血紅蛋白釋放試驗(yàn)與血液流變學(xué)檢測結(jié)果相關(guān)性的研究

王翠峰 ，高麗君 ，烏 蘭 ，蘇 燕 ，徐 軍 ，周立社 ，秦文斌

（1.包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古包頭 014010；2.包頭醫(yī)學(xué)院血紅蛋白研究室，內(nèi)蒙古包頭 014010）

2007年，本研究組在研究1例輕型β-地中海貧血病例的紅細(xì)胞電泳過程中偶然發(fā)現(xiàn)，在停電一段時(shí)間后再次電泳，該患者標(biāo)本從原點(diǎn)釋放出較多的血紅蛋白，從而開始創(chuàng)建血紅蛋白釋放試驗(yàn)（HRT）[1]。利用這種技術(shù)篩查一些普通外科住院患者的血液，其中有4例膽結(jié)石標(biāo)本的HRT結(jié)果有差異，另1例標(biāo)本是腦梗死后遺癥，其HRT異常最明顯[2]。在大量篩查過程中，筆者也注意到腦梗死及其后遺癥患者HRT增強(qiáng)者較多。由于血液流變學(xué)檢測在腦梗死輔助診斷中有一定的參考意義[3-6]，故決定研究HRT與血液流變學(xué)結(jié)果的關(guān)系，探討前者的可能作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 血液樣品來源

患者全血標(biāo)本均來自包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科2008年12月～2009年2月共48例門診樣本。所用儀器為普利生N6C全自動血液流變學(xué)分析儀。本文使用的數(shù)據(jù)來自血液流變學(xué)檢測報(bào)告單。

1.2 低滲37℃ HRT

每個(gè)標(biāo)本取全血 8 μl，加雙蒸水 12 μl，混勻后 37℃水浴保溫2 h。使用我科研究室的常規(guī)-淀粉瓊脂糖混合凝膠電泳[1]，將保溫后的標(biāo)本借助3 mm濾紙加在凝膠的陰極側(cè)。第一次電泳2 h（5 V/cm）。停電30 min后再電泳30 min，共3 h。然后用麗春紅、聯(lián)苯胺染色，拍照留圖。

1.3 結(jié)果判定

首先觀察第2次釋放（定點(diǎn)釋放）時(shí)有無血紅蛋白泳出，有定點(diǎn)釋放血紅蛋白者判為陽性結(jié)果，無則為陰性（定為0級）。出現(xiàn)陽性結(jié)果者進(jìn)行數(shù)量比較。定點(diǎn)釋放的血紅蛋白數(shù)量可參考碳酸酐酶、血紅蛋白A1、A2區(qū)帶，由少到多定為1、2、3、4 級。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 11.0軟件進(jìn)行分析。用Spearman相關(guān)分析計(jì)算出HRT與全血黏度的高切、中切、低切的相關(guān)性，P＜0.05表示有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 HRT結(jié)果

一次電泳檢測12個(gè)定點(diǎn)釋放結(jié)果見圖1。

2.2 相關(guān)分析結(jié)果

HRT與各種全血黏度值的相關(guān)系數(shù)分別為：HRT與低切 r=0.642（P＜0.001）、HRT 與中切 r=0.636（P＜0.001）、HRT 與高切 r=0.641（P＜0.001）。

3 討論

HRT創(chuàng)建不久，由于它能在諸多臨床標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)差異、查出問題，引起極大關(guān)注。地中海貧血是一種遺傳性疾病，本法能查出患者及其家族成員[1]，這在理論和實(shí)踐上都有重要意義。接著又將HRT深化和細(xì)分為室溫等滲HRT（上述HRT屬于此類）、室溫低滲 HRT、等滲 37℃ HRT、低滲 37℃ HRT，靈敏度逐級提升，效果更加明顯。筆者利用低滲37℃HRT篩查一些普通外科住院患者的血液，其中有4個(gè)膽結(jié)石標(biāo)本，其HRT結(jié)果有明顯差異，另1例腦梗死后遺癥患者，其HRT最明顯[2]。由遺傳性疾病到普通外科患者，都能進(jìn)入本項(xiàng)技術(shù)的檢測范圍，它的作用機(jī)制如何，這是迫切需要解決的問題。HRT機(jī)制研究涉及面很廣，本文從它與血液流變學(xué)關(guān)系角度來探討HRT的作用機(jī)制。

本實(shí)驗(yàn)證明，HRT與血液流變學(xué)結(jié)果有一定的相關(guān)性。幾種全血黏度值中，低切反應(yīng)細(xì)胞的聚集性、高切反應(yīng)細(xì)胞的變形性，HRT與兩者都有關(guān)，說明紅細(xì)胞的變形能力降低，聚集性增強(qiáng)，黏度加大，造成第一次釋放后原點(diǎn)殘留增多，第二次釋放時(shí)才離開紅細(xì)胞，表現(xiàn)為再釋放血紅蛋白增多。已知與紅細(xì)胞變形性有關(guān)的疾病很多，地中海貧血也是其中之一，血紅蛋白H病、重型β地中海貧血等紅細(xì)胞的變形能力明顯降低，而輕型β地中海貧血紅細(xì)胞的變形能力接近正常[7]。這在總體上與本研究結(jié)果相符，但在細(xì)節(jié)上略有不同，本研究組的研究能夠非常清楚地查出輕型β地中海貧血[1]，可見，HRT的反應(yīng)能力更強(qiáng)，其作用機(jī)制可能還包括紅細(xì)胞變形性和聚集性以外的因素，HRT的機(jī)制尚待深入研究。

[1]秦文斌,高麗君,蘇燕,等.血紅蛋白釋放試驗(yàn)與輕型β-地中海貧血[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,23(6):561.

[2]韓麗紅,閆斌,高雅瓊,等.普通外科患者血紅蛋白釋放試驗(yàn)的比較研究[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009,8(6):67-68.

[3]秦任甲.臨床血液流變學(xué)[M].北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社,2006.

[4]董曼莉,逢淑華,翟關(guān)中,等.腦梗塞病人血液流變學(xué)的變化[J].中國血液流變學(xué)雜志,2004,14(2):221.

[5]高中芳,席向紅.老年腦梗塞患者血液流變學(xué)指標(biāo)檢測分析[J].中國血液流變學(xué)雜志,2005,15(1):73.

[6]丁翊,趙紅紅.腦梗塞患者血液流變學(xué)和血脂指標(biāo)測定[J].微循環(huán)雜志,2004,14(3):88,90.

[7]金永娟.紅細(xì)胞可變形性與溶血性貧血[J].中華血液學(xué)雜志,1987,8(2):85.