尾尖石仙桃化學成分的研究

詹 睿，劉 瑩，陳業(yè)高

（云南師范大學 化學化工學院，云南 昆明 650092）

尾尖石仙桃化學成分的研究

詹 睿，劉 瑩，陳業(yè)高*

（云南師范大學 化學化工學院，云南 昆明 650092）

從蘭科植物尾尖石仙桃（Pholidota protracta）全草通過溶劑提取、硅膠柱層析、Sephadex LH-20柱層析和RP-18柱層析等方法分得9個化合物.利用現(xiàn)代波譜法結合理化分析對提純的化合物進行結構鑒定，首次從尾尖石仙桃中分離得到gigantol、batatasin III、3-hydroxy-5-methoxybibenzyl、dihydroconiferyl alcohol、間羥基苯甲醇、對苯二酚、水楊酸、b-谷甾醇和胡蘿卜苷.

尾尖石仙桃；化學成分；聯(lián)芐；芳香族化合物；結構鑒定

尾尖石仙桃（Pholidota protracta）為蘭科（Orchidaceae）石仙桃屬（Pholidota）植物，生于海拔1800～2500 m溝谷闊葉林中樹上或石壁上，主要分布于尼泊爾、不丹、錫金和印度東北部，我國只在云南西北部貢山、獨龍江、怒江河谷沿岸和西藏東南部墨脫有分布［1］.石仙桃屬一些植物在民間作藥用，如石仙桃（P.chinensis）全草用于治療眩暈、咳嗽和頭痛，云南石仙桃（P.yunnanensis）有養(yǎng)陰、清肺、利濕和消淤等功效［2］.國內外對石仙桃屬植物的研究主要集中在印度和中國，分離得到的化學成分主要有9，10-二氫菲、菲醌、聯(lián)芐、二苯乙烯、三萜、苯丙素、木脂素、甾體和脂肪族等［3-5］.藥理研究表明，一些石仙桃屬植物的提取物和單體成分具有鎮(zhèn)痛、抗氧化、抗癌和抑制NO生成等活性［6-8］，為了解尾尖石仙桃的化學成分，我們對其進行了分離鑒定.采用各種分離方法，包括常壓硅膠柱層析、減壓硅膠柱層析、凝膠層析和RP-18柱層析等，從中分得9個化合物.波譜分析（核磁共振氫譜、碳譜）確定它們的結構分別為 gigantol（1）、batatasin III（2）、3-hydroxy-5-methoxybibenzyl（3）、dihydroconiferyl alcohol（4）、間羥基苯甲醇（5）、對苯二酚（6）、水楊酸（7）、b-谷甾醇（8）和胡蘿卜苷（9），均為首次從該植物中分離得到，結構式為：

1 儀器、試劑與材料

1.1 儀器

ZF-II型紫外分析儀（上海顧村中實儀器廠）；（Varian Mat-711質譜儀，美國Finnigan公司）；核磁共振儀（Bruker DRX-500型，德國布魯克公司）；旋轉蒸發(fā)儀（SB-2000系列，日本東京理化）.

1.2 試劑

層析硅膠（青島海洋化工廠），Sephadex LH-20（20-80 mm，Pharmacia Fine Chemical Co，Ltd.），高效薄層層析硅膠G板（煙臺化工研究院），顯色劑為體積分數(shù)10％硫酸-乙醇溶液（乙醇為工業(yè)純，使用前重蒸），其它試劑為化學純或分析純.

1.3 材料

尾尖石仙桃全草采自云南貢山，由云南英茂生物技術實驗室張時剛先生鑒定為Pholidota protracta的全草.

2 試驗方法

尾尖石仙桃干燥全草（200g），用工業(yè)乙醇室溫浸提6次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物（26g）.浸膏用2 mol/L NaOH溶解，用EtOAc萃取，得到非酸部分提取物13g.堿液加入2 mol/L HCl中和至pH 7，再用EtOAc萃取，得到酸部分提取物4g.非酸部分提取物經硅膠柱分離，采用石油醚∶丙酮（1∶0→0∶1）梯度洗脫，薄層層析檢測分為4個部分.Fr. 2經過反復硅膠柱層析（氯仿∶丙酮50∶0→30∶1），Sephadex LH-20柱層析，RP-18柱層析得到化合物3（8 mg）和4（8 mg）.Fr.4 經過反復硅膠柱層析（氯仿∶丙酮50∶0→20∶1），Sephadex LH-20柱層析得到化合物1（4 mg）、2（7 mg）和8（50 mg）.Fr.5 經過硅膠柱層析（石油醚∶乙酸乙酯8∶1→1∶1）得到化合物9（100 mg）.酸部分提取物經硅膠柱分離，用石油醚：丙酮（1∶0→0∶1）梯度洗脫，分為3個部分.Fr.2經過硅膠柱層析（氯仿∶丙酮50∶0→30∶1）和Sephadex LH-20柱層析得到化合物5（5 mg）、6（10 mg）和7（12 mg）.

3 結果與討論

首次從尾尖石仙桃全草分離得到9個成分，利用核磁共振波譜法，結合理化分析進行鑒定，9個化合物的結構分別為 gigantol（1）、batatasin III（2）、3-hydroxy-5-methoxybibenzyl（3）、dihydroconiferyl alcohol（4）、間羥基苯甲醇（5）、對苯二酚（6）、水楊酸（7）、b-谷甾醇（8）和胡蘿卜苷（9）.

化合物1為紅色膠狀物.1H-NMR[（CD3）2CO，400 MHz]顯示有亞甲基 [d 2.95（4H，br s，1，2-CH2）]、兩個單峰甲氧基[d 3.78，3.69（each 3H，s）和6個芳香質子.其中，d 6.80（1H，d，J=2.0 Hz，H-2″），6.70（1H，d，J=8.0 Hz，H-5″）和6.64（1H，dd，J= 8.0，2.0 Hz，H-6″）處的質子信號表明有一個1，2，4-三取代苯環(huán)存在；d 6.29（1H，dd，J=2.0，2.0 Hz，H-6′），6.28（1H，dd，J=2.0，2.0 Hz，H-4′），6.21（1H，dd，J=2.0，2.0 Hz，H-2′）處的質子信號表明有一個間位三取代苯環(huán)存在.13C-NMR顯示有12個芳環(huán)碳（6個季碳和6個次甲基碳）、2個甲氧基碳和兩個亞甲基碳，表明化合物1為聯(lián)芐類化合物.13C-NMR[（CD3）2CO，100 MHz]∶d 161.8（C-5′），159.3（C-3′），146.1（C-3″），145.2（C-1′），145.1（C-4″），134.0（C-1″），121.5（C-6″），115.5（C-2″），112.8（C-5″），108.8（C-2′），106.2（C-6′），99.6（C-4′），56.1（-OCH3′），55.2（-OCH3），39.1（C-2），38.0（C-1）.以上數(shù)據(jù)與文獻報道的gigantol完全一致［9-10］，結構鑒定為gigantol.

化合物2為紅色膠狀物.1H-NMR[（CD）3CO，400 MHz]顯示有兩個羥基[d 8.21（s，3′-OH），8.19（s，3-OH）和7個芳香質子.其中1個為1，3-二取代苯環(huán) [d 7.08（1H，dd，J=7.5，7.5 Hz，H-5″），6.69（1H，dd，J=8.0，2.4Hz，H-6″），6.65（1H，dd，J=8.0，2.4

化合物8為無色針晶.15％濃硫酸乙醇顯色為紫紅色，與β-谷甾醇標準品進行TLC對照，在多種溶劑系統(tǒng)中Rf值均相同.且1H-NMR、13C-NMR數(shù)據(jù)與β-谷甾醇一致，所以確定其為β-谷甾醇.

化合物9為白色粉末，極性較大，難溶于丙酮、甲醇，易溶于吡啶.15％濃硫酸乙醇顯色為紫紅色，與胡蘿卜甙標準品進行TLC對照，在多種溶劑系統(tǒng)中Rf值均相同.且1H-NMR、13C-NMR與胡蘿卜苷一致，所以確定其為胡蘿卜苷.

［1］中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志：第18卷[M].北京：科學出版社，1999：397.

［2］江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典[M].上海：上?？茖W技術出版社，1977：600.

［3］Wu B，Qu H，Cheng Y.Cytotoxicity of neWstilbenoids froMPholidota chinensis and their spin-labeled derivatives [J].CheMBiodivers，2008，5（9）：1803-1810.

［4］Yao S，Tang C P，Li X Q，et al.Phochinenins A-F，dimeric9，10-dihydrophenanthrene derivatives，froMPholidota chinensis[J].Helv ChiMActa，2008，91（11）：2122-2129.

［5］Yao S，Tang C P，Ye Y，et al.StereocheMistry of atropisomeric 9，10-dihydrophenanthrene dimers froMPholidota chinensis[J].Tetrahedron Asymm，2008，19（17）：2007-2014.

［6］劉瑩，張云梅，金永，等.石仙桃屬植物化學成分及藥理活性研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥，2007，18（7）：1631-1633.

［7］Guo X Y，Wang J，Wang N L，et al.9，10-Dihydrophenanthrene derivatives froMPholidota yunnanensis and scavenging activity on DPPH free radical[J].J Asian Nat Prod Res，2007，9（2）：165-174.

［8］Wang J，Matsuzaki K，Kitanaka S.Stilbene derivatives froMPholidota chinensis and their anti-inflammatory activity[J].CheMPharMBull，2006，54（8）：1216-1218.

［9］Juneja R K，Sharma S C，Tandon J S.Two substituted bibenzyls and a dihydrophenanthrene froMCymbidiuMaloifolium[J].PhytocheMistry，1987，26（4）：1123-1125.

［10］Chen Y G，Xu J J，Yu H，et al.Cytotoxic phenolics froMBulbophylluModoratissimum[J].Food Chem，2008，107：169-173.

［11］Ali MA，Kondo K，Tsuda，Y.Synthesis and nematocidal activity of hydroxystilbenes[J].CheMPharMBull，1992，40（5）：1130-1136.

［12］Hanawa F，Yamada T，Nakashima，T.Phytoalexins froMPinus strobus bark infected With pinewood nematode，Bursaphelenchus xylophilus[J].Phytochemistry，2001，57（2）：223-228.

［13］Morgan K R，Newman R H.Principal values of carbon-13NMR cheMical sShift tensors for a collection of substituted benzenes[J].J.AMCheMSoc，1990，112（1）：4-7.

［14］袁久榮，李全文，李智立.夏至草化學成分的研究[J].中國中藥雜志，2000，25（7）：421-423.

［15］肖瑛，李建北，丁怡.毛大丁草根和根莖化學成分的研究[J].中國中藥雜志，2002，27（8）：594-596.

［16］Scheffer J R，Wong Y F，Patil A O，et al.CPMAS（cross-polarization magic angle spinning）carbon-13NMR spectra of quinones，hydroquinones，and their complexes. Use of CMR to folloWa reaction in the solid state[J]. J AMCheMSoc，1985，107（17）：4898-4904.

［17］劉明韜，韓志超，章漳，等.龍膽的化學成分研究[J].沈陽藥科大學學報，2005，22（2）：103-104.

責任編輯：畢和平

Study on the CheMical Constituents froMPholidota protracta

ZHAN Rui，LIU Ying，CHEN Yegao*
（School of Chemistry and Chemical Engineering，Yunnan Normal University，Kunming 650092，China）

Nine compounds were obtained by silica gel chromatography，Sephadex LH-20 and RP-18 column chromatography froMthe all plants of Pholidota protracta，and the chemical structures of these compounds were identified by modern spectroscopy as well as physico-chemical analysis.These compounds were identified to be gigantol，batatasin III，3-hydroxy-5-methoxybibenzyl，dihydroconiferyl alcohol，3-hydroxy benzenemethanol，hydroquinone，salicylic acid，b-sitosterol and daucosterol respectively.They were obtained froMPholidota protracta for the first time.

Pholidota protracta；chemical constituents；bibenzyls；aromatics；structural identification

R 248.1

A

1674-4942（2010）01-0072-04

2009-11-27

國家自然科學基金項目（30860346）

*通訊作者