轉NAS基因匍匐剪股穎坪用特性灰色關聯(lián)度分析

孫 鏖 ，李科云 ，※，鄧薈芬 ，李 雄

（1.湖南畜牧獸醫(yī)研究所,湖南長沙410131；2.湖南生物機電職業(yè)技術學院，湖南長沙410130）

1 材料和方法

1.1 材料來源

實驗于2007年9月～2009年4月在湖南農(nóng)業(yè)大學教學實驗基地進行,土質(zhì)為紅壤土。湖南長沙處于北緯 24°39'～30°08'，東經(jīng) 108°47'～114°15'之間，屬大陸型中亞熱帶季風濕潤氣候。年平均氣溫在16～18℃之間，一年之中，1月最冷，月平均氣溫一般為 4～7℃；7月最熱，月平均氣溫為27～38℃。無霜期為 261～313d。年平均降水量1200～1700mm。4～9月降水量約占全年的 65%～70%左右。相對濕度82%～84%，日照時數(shù)在1300～1900h之間，年太陽總輻射為384 928～481 160 J/cm2。冬春盛行偏北風，夏季多偏南風。實驗地表層15 cm經(jīng)過土壤改良（按體積含細沙20%、泥炭土10%、加華草坪專用復合肥3%），充分耙松整平，除去雜質(zhì)，灌水經(jīng)自然沉降后再精細整平表土作實驗用地。

材料由湖南農(nóng)業(yè)大學植物遺傳工程課題組培育。均為轉NAS基因匍匐翦股穎4個株系以及1個對照株系。

轉基因株系：①號：k.10.12.e；②號：k.12.11.i；③號：k.12.16.j；④號：k.10.12.b

對照株系：⑤號：ck.11.3。

1.2 試驗設計與田間管理

采用分株的方式，對轉基因匍匐剪股穎與非轉基因匍匐剪股穎進行小區(qū)隨機排列栽種。小區(qū)長2.2m，寬2.1m，中間用20cm寬的磚塊隔開，3次重復。2006年10月播種，人工撒播，劃區(qū)播種。播種后1周每天灑水保持土壤濕潤；以后根據(jù)土壤墑情及草種的耐旱程度進行澆水，至成坪前約每6～7天澆灌一次，一般在下午進行；不進行修剪；實驗地田間管理粗放，除草本著拔早、拔小的原則及時清除雜草；夏秋季病蟲害發(fā)生時及時進行防治。選取5個點，采樣使用“Z”字型采樣法每個點重復5次，求平均值。

1.3 調(diào)查項目及評價方法

觀察供試品種的出苗期，成坪期，黃綠期、枯黃期、返青期。每月中旬按國際通用的草坪品質(zhì)等級標準1～9級制評價體系，分別對草坪密度、葉色、葉片質(zhì)地、均勻度、觀賞性、抗旱性、抗寒性、抗病性等進行定期打分評定，遇到特殊天氣隨時觀察各草品種的反應，進行評價。

1.4 分析方法

按灰色系統(tǒng)理論，把參試品種看作一個灰色系統(tǒng)，把每個品種視為該系統(tǒng)中的一個因子，計算系統(tǒng)中各因子的關聯(lián)度，關聯(lián)度越大的品種與理想品種的相似程度越高，反之則越低。根據(jù)湖南氣候?qū)Σ萜翰莘N的綜合要求，確定各性狀的上限指標，構造一個理想品種，其主要性狀值優(yōu)于或等同于參試品種。數(shù)據(jù)處理，關聯(lián)系數(shù)及關聯(lián)度計算方法及步驟參見馬金豐等文獻進行。

2 結果與分析

2.1 草坪草分株苗期以及成坪后生長速度比較

從分株初期到分株莖成活后兩個月期間，計算分株苗生長速度；2008年6月份測得成坪后生長速度，結果見表1。

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實驗結果表明，轉基因植株與對照植株在分株苗期生長速度差異不明顯，基本持平。而在成坪后的生長速度稍有差異。從表1可以看出，實驗材料成坪后的生長速度均比分株苗期的生長速度快。轉基因植株與對照植株在肥水充足的條件下，生長速度各不相同。其中對照植株（5號材料）生長速度最快，而轉基因植株2號材料生長速度最慢。

2.2 轉基因植株與對照植株綠度以及葉片質(zhì)地比較

五個株系草坪草的綠度評定結果，見表2。

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在整個田間性狀評定期間，肥水充足的情況下，轉基因植株和對照植株的綠度相差不大。但是在全期綠度表現(xiàn)中，則可以看出，轉基因植株在高溫干旱、低溫干旱和低溫寒冷的天氣的情況下的表現(xiàn)明顯要強于對照植株。

五個株系草坪草葉片質(zhì)地評定結果從表2：上可以看出，在肥水條件足夠的情況下，各株系的葉片質(zhì)地差異不大。

2.3 轉基因植株與對照植株抗旱性比較

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2007年7～9月份期間，五個株系草坪草由于受高溫和干旱影響，不同株系的越夏性狀表現(xiàn)不同。5個株系草坪草在這3個月中的抗性性狀評定結果見表3。

從表3可以看出，轉基因植株的抗旱性明顯強于對照植株，而轉基因植株之間的抗旱性的差異不大。對照植株在夏季地上部分大部分枯死，表現(xiàn)出很差的越夏性能。

2.4 轉基因植株與對照植株均勻度、密度以及成坪高度比較

從草坪的密度均一性和高度均一性來評定草坪的均勻度，其結果見表4。

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從表4可以看出，經(jīng)過一年的生長后，在肥水條件充足的情況下，五個株系草坪草的均勻度稍有差異，成坪高度差異不明顯，而密度差異也不是很明顯。

2.5 草坪草坪用特性關聯(lián)度分析

經(jīng)過一年多的田間性狀評價，我們已經(jīng)較清楚地了解所研究的轉基因草坪草及其對照品種的一些田間性狀表現(xiàn)，各性狀評定統(tǒng)計結果見表5。

表5 草坪草全部坪用性狀統(tǒng)計

為了進一步掌握各株系的整體表現(xiàn)，需要比較全面地綜合分析它們的各個性狀。我們采用灰色關聯(lián)度分析的方法，以評出各轉基因植株與對照植株間的優(yōu)劣，結果見表6、表7。

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從關聯(lián)度分析結果可知，關聯(lián)系數(shù)最大的是轉基因植株①號（k.10.12.b）株系，與標準品種關系最接近，表明該株系性狀表現(xiàn)最好；而對照植株⑤號（Ck.11.3）株系關聯(lián)系數(shù)最小，表明該品種與標準品種關系最遠，它的性狀表現(xiàn)最差。有關聯(lián)系數(shù)依次排列獲得個株系間的關聯(lián)序，見表9。從關聯(lián)序可看出，轉基因植株性狀表現(xiàn)整體都要比對照植株好。

3 結論

在實驗中，共評價草坪草的多個坪用性狀，這些坪用性狀均能較好地反映草坪草的品質(zhì)，最后綜合這些評價性狀，獲得個株系較為可觀的整體質(zhì)量表現(xiàn)。但在評價的性狀中，大部分是采用目測方法完成的，評定標準比較簡單。為了更客觀、更深入的了解草坪草的各種坪用特性，仍然需要結合其它的評定方法和標準。如綠度評價中，除了采用顏色級別來判斷草坪草的綠度變化規(guī)律外，還可以通過測量草坪草葉片的葉綠素含量來反映綠度變化情況。在抗旱性能評定中，實驗中根據(jù)草坪草地上部分性狀表現(xiàn)來判斷各株系的抗旱性，這個是較宏觀的性狀評定方法。若要更準確的反映其抗旱能力，需要體現(xiàn)抗旱性鞥你的生理生化指標的測定。

草坪草坪用特性很多，不同用途的草坪草它的質(zhì)量評價體系標準也有差別，如運動場草坪草的耐踐踏性能就要優(yōu)于其它用途的草坪草。實驗中評價的坪用性狀指標有限，要更綜合地反映草坪草的各種坪用特性，需要考慮更多的性狀指標。特別是在抗旱能力方面，有待于進一步挖掘研究。

目前，常用在草坪草質(zhì)量綜合評價的統(tǒng)計分析方法是灰色理論系統(tǒng)中的關聯(lián)度分析。通過該方法，獲得品種與標準品種的關系，從而篩選出草坪草質(zhì)量的優(yōu)劣。許多研究結果表明該方法用于草坪草質(zhì)量的評定是有效的。本試驗也表明，灰色關聯(lián)度分析結果與性狀評定分析結果較一致，同時也與實驗室室內(nèi)實驗結果較為一致，它在實踐中有一定的實際意義。但該方法若僅基于有限的一次、兩次草坪草性狀指標數(shù)據(jù)進行關聯(lián)度分析，從而判斷草坪草的質(zhì)量，就不能全面、客觀地了解草坪草的品質(zhì)。因此，在對草坪草性狀評價數(shù)據(jù)的處理時，若能結合其它分析方法，我們就能夠獲得更全面、科學的結果。 □

[1]孫吉雄.草坪學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1995.

[2]李敏，蔡朵珍.草坪地被植物引種[A].面向2i世紀的中國草坪科學與草坪業(yè)[C].北京：中國農(nóng)業(yè)大學出版社，1998.

[3]白史且，韓烈保，肖飚.國外冷季型草坪草種在成都引種適應性評價[J].草原與草坪，2000，(1)：23～25.

[4]馬金豐，王紹濱.灰色系統(tǒng)理論應用于谷子品種綜合評估初探[J].粟類作物，1991，(1)：28～33.

[5]李平路，孫全軍，張志軍，等.應用灰色關聯(lián)度分析綜合評價優(yōu)質(zhì)小麥新品種[J].種子科技，2001，(2)：98～99.

[6]曾北艷.小麥親本組合高產(chǎn)潛力的灰色綜合評價[J].作物學報，1994，20(2)：198～208.

[7]高素玲.灰色關聯(lián)度分析法應用于玉米雜交種綜合評判的初探[J].玉米科學，1995，3(2)：21～24.

[8]關建明.灰色關聯(lián)度分析法應用于水稻品種綜合評判的探索[J].種子，1990，(3)：33～35.