遼寧絨山羊人工授精技術(shù)

劉興偉

（遼寧省畜牧科學(xué)研究院，遼寧 遼陽(yáng) 111000）

1 正確挑選優(yōu)質(zhì)種公羊

1.1 體型外貌要符合品種特征

被毛全白、絨毛混生、有絲光；結(jié)構(gòu)勻稱，肢蹄結(jié)實(shí)；短瘦尾、尾尖上翹，角粗大無(wú)黑線，并向兩側(cè)螺旋形伸展。

1.2 體質(zhì)強(qiáng)壯，健康無(wú)病

沒(méi)有生殖疾病。例如：?jiǎn)尾G、隱睪、布病等。四肢健壯，能正常參加配種工作。沒(méi)有其它傳染性疾病。例如：胸膜肺炎、結(jié)核、寄生蟲感染、炭疽、口蹄疫等。睪丸大而有彈性。

1.3 生產(chǎn)性能的要求

對(duì)參加配種公羊的具體要求是：個(gè)體產(chǎn)絨量應(yīng)達(dá)1 000 g以上，成年時(shí)絨細(xì)度在16.5～17.5 μm，平均體重應(yīng)達(dá)到70～85 kg，保持在中上等膘情。

2 種公羊的飼養(yǎng)管理

在配種前30～40 d就應(yīng)對(duì)種羊加強(qiáng)飼養(yǎng)，提高營(yíng)養(yǎng)水平。蛋白質(zhì)是保證種羊體質(zhì)、提高精液產(chǎn)量所必不可少的。在配種期，種羊日糧粗蛋白質(zhì)最低應(yīng)保持在16%以上，有時(shí)應(yīng)達(dá)18%～20%。除此之外，在配種時(shí)為恢復(fù)種羊體力使之精力更加充沛，還應(yīng)補(bǔ)充一定量的動(dòng)物蛋白質(zhì)，如奶粉、雞蛋等。在補(bǔ)充蛋白質(zhì)的同時(shí)，還要注意維生素和礦物質(zhì)元素的添加與平衡。對(duì)種羊生殖機(jī)能有直接影響的礦物質(zhì)及維生素有：銅、鋅、鐵、硒、鉻、錳、碘；維生素 A、維生素E和維生素B12等。補(bǔ)飼這些物質(zhì)最便捷的途徑是添加劑、多維制劑。

2.1 種公羊日糧

在春季或枯草期，可以參照下面的補(bǔ)飼水平飼喂：玉米1 000～1 250 g，豆餅400 g，骨粉占日糧總量的1%～2%，微量元素0.2%，多種維生素0.4%。

在秋季配種，種羊日糧標(biāo)準(zhǔn)可調(diào)整為：玉米750～1 000 g，豆餅 400 g，骨粉 1%～2%，微量元素0.1%～0.2%，多種維生素0.3%。

每種日糧在補(bǔ)喂時(shí)，還要加喂雞蛋250～300 g；日糧分上下午兩次飼喂，自由舔鹽，保證有一定的放牧?xí)r間。

2.2 種羊的運(yùn)動(dòng)

運(yùn)動(dòng)可增強(qiáng)公羊體質(zhì)，加快代謝，提高精子活力，但過(guò)度的運(yùn)動(dòng)則會(huì)影響種羊配種。一般要求在20～30 min驅(qū)趕運(yùn)動(dòng)1.5～3 km，每天早晨運(yùn)動(dòng)1次，休息0.5～1.0 h后參加配種。

2.3 采精強(qiáng)度

配種前每天排精1次，3～4 d休息1 d。配種開(kāi)始后，可以每天采精1～2次，個(gè)別特殊情況可達(dá)3次，3～4 d 休息 1 d。

3 采精

3.1 采精前的準(zhǔn)備工作

挑選發(fā)情母羊做為臺(tái)羊。臺(tái)羊必須發(fā)情良好，主要表現(xiàn)是鳴叫擺尾、興奮不安、食欲下降，接受公羊爬跨，同時(shí)也偶爾爬跨其它母羊，陰道常有黏液流出。

3.2 剪毛和修蹄

采精前，要將公羊陰莖周圍的被毛剪掉，避免污染精液。同時(shí)，還要對(duì)參加采精的公羊進(jìn)行修蹄，使其運(yùn)動(dòng)自如，確保公、母羊安全。做好人羊親和，調(diào)教好種公羊。

3.3 采精操作

采精員一般位于臺(tái)羊右后方，右手握住假陰道與保溫瓶接合部，食指托住保溫瓶，放氣閥朝向內(nèi)側(cè)，陰道口向上傾斜大約60°。公羊爬跨母羊前，重心放在左腳上，隨著公羊爬跨，采精員一邊下蹲一邊將重心移到右腳上，迅速而輕快地將公羊陰莖導(dǎo)入假陰道內(nèi)。公羊射精后，立即將假陰道口朝上豎起，一同送入化驗(yàn)室，先放氣再關(guān)好放氣閥，卸下保溫瓶，蓋上瓶蓋，并做好區(qū)別標(biāo)記。

3.4 采精注意事項(xiàng)

公羊抖動(dòng)薦尾部，是其即將爬跨的先兆，而身體突然前沖，頭向后上揚(yáng)起，是其射精的標(biāo)志。采精員據(jù)此應(yīng)做好動(dòng)作姿勢(shì)的調(diào)整。與公羊接觸的人員，特別是采精員不能穿色彩鮮艷的服裝。采精室地面平坦但不光滑，不存放其它物品，室內(nèi)環(huán)境要相對(duì)安靜。禁止粗暴對(duì)待公羊，盡量避免能引起公羊比較疼痛的治療。公羊多次抽動(dòng)陰莖而不射精，很可能是溫度不夠高或壓力不夠大；公羊陰莖剛進(jìn)入假陰道很快射精而射精量卻很少，可能是內(nèi)胎溫度過(guò)高或初次參加采精的后備公羊；精液鏡檢時(shí)，發(fā)現(xiàn)密度明顯下降而不成熟精子增多，很可能是采精過(guò)頻或營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)不足造成的。采精時(shí)要多觀察多分析，針對(duì)不同情況，采取不同的措施予以糾正。

3.5 精液性狀和品質(zhì)檢查

檢查的內(nèi)容有射精量、顏色、密度、活力、畸形精子百分率、頂體完整率、存活指數(shù)等。只有檢查合格，方可冷凍和輸精。

4 母羊發(fā)情鑒定

只有準(zhǔn)確做好母羊發(fā)情鑒定，才能掌握發(fā)情火候，適時(shí)輸精，提高受胎率。發(fā)情鑒定通常采用下列方法。

4.1 外部觀察法

母羊發(fā)情后，興奮不安，反應(yīng)敏感，食欲減退，有時(shí)反芻停止，母羊之間相互爬跨，咩叫搖尾，靠近公羊，接受爬跨。

4.2 公羊試情法

公羊戴上試情布，放入母羊群中，開(kāi)始嗅聞母羊外陰。發(fā)情好的母羊會(huì)主動(dòng)靠近公羊并與之親近，搖尾，接受公羊爬跨。試情公羊的比例以1∶20～30為宜，試情布應(yīng)大小適中，常洗常換，保持衛(wèi)生。

4.3 陰道檢查法

發(fā)情母羊陰道充血、濕潤(rùn)，有透明黏液流出，子宮頸口松弛、開(kāi)張，呈深紅色。

4.4 公羊瓶試情法

在公山羊的角基部與耳根之間分泌一種性誘激素，以毛巾用力揩擦后，將毛巾放入玻璃瓶中。發(fā)情母羊?qū)ζ恐袣馕睹舾?，前去嗅聞?/p>

5 人工輸精

5.1 人工授精物資的籌備

假陰道、內(nèi)胎、放氣塞子、集精杯、保溫瓶、燒杯、溫度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)羊架、鑷子。脫脂棉、75%酒精、來(lái)蘇水、高錳酸鉀。工作臺(tái)、顯微鏡、蓋玻片、載玻片、平面皿。輸精槍、手電筒、開(kāi)膣器、臉盆、火爐、繩子、加熱鋁鍋。液氮罐、油漆、小刷、記錄紙、筆、pH試紙、天平、試情布。

5.2 精液稀釋

目的是擴(kuò)大精液體積，便于輸精，同時(shí)調(diào)節(jié)滲透壓和pH值，延長(zhǎng)精子存活時(shí)間。精子常規(guī)稀釋常用如下的一些稀釋液：（1）、葡萄糖 3 g，檸檬酸鈉 3 g，加雙蒸餾水100 mL。取其溶液80 mL，加卵黃20 mL。再加青霉素10萬(wàn)單位、鏈霉素0.1 g。（2）、用1%氯化鈉溶液100 mL加牛奶0.9 mL。（3）、用生理鹽水90 mL，加鮮卵黃 10 mL。（4）、蒸餾水 100 mL、青霉素10 萬(wàn)單位、鏈霉素 0.1 g，奶粉 10 g，卵黃 10 mL。（5）、枸椽酸鈉2.3 g葡萄糖1 g、磺胺粉0.3 g、卵黃10 mL，青霉素10萬(wàn)單位，鏈霉素0.1 g。精液高倍稀釋時(shí)，常用如下的稀釋液：（1）新鮮脫脂乳100 mL，青霉素10～20萬(wàn)單位。（2）葡萄糖3 g，加蒸餾水100 mL，檸檬酸鈉1.4 g，青霉素10～20萬(wàn)單位，卵黃20 mL。（3）檸檬酸鈉 2.3 g，蒸餾水 100 mL，蜂蜜 10 g，氨苯磺胺0.3 g。

精液稀釋時(shí)，?？筛鶕?jù)以下數(shù)據(jù)確定稀釋倍數(shù)：一次輸精劑量（0.1mL）、一次輸精有效精子數(shù)（視為0.15億）、射精量（mL）、原精液密度億/mL。稀釋精液應(yīng)做到等溫、防振動(dòng)、防低滲。

5.3 鮮精的貯存和運(yùn)輸

精液稀釋后，在20℃條件下能存活1～2 d，如果在此基礎(chǔ)上繼續(xù)緩慢降溫到0～5℃時(shí)，精子最長(zhǎng)可存活7天左右，保持受精能力的時(shí)間大約為2～3 d。

運(yùn)送鮮精時(shí)要做到低溫、防振、防污染、防腐射、防止時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（如20℃超過(guò)5～6 h，0～5℃超過(guò)12 h），運(yùn)送的容器應(yīng)保溫，便于攜帶，不占空間。

5.4 輸精

母羊外陰部消毒擦洗后，輸精員左手拿開(kāi)膣器，器柄與地面平行傾斜向上慢慢插入母羊陰道內(nèi)，當(dāng)接近子宮頸口向下旋轉(zhuǎn)90°，張開(kāi)開(kāi)膣器。借助手電光源尋找子宮頸口，將精液輸入子宮頸口內(nèi)0.5～1.0 cm的深度，然后緩慢旋轉(zhuǎn)抽出輸精槍，最后用力拍打一下母羊后軀。開(kāi)膣器用完后，酒精火焰消毒，再用生理鹽水棉球擦凈，為下一次輸精時(shí)使用。

在輸精時(shí)，要求做到以下幾點(diǎn)。（1）配種室溫度應(yīng)保持在25～33℃。母羊保定后的姿勢(shì)是前低后高，母羊背線與地平面大約成35°。在輸精前，必須對(duì)母羊外陰進(jìn)行消毒和擦洗。消毒可用0.1%的高錳酸鉀溶液或1%的來(lái)蘇水等，然后用干凈毛巾醮清水擦洗。消毒和清洗所用毛巾要勤洗勤換，擦1只母羊換1個(gè)部位，保持外陰清潔。在抽出開(kāi)膣器時(shí)，不要夾住子宮頸口的黏液。（2）對(duì)產(chǎn)道有炎癥的母羊，應(yīng)治愈后再輸精。（3）公、母羊在配種前隔離飼養(yǎng)1.5～2月，在配種時(shí)才允許混群接觸，從而刺激母羊發(fā)情排卵，即公羊效應(yīng)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，公羊效應(yīng)具有如下一些作用：加快母羊性成熟，使母羊發(fā)情集中，提高受胎率，使配種時(shí)間縮短，大約30～40 d。

5.5 刺激母羊多排卵，提高產(chǎn)羔率

在配種前20～30 d對(duì)母羊加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)，使母羊在短期內(nèi)上膘，體重增加，促進(jìn)母羊發(fā)情整齊和多排卵，即短期優(yōu)飼。

精子活力不好，凍精低于0.3，鮮精低于0.6，畸形精子超過(guò)15%，一般不能用于輸精，特別是有產(chǎn)道炎癥時(shí)更不能輸精，否則畸胎、死胎、弱胎增多，甚至導(dǎo)致母羊不孕。

輸精時(shí)間和頻率。精子保持受精能力的時(shí)間大約為30～48 h，卵子保持受精能力的時(shí)間為20 h，精子由子宮頸口運(yùn)行到受精部位的時(shí)間為15 min至6 h。母羊排卵多在發(fā)情后期，對(duì)發(fā)情母羊每隔12～24 h輸精1次比較適宜，一個(gè)情期可輸精1～3次，一般1～2次即可。

輸精劑量。一般每只羊輸入稀釋后的鮮精0.1 mL，一次輸入有效精子數(shù)的數(shù)量，來(lái)自各方面的報(bào)道很不一致，從0.7億～0.15億，實(shí)際上也有可能低于0.15億。

6 凍精的解凍與輸精

6.1 凍精的劑型及解凍方法

山羊冷凍精液的劑型主要有細(xì)管、顆粒和安瓶3種，目前貯存和生產(chǎn)的主要是細(xì)管和顆粒兩種劑型。細(xì)管凍精又分為0.25 mL/支和0.5 mL/支；顆粒凍精多數(shù)為1頭份/粒（每粒為0.1 mL，含有效精子數(shù)約為 0.7～1.0億 /mL）。

凍精的解凍方法：分為干解法和濕解法，安瓶?jī)鼍c顆粒凍精的解凍方法相同。

細(xì)管凍精的解凍方法。干解法：取細(xì)管凍精3～4支，放入42～43℃熱水中搖晃約20 s，迅速取出。濕解法：用干凈的試管取2.9%的檸檬酸鈉溶液1 mL，水浴恒溫到40℃，從液氮中取出細(xì)管凍精1支，迅速剪斷于試管中（每段約0.8～1.0 cm），搖晃至全溶。

顆粒凍精的解凍方法。干解法：用干凈的試管取顆粒凍精3～4粒，在43℃溫水中搖動(dòng)，至顆粒溶化到僅剩原體積的1/4～1/3時(shí)迅速取出，借手溫到全溶。濕解法：用干凈的試管取2.9%的檸檬酸鈉溶液1 mL，水浴恒溫到40℃。從液氮中取出顆粒凍精3～4粒，迅速放入試管中至全溶。

以上的解凍方法只是眾多的解凍方法中挑選出的比較理想的一部分而已，就解凍溫度而言，也可以有多種解凍法。

在實(shí)際操作中，也有用VB12做為解凍液的，并可以提高母羊的受胎率，具體機(jī)理不詳。

6.2 利用凍精輸精

凍精解凍后，由于經(jīng)受了稀釋、平衡時(shí)間的消耗及解凍、冷凍的溫度沖擊高滲環(huán)境的影響等變化，導(dǎo)致存活時(shí)間縮短，平均為10 h，個(gè)別可存活17 h，其壽命僅是鮮精1/3～1/2。所以，為確保精卵能夠相遇結(jié)合，必須縮短輸精間隔、增加輸精次數(shù)，加大一次輸入的有效精子數(shù)。一般情況下，如果早晨檢查出母羊發(fā)情，就在早晨輸配1次，10 h后再輸1次，至次日早晨再補(bǔ)輸1次。凍精解凍后活力達(dá)到0.3以上者，方可用于輸精，有效精子數(shù)要求達(dá)到0.7～1.0億，但也有報(bào)道，0.25～0.4億/0.1 mL的有效精子輸精效果沒(méi)受明顯影響，凍精輸精受胎率平均為40%～55%。

6.3 凍精保存

凍精必須在-60℃以下的溫度貯存，才能保證其品質(zhì)，并非所有冷凍狀態(tài)都可貯存凍精。保存凍精常用裝有液氮的液氮罐保存，液氮罐有5 L、10 L、15 L、30 L等型號(hào)，內(nèi)裝2/3容量液氮，凍精存于底部。

7 母羊妊娠診斷

遼寧絨山羊母羊的發(fā)情持續(xù)期為1～3 d，發(fā)情周期平均為20 d，妊娠期為142～153 d。發(fā)情母羊配種后，經(jīng)過(guò)1個(gè)發(fā)情周期不再發(fā)情，絕大多數(shù)是由于妊娠的原因。母羊妊娠后，被毛光亮、行動(dòng)遲緩、食欲旺盛、愛(ài)上膘、性情溫順。個(gè)別母羊妊娠后會(huì)出現(xiàn)假發(fā)情現(xiàn)象，應(yīng)注意鑒別。母羊妊娠至1.5～2月以后，外陰開(kāi)始出現(xiàn)水腫，2～3月時(shí)，用手可在乳房前觸摸到有一硬塊即胎兒。為了對(duì)未孕母羊進(jìn)行補(bǔ)配，早期妊娠診斷很有意義。早期妊娠診斷方法很多，現(xiàn)簡(jiǎn)要介紹一些便于操作容易掌握的幾種方法。

7.1 陰道檢查法

陰道黏膜：母羊懷孕后，陰道黏膜由空懷時(shí)的淡粉色變?yōu)樯n白色。用開(kāi)膣器打開(kāi)陰道后，在很短時(shí)間內(nèi)即由白色變?yōu)榉奂t色，而空懷母羊陰道黏膜始終都是粉紅色的。

陰道黏液：懷孕母羊的陰道黏液為透明狀，量少而黏稠，可手牽成線；而空懷母羊的陰道黏液量多、稀薄，呈灰白色。

子宮頸：懷孕母羊子宮頸緊閉，色澤蒼白，并有漿糊狀的黏塊堵塞在子宮頸口形成“子宮栓”。

7.2 母羊尿化驗(yàn)法

取妊娠母羊早晨的尿液20 mL，裝于試管中，加入少許醋，然后加入碘酒1 mL，在火焰上慢慢加熱煮開(kāi)后觀察。妊娠母羊尿液呈紅色，空懷母羊尿液呈淺黃色或褐色。

7.3 藥物檢查法

母羊配種后5～8 d，注射促排卵3號(hào)12.5 μg/只，若母羊發(fā)情，則為空懷羊，反之為妊娠羊。