應(yīng)用HPLC法測定苯芐乙草胺混配除草劑中的有效成分

金晨鐘，王義成，劉桂英，陳躍進(jìn)，王朝輝，曾永賢，謝 晶，屈雙婷

（湖南人文科技學(xué)院，湖南 婁底 417000）

40%苯芐乙草胺WP由苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和乙草胺3種原藥按科學(xué)配比加工而成，是一種新型復(fù)配稻田除草劑，并能同時適用于我國北至東北三省、南到海南省等各種生態(tài)條件的水稻拋秧田、移栽田除草，可有效防除水田禾本科、闊葉類及莎草科雜草,綜合防效達(dá)95%左右，對作物則很安全[1－2]。該除草劑配比和應(yīng)用范圍均為國內(nèi)首創(chuàng),其分析方法也少見報道。筆者采用外標(biāo)法，在同一色譜條件下完成苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和乙草胺3個有效成分的含量測定,并對其線性關(guān)系、精密度、添加回收率試驗進(jìn)行測定，獲得了比較滿意的結(jié)果。

1 供試材料

1.1 試劑

所用試劑為乙腈和甲醇（色譜純）、二次蒸餾水、冰醋酸（AR）等。苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和乙草胺標(biāo)準(zhǔn)品的含量大于98%。

1.2 儀器

所用儀器為LC-10APlus液相色譜儀（具可調(diào)波長紫外分光檢測器），帶色譜工作站。

1.3 色譜操作條件

色譜柱，C18（5μm），250 mm×4.6 mm（id）不銹鋼柱；流動相，甲醇∶水=70∶30（V/V，下同）；水用冰醋酸調(diào) pH=3；檢測波長，230 nm；流速，1.0 mL/min；進(jìn)樣體積，20 μL；柱溫30℃。

在此操作條件下，典型色譜圖如圖1。

1.4 測定步驟

圖1 典型色譜圖

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 分別稱取芐嘧磺隆、乙草胺、苯噻酰草胺標(biāo)樣各約50 mg（精確至0.1 mg）于3個100 mL容量瓶中，用乙腈溶解，定容。用移液管準(zhǔn)確移入上述芐嘧磺隆、乙草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液各1 mL和苯噻酰草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液10 mL于100 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻后，將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用0.45μm濾膜過濾備用。

1.4.2 試樣溶液配制 稱取混勻后的試樣200 mg（精確至0.1 mg）于100 mL容量瓶中，用少量乙腈溶解，并用流動相稀釋至刻度，搖勻離心后用0.45 μm濾膜過濾后備用。

1.4.3 測 定 在上述色譜條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液，待相鄰兩針響應(yīng)值變化小于1.0%，按標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣檢測，用兩次重復(fù)所得面積計算結(jié)果。

1.5 計算方法

試樣中苯噻酰草胺(芐嘧磺隆或乙草胺)含量X（%）按式（1）計算：

式中：A1——標(biāo)準(zhǔn)溶液中苯噻酰草胺（或芐嘧磺隆、乙草胺）峰面積；A2——試樣溶液中苯噻酰草胺（或芐嘧磺隆、乙草胺）峰面積；m1——標(biāo)樣溶液中苯噻酰草胺（或芐嘧磺隆、乙草胺）的質(zhì)量；m2——試樣的質(zhì)量；P——標(biāo)樣中苯噻酰草胺（或芐嘧磺隆、乙草胺）的純度（%）。

2 結(jié)果與分析

2.1 流動相及波長的選擇

經(jīng)過大量反復(fù)的試驗確定甲醇∶水=70∶30為流動相。其中水用冰醋酸調(diào)至pH=3，檢測結(jié)果峰形對稱，分離好。王德海等方法表明[3-5]，苯噻酰草胺的最大吸收在218 nm處，芐嘧磺隆的最大吸收在234 nm處，乙草胺多采用氣譜法分析，綜合樣品中3個有效成分的含量，波長選定為230 nm。此時，乙草胺、芐嘧磺隆和苯噻酰草胺均有較大吸收。

2.2 線性范圍

將苯噻酰草胺配制成 0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 mg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，將芐嘧磺隆和乙草胺配成 0.025、0.050、0.075、0.100、0.125 mg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，在上述操作條件下進(jìn)樣檢測，以溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，分別測得線性關(guān)系曲線圖（圖2，圖3，圖4）?；貧w方程分別為 Y芐=41.329 x-0.031（R2=0.999 8），Y乙=21.083 x-0.016 6（R2=0.999 3），Y苯噻=4.891 2 x-1.670 3（R2=0.999 6）。

圖2 芐嘧磺隆線性關(guān)系

圖3 乙草胺線性關(guān)系

圖4 苯噻酰草胺線性關(guān)系

2.3 方法精密度

對A-1號樣品進(jìn)行了5次測量（見表1），測得苯噻酰草胺、芐嘧磺隆、乙草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.268 8、0.064 2、0.059 4,變異系數(shù)分別為0.79%、1.77%、1.97%，方法精密度高。

表1 精密度試驗

2.4 方法準(zhǔn)確度

采用標(biāo)準(zhǔn)品加入法進(jìn)行準(zhǔn)確度測定，結(jié)果見表2。

從表2可看出,苯噻酰草胺、芐嘧磺隆、乙草胺回收率分別為99.54%～101.09%、98.37%～102.30%、99.34%～101.65%，方法準(zhǔn)確度高。

表2 回收率試驗（mg）

3 小結(jié)

綜上所述,采用高效液相色譜法同時測定40%苯芐乙草胺WP中苯噻酰草胺、芐嘧磺隆、乙草胺的有效成分，方法準(zhǔn)確、快速，分離效果好，能夠滿足此類產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制。

[1]金晨鐘，王義成，李四軍，等.40%苯芐乙草胺WP防除水稻拋秧田雜草效果研究[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，（12）：72-74.

[2]屈雙婷，金晨鐘，李四軍，等.三元復(fù)配除草劑對稗草和鱧腸的室內(nèi)藥效研究[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，（11）：73-74，78.

[3]王德海，譚 偉，吳曉波，等.混合粉劑撲草凈和乙草胺的反相高效液相色譜分析 [J].云南民族大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2010，19（3）：198-200.

[4]高如瑜，趙靜輝.芐嘧磺隆和乙草胺混劑液相色譜分析[J].農(nóng)藥，1997，36（12）：24-25.

[5]國外農(nóng)藥品種手冊編委會.國外農(nóng)藥品種手冊 (新版合訂本)[M].沈陽：化工部農(nóng)藥信息總站，1997.