惡性腫瘤組織標(biāo)本的采集與保存

王曉蔚,沈 康,吳銀芳

隨著惡性腫瘤對人類的影響和危害性的增加,如何保護(hù)、保存并充分利用人類腫瘤遺傳資源,提高我國腫瘤防治水平,已成為當(dāng)務(wù)之急。作為惡性腫瘤研究材料的腫瘤組織標(biāo)本在促進(jìn)腫瘤研究進(jìn)展過程中扮演了重要的角色,成為腫瘤研究工作的基礎(chǔ)[1]。我院是一所具有30余年歷史的腫瘤診斷治療與教學(xué)科研為一體的?？菩葬t(yī)院,在蘇北地區(qū)創(chuàng)建最早、規(guī)模最大,擁有得天獨(dú)厚的標(biāo)本資源?，F(xiàn)將人體腫瘤組織標(biāo)本的采集、保存、管理體會介紹如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 由醫(yī)院科研所牽頭負(fù)責(zé),聯(lián)合病理科、各手術(shù)科室、手術(shù)室、腔鏡室、檢驗(yàn)科等,由手術(shù)室配備 1名資深護(hù)士執(zhí)行具體操作。

1.2 方法

1.2.1 物品準(zhǔn)備 照相機(jī)、直尺、取材車、無菌手術(shù)器械盒(內(nèi)有刀柄、刀片、組織鑷、血管鉗等)、手套、不同顏色的凍存管、登記本、標(biāo)記筆、標(biāo)簽紙、液氮罐及便攜式標(biāo)本貯藏罐;-86℃深低溫冰柜;電動組織勻漿器;低溫高速離心機(jī)等。

1.2.2 知情同意 所有組織標(biāo)本的取材均需事先向病人及/或家屬詳細(xì)解釋,征得病人及/或家屬的同意后簽署《知情同意書》并進(jìn)行相關(guān)信息登記,內(nèi)容包括姓名、性別、年齡、民族、職業(yè)、聯(lián)系方式、住院號、臨床診斷、擬施手術(shù)名稱、術(shù)前病理診斷等。同時(shí),標(biāo)本采集一般在手術(shù)室、腔鏡室進(jìn)行,必須得到相關(guān)管理人員的許可,爭取得到相關(guān)人員的積極配合以保證標(biāo)本的及時(shí)獲得。

1.2.3 采集方法

1.2.3.1 標(biāo)本選擇 選取直徑大于3 cm的實(shí)體瘤進(jìn)行組織標(biāo)本采集,小于3 cm一般不采集,以免影響病人的術(shù)后組織學(xué)診斷。同時(shí)在同一標(biāo)本的瘤旁和切緣部位選取癌旁組織和正常組織若干。

1.2.3.2 標(biāo)本切取的方法與時(shí)機(jī) 在標(biāo)本離體后的最短時(shí)間內(nèi)(一般小于15 min),先對大體標(biāo)本進(jìn)行觀察、拍照、測量,確認(rèn)腫瘤的部位、范圍,注意與周圍組織及壞死組織相鑒別。然后分別將癌腫、癌旁組織和正常組織切取成多塊(3塊～5塊)直徑為0.2 cm～0.5 cm的組織塊,裝入已編號的滅菌凍存管中,迅速放入液氮轉(zhuǎn)移罐并旋緊蓋子。同時(shí),抽取病人外周血10 mL,經(jīng)低溫高速離心機(jī)離心后取血清分成10份,一并置于液氮轉(zhuǎn)移罐中。

1.2.3.3 標(biāo)本的存放與登記 同一病人的所有標(biāo)本(包括組織標(biāo)本和血清標(biāo)本)存放于同一個(gè)標(biāo)本盒內(nèi),2 h之內(nèi)由液氮罐轉(zhuǎn)移至標(biāo)本庫-86℃深低溫冰箱中長期保存。取材護(hù)士再將臨時(shí)登記內(nèi)容逐一全部錄入計(jì)算機(jī),采用統(tǒng)一設(shè)計(jì)的信息管理系統(tǒng)進(jìn)行管理。內(nèi)容包括:病人一般資料、標(biāo)本資料(入庫編號、入庫時(shí)間、病變部位、標(biāo)本描述、附上相片等);病理報(bào)告發(fā)出后的病理資料(腫瘤體積、組織類型、分級、浸潤深度、切緣情況、免疫表型等);存放位置資料(入庫編號、存放位置、標(biāo)本數(shù)量、存放坐標(biāo)等);標(biāo)本使用(出庫編號、出庫時(shí)間、使用單位、使用人、審批單位、審批人等);標(biāo)本質(zhì)控信息(入庫編號、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、實(shí)驗(yàn)人、實(shí)驗(yàn)日期等);標(biāo)本廢除信息(廢除序號、入庫編號、標(biāo)本原始位置、廢除日期、廢除原因、經(jīng)手人等)[2]。

1.2.3.4 藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)本的采集 在病人知情同意的前提下,在相對無菌的條件下,取剛離體的惡性腫瘤組織0.5 cm3～1.0 cm3,置于檢測人員配制好的培養(yǎng)液中或含生理鹽水的抗生素瓶中送檢。7 d～11 d可發(fā)出檢測藥物譜的敏感程度報(bào)告。

2 結(jié)果

目前我院在首先保證病理學(xué)診斷的基礎(chǔ)上,已經(jīng)成功收集和保存了包括肺、食管、大腸、乳腺、肝、膽管、胃、胰腺、甲狀腺、腎等臟器腫瘤病人的新鮮組織標(biāo)本,包括其血液或血液成分,能滿足本院有一定學(xué)術(shù)和科研能力的研究者的需要,并且和上級研究機(jī)構(gòu)有良好的協(xié)作關(guān)系。同時(shí),借助豐富的標(biāo)本資源,和醫(yī)學(xué)院校成功合作開展了醫(yī)學(xué)病理碩士教育。

3 小結(jié)

新鮮組織標(biāo)本的采集技術(shù)要求高,需嚴(yán)格控制組織血流阻斷至組織放入液氮中凍存所耗的時(shí)間和血液標(biāo)本離體至凍存所耗的時(shí)間,且對人體結(jié)構(gòu)和組織解剖要熟練掌握,因此收集者應(yīng)當(dāng)具備一定的專業(yè)知識,富有責(zé)任心。通過研究,決定由1位手術(shù)室資深護(hù)士承擔(dān)此任,在工作開展前必須經(jīng)過病理科醫(yī)生的取材培訓(xùn)。另外,取材器械在同一標(biāo)本的不同部位和不同標(biāo)本之間均不能重復(fù)使用,以防止腫瘤細(xì)胞交叉污染,使用后需經(jīng)過嚴(yán)格的清洗消毒[3]。要定期檢查液氮和低溫冰箱的性能和工作狀態(tài),冰箱最好是專線專用。

[1]李莉華,魏福祥,王豐,等.腫瘤庫(用于分子生物學(xué)研究)的建立及管理[J].腫瘤,2004,24(6):578-580.

[2]黨裔武.腫瘤組織標(biāo)本庫的創(chuàng)建及意義[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2008,15(12):1499-1502.

[3]藍(lán)素文,胡創(chuàng)英,陳秀杰.惡性腫瘤病人抗凝標(biāo)本易凝血原因分析和對策[J].家庭護(hù)士,2008,6(7B):1829.

[4]凌穎瑜,鄭三女,劉蔚晴.病理標(biāo)本管理存在問題分析及對策[J].家庭護(hù)士,2008,6(9C):2509.