分離銅綠假單胞菌耐藥性及相關(guān)耐藥基因分析

許杰

(四川省儀隴縣人民醫(yī)院檢驗科 四川儀隴 637600)

銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PAE)是一種重要的條件致病菌,是專性需氧革蘭陰性桿菌,是醫(yī)院感染的主要病原菌之一。對細(xì)菌進行耐藥性監(jiān)測可以指導(dǎo)臨床合理用藥,對提高治愈率有重要意義。銅綠假單胞菌是臨床分離率最高的非發(fā)酵菌,有關(guān)PAE的耐藥基因的研究國內(nèi)已有報道[1]。本研究通過2008年1月至2009年6月間我院各臨床科室送檢的各類標(biāo)本,對其中分離的132株銅綠假單胞菌(PAE)的耐藥性進行分析,現(xiàn)將有關(guān)結(jié)果報道如下。

1 臨床資料

1.1 菌株來源

收集2008年1月至2009年10月在本院確診的門診及住院患者的各類臨床標(biāo)本,包括痰及咽拭子、尿液、陰道分泌物、血等培養(yǎng)分離的銅綠假單胞菌,同一患者多次分離的銅綠假單胞菌只計首次分離株。

1.2 菌種鑒定和體外藥敏試驗

細(xì)菌培養(yǎng)按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版進行。血液標(biāo)本經(jīng)Bact/Alert-120血培養(yǎng)儀增菌。送檢標(biāo)本均經(jīng)過VITE-32全自動微生物分析系統(tǒng)或API 20NE非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定系統(tǒng)的鑒定,然后采用VITEK-32分析系統(tǒng)或者ATB PSE-5進行藥敏實驗,K-B法補充ATB PSE-5試劑條中缺少的左氧氟沙星、舒普深的藥敏試驗,標(biāo)準(zhǔn)濁度用濁度儀調(diào)制1.5×10CFU/mL,用精確度為lmm的游標(biāo)卡尺量取抑菌圈直徑,根據(jù)CLsI／NCCLS標(biāo)準(zhǔn),對量取的抑菌圈直徑作出敏感,耐藥和中介的判斷。

2 結(jié)果

2.1 檢出感染部位分布

本組132株銅綠假單胞菌主要分離于呼吸道標(biāo)本(痰及咽拭子),比例達到83.3%,其次為創(chuàng)面或傷口分泌物,占6.8%,見表1。

表1 銅綠假單胞菌檢出感染部位分布

2.3 PAE對抗茵藥物的耐藥情況分析

本研究132株菌株對替卡西林、替卡西林／克拉維酸、哌拉西林、妥布霉素、環(huán)丙沙星、頭孢他啶耐藥率均>30%,耐藥率最高為替卡西林(40.6%)和慶大霉素(38.1%);對阿米卡星耐藥率最低,為13.9%;對阿米卡星最敏感,敏感率為76.9%;他唑巴坦、美洛培南、亞胺培南敏感率均>70%。本組132株P(guān)AE中多重耐藥菌株共27株,占20.4%。

3 討論

銅綠假單胞菌是一種氧化酶陽性的非發(fā)酵革蘭陽性桿菌,廣泛分布于健康人的皮膚和周圍環(huán)境,由于各種原因?qū)е氯梭w免疫功能下降時,可引起嚴(yán)重感染,其檢出率以痰最多,是臨床上常見的條件致病菌。本組資料顯示,我院分離的132株銅綠假單胞菌最多見于肺部感染標(biāo)本痰及咽拭子(83.3%),其次是創(chuàng)面和傷口分泌物(6.8%),與文獻報道相一致,表明我院銅綠假單胞菌主要以呼吸道感染為主,但也有胸水、血液等危險部位感染,應(yīng)高度重視,防止交叉感染。

PAE感染多繼發(fā)于免疫功能低下患者,是典型的機會致病菌,本研究顯示PAE耐藥基因的攜帶率高達93.2%,多耐藥基因攜帶狀況嚴(yán)重,同時攜帶有2個或以上的耐藥基因占72.0%。可見銅綠假單胞菌β—內(nèi)酰胺類抗生素耐藥是多基因共同作用的結(jié)果,說明銅綠假單胞菌對β—內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的復(fù)雜性。本實驗用12種抗生素對PAE體外抗菌活性測定結(jié)果表明,PAE對多種抗菌藥物天然不敏感。PAE對所有的抗菌藥物在延長治療的過程中勢必會導(dǎo)致藥物的效能下降,耐藥菌株也相應(yīng)增加。PAE對阿米卡星最敏感,敏感率為76.9%;對哌拉西林／他唑巴坦、美洛培南、亞胺培南敏感率均>70%。值得一提的是多重耐藥的銅綠假單胞菌,是指對哌拉西林、環(huán)丙沙星／左氧氟沙星、亞胺培南和一種三代或四代頭孢菌素同時耐藥的菌株。近年來隨著抗生素的大量應(yīng)用,多重耐藥PAE的數(shù)量和耐藥率不斷上升,為臨床有效控制感染帶來了嚴(yán)重威脅。

總之,臨床上了解銅綠假單胞菌的耐藥性分布及耐藥相關(guān)基因分析,意義非常重大。臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果選擇恰當(dāng)?shù)目咕幬?避免或慎用敏感率不高的抗菌藥物,控制醫(yī)院感染,延長抗菌藥物的使用壽命。

[1]蔣景華,陳文光,章澤豹,等.244株銅綠假單胞菌的分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2007,17:1576.