644mg PG，注射完FSH的48h內(nèi)仔細(xì)觀察發(fā)情，有發(fā)情的檢查卵泡發(fā)育情況，確定奶牛配種時(shí)間。配種后肌肉注射50～75μg LHRH-A3。

2.4.3 PMSG+PG＋LHRH-A3肌肉注射法

PMSG由軍需醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，規(guī)格為1000國(guó)際單位/支。這種方法與2.4.2相似，PMSG的用量為500～700國(guó)際單位/頭。

以上3種方法可以起到治療難育奶牛卵巢疾病，促進(jìn)正常發(fā)情的作用。如果奶牛有發(fā)情但經(jīng)過(guò)直腸檢查卵泡發(fā)育不良，就應(yīng)放棄輸精，等到下個(gè)情期有發(fā)情時(shí)再做人工輸精。

2.5 人工輸精技術(shù)措施

2.5.1 奶牛發(fā)情觀察和鑒定

每天2次（牛群從運(yùn)動(dòng)場(chǎng)回到欄舍和從欄舍去運(yùn)動(dòng)場(chǎng)）對(duì)牛群進(jìn)行觀察。同時(shí)每天上午1次和下午1次要在欄舍對(duì)牛的后軀做仔細(xì)的觀察，重點(diǎn)在尾根毛是否凌亂，陰戶是否腫脹，是否流有黏液及靠近陰戶的尾根是否粘有黏液。有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)員可以通過(guò)這些觀察判斷奶牛是否發(fā)情。由于難育奶牛的發(fā)情表現(xiàn)不正常，所以，還要通過(guò)直腸檢查卵巢卵泡的發(fā)育來(lái)確定它的適時(shí)配種時(shí)間。

2.5.2 凍精解凍和檢查

凍精解凍要做到快取、快投、快溶解，讓凍精快速通過(guò)有害溫區(qū)-30～-10℃[4]。凍精解凍溫度在39～40℃間。在輸精之前要對(duì)本批次的凍精做顯微鏡檢查，質(zhì)量必須達(dá)到中華人民共和國(guó)頒布的《牛冷凍精液》GB 4143-84國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，否則堅(jiān)決不用。

2.5.3 輸精前做好子宮凈化

為了使子宮環(huán)境趨于理想化，有利于卵子的受精和胚胎的發(fā)育，可采用宮內(nèi)藥物進(jìn)行凈化，即在輸精前1h左右每頭牛用25mL生理鹽水溶解160萬(wàn)單位青霉素和100萬(wàn)單位鏈霉素的藥液，分半注入左右子宮角分叉處。

2.5.4 輸精時(shí)做到無(wú)菌操作

輸精器械必須保證無(wú)菌狀態(tài)，輸精時(shí)要保證無(wú)菌操作。在生產(chǎn)實(shí)踐中使用“蔣氏”細(xì)管輸精槍及“蔣氏”輸精外套來(lái)達(dá)到器械的無(wú)菌狀態(tài)。在輸精槍插入奶牛陰道時(shí)使用“蔣氏”輸精法操作[5]。如果在使用“蔣氏”輸精法不能將奶牛的陰門打開(kāi)時(shí)，可以讓助手用雙手將奶牛陰戶向后向上拉扯，使奶牛陰道露出大面積清潔部位，再按照“蔣氏”輸精法操作也可達(dá)到無(wú)菌目的。

2.5.5 正確做好直腸檢查確定卵巢排卵

由于難育奶牛使用性激素促使其發(fā)情和排卵，并且多數(shù)是經(jīng)產(chǎn)奶牛，不按常規(guī)排卵，即不能從陰戶外觀、黏液和時(shí)間推算來(lái)確定是否排卵。所以，要做直腸檢查，觸摸卵巢確定是否排卵。正確的做法是：要與第1次輸精相隔10～12h，如果沒(méi)有排卵再輸精1次，再做直腸檢查時(shí)也要相隔10～12h。連續(xù)輸精3次后直腸檢查仍沒(méi)有排卵的放棄輸精。因?yàn)?次輸精后不排卵的卵泡基本成閉鎖狀態(tài)。

2.5.6 正確使用LHRH-A3

在奶牛輸精后1h內(nèi)，視奶牛發(fā)情和機(jī)體狀況每次給予肌肉注射LHRH-A3 50μg或75μg不等。奶牛經(jīng)過(guò)直腸檢查不排卵要繼續(xù)輸精的，還要繼續(xù)注射LHRH-A3 。

3 結(jié)語(yǔ)

3.1 奶牛難育是一項(xiàng)綜合性、復(fù)雜性的難題，引起的因素包括營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境、季節(jié)、奶牛生物學(xué)特性、奶牛疾病以及技術(shù)人員等。使難育奶牛受孕不是一朝一夕的事情，要從多角度、多方面考慮和采取綜合性的技術(shù)措施。

3.2 筆者使用的子宮沖洗方法，對(duì)慢性和隱性子宮炎有很好的清理炎癥物和治療的作用。但是這種方法需要沖胚的儀器及熟練的沖胚技術(shù)人員操作，否則適得其反，容易弄傷子宮加劇炎癥。子宮沖洗時(shí)要避開(kāi)奶牛持續(xù)發(fā)情時(shí)間，因?yàn)榘l(fā)情時(shí)子宮在性激素的作用下處于充血狀態(tài)，并且輸卵管和子宮角的宮管結(jié)合部也處于開(kāi)放狀態(tài)，這個(gè)時(shí)間沖洗易加重子宮炎癥和輸卵管炎[6]。

3.3 對(duì)奶牛使用亞硒酸鈉、維生素E肌肉注射或日糧中添加維生素E和硒或添加維生素ADE，對(duì)預(yù)防奶牛的胎衣不下、子宮炎癥有很好的作用[7]，從而可以預(yù)防奶牛的難育。

3.4 在使用激素FSH 和PMSG時(shí)，由于奶牛本身生物學(xué)特性的原因，導(dǎo)致一側(cè)卵巢有多個(gè)卵泡發(fā)育，并且直腸檢查時(shí)不易確定其數(shù)量，所以會(huì)出現(xiàn)有多胞胎流產(chǎn)現(xiàn)象的發(fā)生。一般采取的預(yù)防措施是：卵巢2側(cè)有卵泡發(fā)育的，只往1側(cè)子宮角輸精。

[1] 穆秀明，趙月平.母牛難育的預(yù)防.黑龍江動(dòng)物繁殖，2002（4）：24～25

[2] 李勝利.奶牛繁殖疾病的營(yíng)養(yǎng)調(diào)理.見(jiàn)：第二屆中國(guó)奶牛發(fā)展大會(huì)報(bào)告暨論文集，2006（6）：18～20，108～116

[3] 魏鎖成，馬瑞有.牛子宮內(nèi)膜炎的致病因素及臨床治療.黃牛雜志，2006（3）：71～73

[4] 伍麗仙.提高牛人工授精受胎率技術(shù).黃牛雜志，2006（6）：74～76

[5] 蔣如明，韋英明，林澤繼.牛和水牛人工授精中蔣氏輸精方法介紹.見(jiàn)：中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物繁殖分會(huì)第十三屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集，2006（7）：476

[6] 張新慧、王振綱.奶牛子宮炎治療需要注意的幾個(gè)問(wèn)題.見(jiàn)：中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物繁殖分會(huì)第十三屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集，2006（7）：548

[7] 黃光云，王啟芝，文信旺等.亞硒酸鈉維生素E預(yù)防奶牛胎衣不下的效果觀察.廣西畜牧獸醫(yī)，2007（1）：28～29