脫毒微型馬鈴薯生產(chǎn)技術(shù)研究

吳慧中

（天津市園藝工程研究所，天津 300384）

馬鈴薯是我國重要的糧食及蔬菜作物,生產(chǎn)上大多利用塊莖進(jìn)行無性繁殖。馬鈴薯在生長期間除了受到蟲害的影響,還會因病毒侵染而出現(xiàn)退化。這些病毒一旦侵入馬鈴薯植株或塊莖,就表現(xiàn)出各種各樣的退化類型,主要有花葉、卷葉和束頂?shù)?。植株表現(xiàn)為矮小、葉片失綠、葉片卷曲壞死、頂部葉片變色、卷縮,塊莖表現(xiàn)為變小、龜裂、變尖、內(nèi)部網(wǎng)狀壞死,嚴(yán)重者失去發(fā)芽能力,一般減產(chǎn)20%～30%；嚴(yán)重者減產(chǎn)80%以上,而且病情逐年加重,最后失去種用價值。利用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行馬鈴薯脫毒快繁已廣泛應(yīng)用于生產(chǎn),是目前解決馬鈴薯種薯退化最直接有效的方法。

在原種生產(chǎn)上，馬鈴薯脫毒試管苗和脫毒試管薯起著非常重要的作用。但是由于脫毒苗運(yùn)輸不便、成活率低，脫毒試管薯生產(chǎn)成本高、生產(chǎn)速度慢，限制了生產(chǎn)上大面積推廣脫毒馬鈴薯。因此，大量地、工廠化生產(chǎn)脫毒馬鈴薯微型薯顯得尤為重要。筆者認(rèn)為工廠化生產(chǎn)脫毒馬鈴薯微型薯須掌握以下幾項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)。

1 馬鈴薯的莖尖脫毒方法

1.1 脫毒方法

采用莖尖剝離和接種后熱處理來脫毒。

1.2 品種

荷蘭薯15號大田生產(chǎn)薯塊。

1.3 莖尖組織培養(yǎng)基

MS+6-BA 1.0～1.5+NAA 0.1～0.2+肌醇 0.8 mg/L+3.5%蔗糖+0.72%瓊脂粉,培養(yǎng)基的PH值5.8～6。

在嚴(yán)格的無菌環(huán)境中，在40 x解剖鏡下，用無菌刀片，切下0.1～0.2 mm、帶1～2個葉原基的莖尖，接種于配制好的莖尖組織培養(yǎng)基中，放入培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。

1.4 培養(yǎng)條件

培養(yǎng)溫度23～24℃，培養(yǎng)濕度80%～85%，光強(qiáng)度 2000～2500 lx，光照（12～14） h/d。

在此培養(yǎng)條件下，有利于莖尖的分化和愈傷組織分化，馬鈴薯莖尖分化率達(dá)72.5%～95.5%（不同品種莖尖分化率不同）。30～40 d莖尖明顯增長后結(jié)合37±1℃的熱處理6～8周。培養(yǎng)時及時去除污染苗，將生長正常的苗經(jīng)3～4個月培養(yǎng)形成的小植株在繼代培養(yǎng)基中再增殖1次，待植株生長到一定大小時進(jìn)行病毒檢測。

實(shí)驗(yàn)證明：馬鈴薯莖尖脫毒成功率的高低，除受莖尖大小影響之外，還受人員操作因素的影響。一般來講，剝離的莖尖越小，所帶病毒越少，獲得無病毒植株的機(jī)會就越高，但培養(yǎng)越困難；離體莖尖越大，成活率越高，但脫毒效果降低。理想的莖尖大小是0.1～0.2 mm，帶有1～2個葉原基。

2 脫毒試管苗的快速繁殖

通過莖尖培養(yǎng)獲得的試管苗，須大量擴(kuò)繁，方可滿足工廠化生產(chǎn)脫毒微型薯的需要。

把保存的試管苗先進(jìn)行病毒檢測，確信不含各種病毒后再開始切繁。待獲得的不含病毒試管苗長至6～8 cm時，在無菌操作室內(nèi)，切段轉(zhuǎn)接于繼代增殖培養(yǎng)基。增殖培養(yǎng)基用MS大量元素+Fe鹽IBA 0.2 mg/L+胡蘿卜汁100 ml/L+3%食用白糖(卡拉膠12 g/L,pH 6)上，再放回室內(nèi)培養(yǎng)。一般4周轉(zhuǎn)接1次，繁殖系數(shù)5～7。培養(yǎng)最適溫度23～24℃，光照時間（14～15） h/d，光照強(qiáng)度1500～2000 lx。

增殖培養(yǎng)基加入100 ml/L胡蘿卜汁,成苗時間提前了13 d，成苗率增加了15%，能顯著促進(jìn)莖長和分枝數(shù)增加，莖粗大，誘導(dǎo)出的試管苗整齊，生根率高達(dá)92%。

為降低馬鈴薯試管苗快繁成本，可用一般白糖代替蔗糖，用市售的卡拉膠代替瓊脂粉，結(jié)果單株成本降低35%，總成本降低約25%。

3 脫毒苗生產(chǎn)微型薯技術(shù)

3.1 設(shè)施準(zhǔn)備

微型薯在防蟲溫室中種植，溫室風(fēng)口繃防蟲網(wǎng)，在溫室內(nèi)用建筑用紅磚沿溫室寬方向鋪砌苗床，苗床寬2 m、長7～8 m、深15 cm，底覆一層棚膜或地膜，再鋪一層網(wǎng)紗。上鋪蛭石和蚯蚓糞基質(zhì)，厚度10 cm。苗床埂用兩層磚錯砌，寬度25 cm，配套6 m3曬水池，購置1臺微型水泵，農(nóng)用噴霧器用噴頭、長80 cm左右、粗1 cm細(xì)膠管，并準(zhǔn)備噴壺、塑料桶、塑料盆等。

3.2 鋪覆基質(zhì)

基質(zhì)選用新蛭石和蚯蚓糞，如蛭石太細(xì)可加入適量珍珠巖。將基質(zhì)倒入苗床中，大水澆透，將基質(zhì)鋪平，在基質(zhì)表層每苗床撒施氮、磷、鉀復(fù)合肥500 g，淺耙，與基質(zhì)混合均勻，用木板將基質(zhì)刮平，保證基質(zhì)疏松。

苗床消毒。移栽前任選750～800倍液的代森錳鋅、800～900倍液的敵克松、1000倍液的多菌靈、600～800倍液的百菌清、1%的福爾馬林溶液其中一種進(jìn)行苗床消毒。消毒后的苗床5 d后即可移栽脫毒苗。

苗床殺蟲。噴施10%的一遍凈或10%的吡蟲啉可濕性粉劑，消滅網(wǎng)室中的多種傳播病毒的媒介害蟲。

3.3 煉苗定植

溫室在煉苗前用高錳酸鉀和甲醛熏蒸，培養(yǎng)20 d的脫毒苗即可拿到溫室煉苗。將培養(yǎng)瓶行列整齊擺放到苗床上，棚內(nèi)煉苗溫度20～25℃、濕度80%～90%，光強(qiáng)時適當(dāng)遮陽。3 d后打開瓶蓋封膜，每天用噴壺噴水1次，4 d后脫毒苗變綠就可以定植。將試管苗切成帶有一個芽的莖段，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基一周后，小苗長成帶有苗高7～10 cm、莖粗0.6～0.8 mm、葉片5～8片及3～4條小根的健壯苗，移栽前去掉試管封口，鍛煉2 d，即可移栽。在溫、濕度條件合適時移栽成活率可達(dá)90%以上。生根培養(yǎng)基1/2MS+吲哚乙酸0.2 mg/L+食用白糖2%+瓊脂 0.7%，pH 5.8。

將脫毒苗用鑷子從培養(yǎng)瓶中取出，放在清水中輕輕洗凈根部的培養(yǎng)基，按株距5 cm、行距12 cm，密度為167株/m2打孔栽植，栽植時壓實(shí)基部的培養(yǎng)土，澆透定根水。移栽后，苗床加蓋薄膜以保溫保水，提高成活率，7 d后揭去薄膜。

將脫毒苗從培養(yǎng)瓶中取出，放在清水中輕輕清洗根部的培養(yǎng)基，清洗脫毒苗時應(yīng)注意避免損傷脫毒苗根部，并注意將脫毒苗根部的培養(yǎng)基清洗干凈。將脫毒苗剪成雙莖節(jié)的莖段，用3 mg/l GA3加5 mg/l NAA浸泡，然后按株距5 cm、行距10 cm栽植，栽植時壓實(shí)基部，用噴壺澆透定根水。

4 生產(chǎn)管理

每年最晚不超過6月15日，在防止蚜蟲傳播病毒的保護(hù)條件下，生產(chǎn)出無病毒和其它病菌的脫毒微型小薯即原原種。

4.1 水分管理

扦插后立即澆透水，使空氣濕度保持在85%左右，3 d后略噴點(diǎn)水，以保持濕潤。當(dāng)發(fā)現(xiàn)基質(zhì)變干，要立即澆水，正常情況下2 d澆水一次，具體情況應(yīng)視苗床干濕情況決定澆水與否，要用手深入到基質(zhì)中掌握干濕。注意避免由于水分過多引起的爛苗。澆水應(yīng)該在上午10時以前進(jìn)行。

4.2 溫度管理

新生根成活前15 d以高溫、高濕環(huán)境，遮陽避光養(yǎng)護(hù)為主，溫度以25～28℃為宜，減小晝夜溫差。生根后注意通風(fēng)降溫，以20℃左右為宜，最低不低于15℃。

4.3 營養(yǎng)管理

不同生育時期使用不同營養(yǎng)液配方，5～8 d澆施一次，同時觀察植株的營養(yǎng)生長情況。脫毒苗生長較差時，加大營養(yǎng)液的施用量和施用次數(shù)，并輔以根外追肥，植株?duì)I養(yǎng)生長過剩時，應(yīng)減少營養(yǎng)液的施用量和施用次數(shù)。在前期加施氮肥可以促進(jìn)營養(yǎng)生長，培育壯苗，減少病害的發(fā)生，后期加施鉀肥以滿足結(jié)薯期的生長需要。

4.4 及時培土

棚內(nèi)90%的脫毒苗達(dá)到3～5 cm時開始壓苗，增加匍匐莖的生成。培土進(jìn)行兩次，第一次是壓苗前刨溝起壟；第二次是在脫毒苗長到10 cm左右時，用蛭石填滿第一次所刨的溝。培土可以增加匍匐莖的生成，因而提高微型薯的結(jié)薯率。

4.5 控制徒長

扦插初期小拱棚內(nèi)相對濕度保持在95%～100%，蛭石基質(zhì)持水量達(dá)到飽和；扦插苗生長前期創(chuàng)造19～22℃的莖葉生長適溫；生育后期調(diào)低溫度至15～18℃，并設(shè)法擴(kuò)大晝夜溫差。葉面肥噴施。

扦插苗用0.2%尿素液和磷酸二氫鉀水溶液加少量葡萄糖葉面噴施。營養(yǎng)生長過旺，冠蓋層覆蓋率達(dá)95%以上時要控制徒長，用（150～200）mg/L的多效唑處理。

4.6 病蟲害防治

發(fā)現(xiàn)中心病株及時拔除。中心病株拔除后，苗床用代森鋅、瑞毒霉或硫酸銅等藥劑噴灑防病。蚜蟲首先要加強(qiáng)預(yù)防，清除溫室或網(wǎng)棚內(nèi)外雜草，處理作物殘枝枯葉，藥劑防治用菊酯類殺蟲劑。

微型薯生產(chǎn)過程中，蟲害主要有金針蟲和地老虎，以及傳播病毒蚜蟲。主要病害有真菌性早疫病、晚疫病以及基質(zhì)傳播放線菌瘡痂病。金針蟲和地老虎等地下害蟲在基質(zhì)鋪覆前，用“地蟲特殺”22 kg/hm2均勻撒施防治。瓶苗定植后，每隔10 d噴一次抗蚜威；或用40%樂果乳劑2000倍液噴霧防治蚜蟲。并注意檢查溫室是否有破損之處，及時堵阻漏洞。真菌性病害應(yīng)以防為主。脫毒苗栽植20 d后，用25%甲霜靈錳鋅或72%克露等2 kg/hm2，用水稀釋600～800倍液葉面噴霧，每7 d一次，藥物交替使用。

5 采收與貯藏

試管苗開始褪綠變黃時停止生長液和水分供應(yīng)，莖葉全部枯萎后采收微型種薯。收獲后將微型薯置于陰涼處晾干表皮水分，剔除個別病爛薯和不夠級別的薯塊后，微型薯經(jīng)過攤晾后用尼龍袋或其它透氣容器小量包裝（5～7.5 kg），按大小分級裝袋。最好單存單貯，貯藏期間窖內(nèi)溫、濕度分別控制在2～4℃和80%～90%，并保持良好的通風(fēng)換氣條件。

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