薄層色譜法鑒別睡安膠囊的研究

鐘力 洪美華 宋增炫 周俊述

睡安膠囊收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第二十冊(cè)，由酸棗仁(炒)、五味子、遠(yuǎn)志、首烏藤、丹參、石菖蒲、知母、甘草、茯苓等藥味組方，有養(yǎng)血安神，清熱除煩之功效，主治心煩不寐，怔忡驚悸，夢(mèng)多易醒或久臥不眠。睡安膠囊原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中只有一個(gè)化學(xué)反應(yīng)及知母的薄層鑒別，未收載五味子的鑒別，而且知母鑒別中大量使用了劇毒試劑苯作為溶劑，操作繁瑣［1］。為了簡便、有效地控制藥品的質(zhì)量，提高藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，筆者采用薄層色譜法對(duì)處方中主藥知母、五味子進(jìn)行了鑒別，取得了滿意的效果，為睡安膠囊的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。試驗(yàn)結(jié)果如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 薄層攝像儀(REPROSTAR-ⅡCAMAG);硅膠G(青島市市北區(qū)?；稍飫S)，自制規(guī)格為10×20 cm，厚0.5 mm;預(yù)制板有三種:1)Gel de silice 60 F254(MERCK板)2)青島海洋化工廠(青島板)3)煙臺(tái)市化學(xué)工業(yè)研究所生產(chǎn)(煙臺(tái)板);超聲波清洗器(功率300W，頻率40kHz)昆山超聲波儀器有限公司;瑞士METTLER AG135電子天平。

1.2 試藥 睡安膠囊(由市場(chǎng)上購買，廣西玉林制藥有限責(zé)任公司，批號(hào)為20080407);對(duì)照品、對(duì)照藥材來源于中國藥品生物制品檢定所:五味子對(duì)照藥材(0922-9803)、知母對(duì)照藥材(1070-200002)、菝葜皂苷元對(duì)照品(11074-200509);其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 知母的薄層色譜鑒別［2］

2.1.1 供試品溶液制備 取本品內(nèi)容物1 g，加70% 乙醇30 ml超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 ml溶解，加鹽酸1 ml，加熱回流2 h，冷卻后濾過，濾液用乙醚萃取2次，每次30 ml，將乙醚液蒸干，殘?jiān)右掖? ml使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2 對(duì)照藥材溶液制備 取知母對(duì)照藥材1 g，同2.1.1制成對(duì)照藥材溶液。

2.1.3 對(duì)照品溶液制備 取菝葜皂苷元對(duì)照品10 mg，加乙醇溶解并稀釋至10 ml，搖勻即得對(duì)照品溶液(1 mg/ml)。

2.1.4 陰性對(duì)照溶液的制備 缺知母的陰性對(duì)照1 g同2.1.1制成陰性對(duì)照溶液。

2.1.5 鑒別 照《中國藥典》2005年版一部附錄薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗(yàn)，分別吸取以上供試品溶液及三種對(duì)照溶液各20 μl點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-石油醚-丙酮(9∶5∶1)為展開劑，展開，取出晾干，噴以1份8%香草醛乙醇溶液與10份硫酸溶液(7→10)的混合液為顯色劑，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。

2.1.6 結(jié)果 在日光下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照色譜無干擾。(結(jié)果見圖1)

圖1 知母的TLC圖

2.2.7 耐用性試驗(yàn) 試驗(yàn)中考察了手鋪和預(yù)制兩種薄層板，并在不同溫度(4℃ ～10℃和室溫)、不同濕度(20%和75%)進(jìn)行了考察試驗(yàn)。結(jié)果表明在高濕低濕、常溫低溫的條件下，用手鋪或預(yù)制板進(jìn)行展開的結(jié)果基本一致。

2.2 五味子的薄層色譜［2］

2.2.1 供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物2 g，加甲醇(或乙醚)水浴回流1 h，過濾，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液?/p>

2.2.2 對(duì)照藥材溶液的制備 取五味子對(duì)照藥材1 g，同2.2.1制成對(duì)照藥材溶液。

2.2.3 陰性對(duì)照溶液的制備 缺五味子的陰性對(duì)照1 g，同2.2.1制成陰性對(duì)照溶液。

2.2.4 鑒別 照《中國藥典》2005年版一部附錄薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液10 μl、對(duì)照藥材及陰性對(duì)照溶液各5 μl溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)為展開劑，展開，取出晾干。

2.2.5 結(jié)果 于紫外光燈(254 nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照色譜無干擾。(結(jié)果見圖2)

圖2 五味子的TLC圖

2.2.6 耐用性試驗(yàn) 試驗(yàn)中考察了手鋪和預(yù)制兩種薄層板，并在不同溫度(4℃ ～10℃和室溫)、不同濕度(20%和75%)進(jìn)行了考察試驗(yàn)。結(jié)果表明在高濕低濕、常溫低溫的條件下，用手鋪或預(yù)制板進(jìn)行展開的結(jié)果基本一致。

3 討論

3.1 睡安膠囊原標(biāo)準(zhǔn)的知母薄層鑒別項(xiàng)下，采用了苯溶解殘?jiān)?，作為供試品溶液，并采用苯－丙?9∶1)作為展開劑。考慮到苯是毒性大的試劑，實(shí)驗(yàn)中盡量避免使用，所以以甲苯替代，并參考《中國藥典》2005年版一部知母藥材項(xiàng)下方法，將展開劑改為甲苯－石油醚－丙酮(9∶5∶1)。經(jīng)多次試驗(yàn)，結(jié)果斑點(diǎn)清晰，Rf值適中，陰性無干擾，分離度好。

3.2 五味子的薄層鑒別是參考《中國藥典》2005年版一部五味子藥材的薄層鑒別方法修訂而成的。實(shí)驗(yàn)中，嘗試了甲醇和乙醚提取樣品，結(jié)果表明兩種提取方法所得斑點(diǎn)基本一致，而且甲醇所提溶液的斑點(diǎn)更清晰，故使用甲醇為提取溶劑;還嘗試使用的展開劑有石油醚－甲酸乙酯－甲酸(15∶5∶1)、石油醚－甲酸乙酯－甲酸(25∶5∶1)、石油醚－甲酸乙酯－甲酸(15∶8∶1)、甲苯－乙酸乙酯(4∶6)，結(jié)果以石油醚－甲酸乙酯－甲酸(15∶5∶1)的斑點(diǎn)Rf值較適中，分離度較好，故將展開劑確定為石油醚－甲酸乙酯－甲酸(15∶5∶1)。

3.3 所擬定的薄層色譜法鑒別睡安膠囊中的主藥知母和五味子，操作簡便、分離快速、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，可以用于該制劑的質(zhì)量控制。

［1］衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)，WS3-B-4038-98．

［2］中國藥典，2005 年版．一部.44、148．