鵝源新城疫病毒云南流行毒株的鑒定理化試驗

劉 燕 荀來武 尹革芬 俞 浩

（①云南農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 昆明 650212 ②云南省種畜場 ③云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院）

1 材料與方法

1.1 材料

（1）9日非免疫雞胚 購自云南農(nóng)科院雞場；（2）氯仿、乙醚、甲醛。

1.2 方法

1.2.1 氯仿乙醚敏感性試驗 分離病毒毒株尿囊液經(jīng)4.8%氯仿在4℃處理10min，20%乙醚在4℃處理24h后，分別尿囊腔接種9日齡雞胚10枚，每胚0.1mL，并設(shè)對照組10枚，每胚接種未經(jīng)氯仿乙醚處理的分離病毒株尿囊液0.1ml(殷震等，1997)，觀察結(jié)果。

1.2.2 甲醛滅活試驗 分離病毒株尿囊液經(jīng)0.1%和0.5%的甲醛處理后，分別尿囊腔接種9日齡雞胚10枚，每胚0.1mL，并設(shè)對照組10枚，每胚接種未經(jīng)甲醛處理的分離病毒株尿囊0.1mL，觀察結(jié)果。

1.2.3 病毒熱穩(wěn)定性試驗 把分離毒株尿囊液密封于封閉的小試管中，分別置于100℃ 1min、2min；56℃5min、10min、30min、45min和60min，并迅速冷卻，按常規(guī)處理分別接種9日齡雞胚10枚，每胚0.1ml。并設(shè)對照組10枚，接種未經(jīng)熱處理的鵝源新城疫病毒株尿囊液，每胚0.1ml(蘇敬良等，20000)，觀察結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 氯仿乙醚敏感性

觀察96 h后，經(jīng)氯仿乙醚處理后的病毒液均不能致死雞胚，而對照組全部死亡。結(jié)果表明分離病毒對氯仿敏感。

2.2 甲醛滅活

接種經(jīng)甲醛滅活的鵝新城疫病毒KM2007株尿囊液雞胚均未死亡，而對照組全部死亡。

2.3 病毒熱穩(wěn)定性

結(jié)果經(jīng)100℃ 1min、2min ；56℃ 45min和60min處理的尿囊液接種的雞胚全部存活，血凝價從25降為20；56℃ 5min、10min、30min組別的雞胚部分死亡，血凝價從

25分別下降為24、23、22。

3 結(jié)論與分析

（1）所分離的病毒對乙醚和氯仿敏感，得出病毒有囊膜。所分離的病毒對甲醛敏感并有血凝價的改變，得出病毒有血凝性。所分離病毒對熱也敏感。

（2）用分離病毒株做氯仿乙醚敏感性試驗，甲醛滅活試驗，結(jié)果表明分離病毒KM2007株對氯仿乙醚、甲醛都敏感，病毒熱穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明分離病毒KM2007株對熱也敏感。說明所分離病毒KM2007株與NDV的理化特性有很大的相關(guān)性，理化試驗無法區(qū)別這兩種毒株的同源性。鵝副粘病毒與NDV之間抗原性和致病性上的差異性有待進一步研究。

[1]殷震, 劉景華. 動物病毒學(xué).第2版[M]. 北京: 科學(xué)出版社,1997,743-748.

[2]辛朝安, 任濤, 羅開鍵等. 疑似鵝副粘病毒感染診斷初報[J]. 養(yǎng)禽與禽病防治,1997,16(1).

[3]王永坤, 田慧芳, 周繼宏等. 鵝副粘病毒病的研究[J]. 江蘇農(nóng)學(xué)院學(xué)報, 1998, 19(1):59-62.

[4]張訓(xùn)海, 朱鴻飛, 陳溥言等. 鴨副粘病毒強毒株的分離和鑒定[J].中國動物檢疫,2001，18(10):24-26.

[5]蘇敬良,王雙山,黃瑜等.企鵝新城疫強毒的分離鑒定[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報,2000,22(3):186-188.

[6]張秀美, 金維江, 王莉莉. 鷓鴣發(fā)生新城疫的診斷與防制[J]. 山東家禽, 1997, 4:24.

[7]倪雪霞, 吳艷濤, 劉秀梵等. 華東地區(qū)雞新城疫分子流行病學(xué)研究[J]. 中國家禽,2001，23(22):113-118.

[8]劉華雷. 禽副粘病毒I型分離株囊膜糖蛋白基因生物學(xué)特性的初步研究[D]. 揚州: 揚州大學(xué). 2001.6.