慢性乙型肝炎病毒感染者血清TNF-α和IFN-γ水平分析

侯青順，仉海峰，閆秀萍，柳富會(huì)，李建忠

（山東省青島市傳染病醫(yī)院，山東青島 266033）

人體感染乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）后主要是由細(xì)胞毒T細(xì)胞參與的細(xì)胞免疫應(yīng)答進(jìn)行清除，同時(shí)因細(xì)胞免疫應(yīng)答導(dǎo)致肝損傷，而IFN-γ和TNF-α是人體感染HBV后重要的免疫應(yīng)答細(xì)胞因子，其水平差異可能影響慢性HBV感染的結(jié)局。為了解血清IFN-γ和TNF-α水平在慢性HBV感染中的作用，本文對(duì)其進(jìn)行了檢測(cè)，并探討其水平差異與慢性HBV感染結(jié)局的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇我院住院的159例慢性HBV感染患者，包括慢性乙型肝炎（CHB）患者87例，乙型肝炎肝硬化（LC）患者38例，HBV相關(guān)肝細(xì)胞癌（HCC）患者34例。慢性乙型肝炎和肝硬化診斷符合2000年全國病毒性肝炎會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，肝細(xì)胞癌診斷根據(jù)生化指標(biāo)、AFP定量以及影像學(xué)或病理學(xué)確診。

1.2 方法

IFN-γ和TNF-α定量檢測(cè)均采用ELISA法，試劑盒分別購于深圳炬英生物科技有限公司和美國Rapidbio公司。檢測(cè)步聚嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析，采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行秩和檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

CHB組、LC組和 HCC組 3組患者的血清 IFN-γ和TNF-α水平比較，見表1。

2.1 TNF-α水平的比較

在所觀察的病例當(dāng)中，TNF-α水平在3組中均有明顯升高，其中又以LC組和HCC組升高為甚，該2組與CHB組比較，有非常顯著性差異（P＜0.001），但LC組和HC組比較無顯著性差異。

2.2 IFN-γ水平的比較

IFN-γ水平在3組間無顯著性差異（P=0.208）。

3 討論

乙型肝炎病毒感染后所致的病理過程是由免疫細(xì)胞及其所分泌細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫反應(yīng)所引起的[2]。一方面是HBV特異性CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)引起感染肝細(xì)胞清除，并導(dǎo)致肝炎發(fā)生；另一方面則是活化后的免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子，由細(xì)胞因子參與介導(dǎo)非溶細(xì)胞性免疫反應(yīng)，以提高人體對(duì)HBV的清除作用。人體感染HBV后，免疫細(xì)胞可分泌IFN-γ和TNF-α參與免疫應(yīng)答，二者在機(jī)體與HBV相互作用的免疫反應(yīng)過程中具有重要的調(diào)節(jié)作用，這兩種細(xì)胞因子對(duì)HBV慢性感染結(jié)局的可能影響已逐漸受到重視，并且已取得初步成果。

表1 3組患者間血清IFN-γ和TNF-α水平的比較（pg/ml）

已有研究表明，在HBV感染后，TNF-α不僅能夠參與宿主的抗HBV免疫應(yīng)答，同時(shí)還是一個(gè)重要的炎癥介質(zhì)，它可以介導(dǎo)HBV感染后肝內(nèi)炎癥的發(fā)生和肝臟細(xì)胞損傷。馬衛(wèi)華等[3]研究認(rèn)為肝硬化患者血清TNF-α水平與肝硬化的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。Zhang等[4]的研究發(fā)現(xiàn)，在慢性HBV感染者中，血清TNF-α水平隨著慢性化程度加重而逐漸升高。并且，在CHB中TNF-α的水平高低與肝臟炎癥的活動(dòng)程度也存在正相關(guān)。Odeh等[5]研究結(jié)果表明，肝性腦病的嚴(yán)重程度與TNF-α水平呈正相關(guān)。這些研究結(jié)果從不同角度反映了血清TNF-α水平與肝病的嚴(yán)重程度相關(guān)。本組研究資料顯示，在CHB、LC和HCC 3組中，血清TNF-α水平均有明顯升高，其中又以LC和HCC兩組升高為甚，該兩組分別與CHB組比較，均有非常顯著性差異（P＜0.001），提示血清TNF-α水平與HBV感染者的病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，這一結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了TNF-α水平變化可能會(huì)影響慢性HBV感染者臨床結(jié)局的觀點(diǎn)。另外，本研究中肝硬化病例主要為Child-Pugh B或C級(jí)患者，LC組血清TNF-α水平高于HCC組可能與所選LC患者肝臟損害較為嚴(yán)重有關(guān)。

另外，IFN-γ是機(jī)體感染HBV的過程中免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用。本研究結(jié)果顯示，血清IFN-γ水平與不同臨床結(jié)局的HBV感染者之間并無顯著性差異，究其原因可能是IFN-γ主要參與調(diào)節(jié)宿主對(duì)HBV的免疫應(yīng)答，而非直接參與炎癥反應(yīng)，IFN-γ雖然能夠激活肝內(nèi)多種細(xì)胞產(chǎn)生趨化因子受體和金屬蛋白酶等因子，再由后者募集炎癥細(xì)胞到肝臟，引起肝臟炎癥[6]，但是其作用主要是引起相應(yīng)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。因此，在IFN-γ水平和肝臟損害之間并無正相關(guān)關(guān)系。

總之，在HBV慢性感染過程中IFN-γ和TNF-α均是重要的細(xì)胞因子，但是其作用機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，并且參與HBV感染免疫反應(yīng)的因素眾多。雖然已初步了解IFN-γ和TNF-α在機(jī)體的免疫反應(yīng)過程中具有重要的調(diào)節(jié)作用，但是，它們?cè)贖BV慢性感染臨床轉(zhuǎn)歸中的作用還遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒有闡明，所以尚需今后進(jìn)一步深入研究。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì).病毒性肝炎防治方案[J].中華肝臟病雜志,2000,8(6):324-329.

[2]Francis VC.Viruses,immunity,and cancer:lessons from hepatitis B[J].American Journal of Patholgy,2000,156(4):1117-1132.

[3]馬衛(wèi)華,孫勝菲.60例肝硬化患者IL-6和TNF-α水平的觀察研究[J].中國社區(qū)醫(yī)師,2006,8(11):69.

[4]Zhang W,Yue B,Wang GQ,et al.Serum and ascites levels of macrophage migration inhibitory factor,TNF-α and IL-6 in patients with chronic virus hepatitis B and hepatitis cirrhosis[J].Hepatobiliary Panereat Dis Int,2002,1(4):577-580.

[5]O deh M,Sabo E,Srugo I,et al.Serum levels of tumor necrosis factor-α correlate with severity of hepatic encephalopathy due to chronic liver failure[J].Liver Int,2004,24(2):110-116.

[6]Sitia G,Isogawa W,Iannacone M,et al.MMPs are required for recruitment of antigen-nonspecific mononuclear cells into the liver by CTLs[J].J Clin Invest,2004,113(8):1158-1167.