豬藍(lán)耳病的RT-PCR檢測及其防制建議

楊 俊 ，楊愛梅 ，周望平 ，※

（1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南 長沙 410131；2.湖南省懷化市畜牧水產(chǎn)局防檢站，湖南 懷化 418000）

1 基本情況

2010年8至9月間，湖南多地發(fā)生疫情，特別是散戶和小規(guī)模豬場發(fā)病相對較為嚴(yán)重，多數(shù)豬場有不同程度的死亡，給養(yǎng)殖戶帶來了比較大的經(jīng)濟(jì)損失。我們于9月上旬和中旬分別在長沙寧鄉(xiāng)和益陽大通湖區(qū)兩個發(fā)病嚴(yán)重地區(qū)采集了5頭豬樣，進(jìn)行了豬藍(lán)耳病的RT-PCR檢測。

2 臨床解剖

此次發(fā)病以母豬和小豬為主，發(fā)病豬高燒，皮膚發(fā)紅，發(fā)病初期少食，不食，嗜睡，有的病豬后肢、耳尖發(fā)鉗，小豬有時有腹瀉，部分病豬背脊上有紅點，母豬有時咳嗽，嚴(yán)重的有流涕，鼻孔有混濁分泌物，急性死亡病例病程多在1～2天，多數(shù)病豬持續(xù)約1周以上，多因衰竭而死。寧鄉(xiāng)豬的剖檢可見肺蝦樣變、喉頭有大量的粘液，胸腔有大量清亮積液、腎有點狀出血；而在益陽大通湖的病豬剖檢可見肺有病變區(qū)，脾邊緣不整齊，可見鋸齒狀，喉頭無出血和粘液，但是剖檢的仔豬，腎出血十分嚴(yán)重。

3 實驗室檢測

根據(jù)湖南疫病的流行情況，我們對采集來的5份樣品進(jìn)行了豬瘟和豬藍(lán)耳病病原的檢測工作。依據(jù)豬瘟和豬藍(lán)耳病病毒基因的保守性序列，設(shè)計了特異性引物，分別擴(kuò)增豬瘟病毒基因5翻譯區(qū)和豬藍(lán)耳病病毒M蛋白的部分序列，擴(kuò)增的目的片段長度都在200bp左右。

4 檢測結(jié)果

從PT-PCR結(jié)果中（圖1），可以見到在第2、3和第4泳道都出現(xiàn)200 bp左右的特異性條帶，與我們設(shè)計引物擴(kuò)增的藍(lán)耳病病毒基因片段長度相符。但是豬瘟檢測全部為陰性。

圖1 5個樣品的RT-PCR檢測電泳圖

圖1中M表示DNA marker，泳道1～10分別表示樣品，1～5為藍(lán)耳病檢測，6～10為豬瘟檢測；其中泳道1、6為為大通湖1號樣，2、7為大通湖2號樣，3、8 為寧鄉(xiāng) 1 號樣，4、7 為寧鄉(xiāng) 2 號樣，5、10 為寧鄉(xiāng)3號樣。

5 分析與討論

5.1 疫病的流行特點

繼2006、2007年豬藍(lán)耳病大肆流行以來，全國各地加大了此病的防控力度，取得了很好的效果，有效遏制了該病的大范圍流行和傳播，然而，通過臨床檢測發(fā)現(xiàn)，此病還廣泛存在于各豬群，控制不好，很容易造成地方性流行，成為各地生豬生產(chǎn)的一種隱患。通過走訪調(diào)查，發(fā)現(xiàn)，湖南此次疫情，多為地方性小范圍流行，特別是散戶和小規(guī)模豬場發(fā)病和死亡相對嚴(yán)重。其原因在于，散戶和小規(guī)模豬場在養(yǎng)殖管理方面不規(guī)范，體現(xiàn)：（1）場址建設(shè)和布局不合理，如益陽大通湖區(qū)發(fā)病豬場選在公路邊，且各個豬場相距很近，病死豬隨便丟棄，不利于疫病防控；同時，豬場內(nèi)通風(fēng)換氣條件不好，夏天高溫時欄舍空氣不流通，溫度過高，豬的應(yīng)急反應(yīng)大；（2）防疫措施不到位，經(jīng)過對發(fā)病豬場的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)大多數(shù)散養(yǎng)戶和小規(guī)模豬場，免疫接種最多的疫苗就是豬瘟疫苗，藍(lán)耳病疫苗接種率非常低；另外，基本的防疫手段都沒有，大多數(shù)豬場都沒有嚴(yán)格的消毒措施。（3）流通監(jiān)管不足，此次調(diào)查，還發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)養(yǎng)殖戶，為了減少損失，豬一旦發(fā)病，馬上進(jìn)行處理，以較低的價格出售，這樣為疫病的進(jìn)一步傳播提供了便利。

5.2 疫病病因分析

此次疫病在湖南各地呈地方性小規(guī)模發(fā)生，臨床癥狀多以發(fā)燒為主，急性死亡不多，病程多在1個星期左右，少食或不食，最終多預(yù)后不良，衰竭而死的病例多見。剖檢可見多臟器都有不同程度的病變，另外從實驗室的PT－PCR檢測來看，5個樣品中有3個檢測出了藍(lán)耳病病毒，從這一來看，此次疫病的流行還是與藍(lán)耳病有很大關(guān)系。根據(jù)臨床經(jīng)驗和病毒感染對宿主的危害來分析，在藥物和疫苗的雙重壓力下，流行的大多數(shù)病毒性疫病多呈現(xiàn)非典型性，向溫和性方向發(fā)展，引起感染后，一般不會引起豬只的急性死亡（也有少數(shù)急性型發(fā)生）。綜上所述，此次發(fā)病首先應(yīng)該是在飼養(yǎng)環(huán)境惡劣等應(yīng)激因素下，引起了病毒感染，特別是豬藍(lán)耳病病毒的感染普遍存在于各發(fā)病豬場，引起發(fā)燒，在消毒等基本防控措施不到位的豬場，繼發(fā)了細(xì)菌性感染，特別是呼吸系統(tǒng)的病菌感染，從而導(dǎo)致發(fā)病豬場出現(xiàn)急性死亡病例增多。

6 防控措施

根據(jù)此次疫病發(fā)生發(fā)展的規(guī)律，做好防控，特別是針對散戶和中小規(guī)模豬場，要想減少養(yǎng)豬風(fēng)險，首先，必須做好疫苗免疫工作，根據(jù)近幾年，湖南省及周邊省市的疫病流行特點，有目的做好幾種疫病的疫苗接種工作，比如，豬藍(lán)耳病、豬瘟、豬口蹄疫等；其次，規(guī)范飼養(yǎng)管理，做好日常防控工作，包括改善欄舍環(huán)境，做好通風(fēng)、通氣和冬季保暖，減少應(yīng)激原，做好常規(guī)消毒工作。最后，當(dāng)疫病發(fā)生時，控制好細(xì)菌繼發(fā)感染，特別是呼吸道疫病?！?/p>

[1]蘇 雙，任 銳，呂雪峰，等.我國豬高熱病的流行現(xiàn)狀、流行趨勢與防制對策[J].吉林畜牧獸醫(yī),2010,(5):5～7.

[2]何世成，劉道新，邱伯根，等.2001～2008年湖南省豬群疫病流行情況分析[J].中國畜牧獸醫(yī)，2009，（10）：158～160.

[3]邱美珍，杜麗飛.湖南寧鄉(xiāng)豬無名高熱病流行的調(diào)查[J].南方養(yǎng)豬，2007，（3）：29～31.