完善血液相容性試驗(yàn)降低輸血反應(yīng)的發(fā)生

魏廷恒 房杰

輸血反應(yīng)其實(shí)質(zhì)就是機(jī)體的免疫反應(yīng)。在臨床輸血中,最重要的是在輸血前預(yù)判這次輸血是否成功,并且不出現(xiàn)急性或遲發(fā)性輸血副反應(yīng)。由于輸血本質(zhì)上是同種異體間血液的移植,除同卵雙生子外,就幾乎沒(méi)有相同的血型的人。因此輸血時(shí)發(fā)生在同種之間的免疫應(yīng)答是較難完全杜絕的,交叉配血就是檢查血型及亞型之間是否相合,減少輸血反應(yīng)的發(fā)生。目前各國(guó)血液輸血預(yù)警系統(tǒng)的資料顯示,超過(guò) 60%的輸血不良反應(yīng)來(lái)自于同種免疫反應(yīng)。隨著免疫血液學(xué)相關(guān)新技術(shù)的應(yīng)用,能盡可能的避免一些輸血反應(yīng)的發(fā)生,提高輸血的有效性和安全性。

1 ABO/Rh變異型的鑒定與輸血

實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn) ABO/Rh血型變異日益增多。例如:惡性腫瘤、細(xì)菌吸附導(dǎo)致血型抗原的減弱或獲得性A或 B抗原;造血干細(xì)胞移植導(dǎo)致的血型轉(zhuǎn)換;血型抗原本身的多態(tài)性;各亞種亞型和變異型的存在等,使輸血實(shí)驗(yàn)室工作者無(wú)法立即準(zhǔn)確判定受檢樣本的血型。此時(shí)需要各種附加試驗(yàn),如吸收放散試驗(yàn)鑒定 ABO亞型;特異性 D表位分析試驗(yàn)鑒定 D變異型;紅細(xì)胞膜酸處理鑒定獲得性 A和 B抗原等,可部分解決血型亞型和變異型血型鑒定的難題。

2 提高血庫(kù)常規(guī)檢測(cè)試驗(yàn)的靈敏度和穩(wěn)定性

輸血實(shí)驗(yàn)室有 2個(gè)最基本的試驗(yàn)用于血型鑒定,即直接血凝試驗(yàn)和用于抗體鑒定與配血的間接抗球蛋白試驗(yàn)(IAT)。IAT技術(shù)現(xiàn)在仍然被認(rèn)為是經(jīng)典的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。但I(xiàn)AT技術(shù)重現(xiàn)性差和不便于自動(dòng)化檢測(cè)。從 20世紀(jì) 90年代開(kāi)始,凝膠技術(shù)、親和柱凝集技術(shù)和紅細(xì)胞固相黏附分析這 3中新的技術(shù)被相繼應(yīng)用到輸血領(lǐng)域中。盡管這 3種技術(shù)從操作步驟,所用實(shí)驗(yàn)儀器方面都與試管法不同,但實(shí)驗(yàn)原理上仍是抗原抗體相互作用后,通過(guò)紅細(xì)胞的凝集來(lái)顯示結(jié)果。這些新技術(shù)的設(shè)計(jì)目的是試管法試驗(yàn)的完善,即形成穩(wěn)定的終點(diǎn)和便于自動(dòng)化。而且這些新方法在血型檢測(cè)時(shí),所需的樣本量較少,試驗(yàn)的重復(fù)性很好。且具有無(wú)需細(xì)胞洗滌以及對(duì)技術(shù)的依賴(lài)性降低等優(yōu)點(diǎn),特異性與靈敏度被認(rèn)為是可與低離子強(qiáng)度間接抗人球蛋白試驗(yàn)相媲美。當(dāng)然它也有一定的缺點(diǎn),如在 ABO和 Rh定型試驗(yàn)也比較耗時(shí),需 20min(10 min孵育,10m in離心);以及在獲得試驗(yàn)體系高靈敏度的同時(shí),也較易產(chǎn)生假陽(yáng)性。

3 交叉配血試驗(yàn)顯示不配合時(shí)的輸血策略

隨著輸血前檢查項(xiàng)目的增多和診斷試劑、實(shí)驗(yàn)體系靈敏度的提高,主次側(cè)交叉配血不合的現(xiàn)象也日益增多。從實(shí)驗(yàn)室或醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中我們知道,許多因素將影響紅細(xì)胞的免疫性破壞和體內(nèi)存活。目前較明確的因素包括 IgG的亞類(lèi)、抗體激活補(bǔ)體的能力、抗體的總量、紅細(xì)胞上抗原的數(shù)量、抗原從紅細(xì)胞上解離的能力以及受血者單核吞噬系統(tǒng)的活力等。通過(guò)研究這些常規(guī)血清學(xué)試驗(yàn)的結(jié)果來(lái)推斷輸血后供血紅細(xì)胞在受體內(nèi)存活的狀態(tài),有時(shí)也是可能的。如利用預(yù)熱技術(shù),在37℃條件下進(jìn)行配血試驗(yàn),以判斷抗體在正常生理體溫條件下是否具有活性等等。但在另外一些情況下,則不得不采取一些非常規(guī)的方法,例如,同位素 Cr51來(lái)測(cè)定紅細(xì)胞的存活率;以功能細(xì)胞試驗(yàn)預(yù)判血型同種抗體的臨床意義。這類(lèi)功能細(xì)胞試驗(yàn)有 3種:單核細(xì)胞單層檢測(cè)、抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)和化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)。這些試驗(yàn)都是通過(guò)抗體包被的紅細(xì)胞和單核細(xì)胞之間的相互作用,以模擬致敏紅細(xì)胞在體內(nèi)被破壞的過(guò)程,同時(shí)結(jié)合抗體的紅細(xì)胞被單核細(xì)胞吞噬后,在吞噬細(xì)胞內(nèi)被裂解的這種紅細(xì)胞在體內(nèi)調(diào)理性吞噬的方式進(jìn)行設(shè)計(jì)的。這些功能細(xì)胞試驗(yàn)可為我們?cè)谳斞疤峁┮粋€(gè)該血型同種抗體是否有臨床意義的評(píng)估,即在體外給我們模擬了一個(gè)輸血后體內(nèi)免疫應(yīng)答的預(yù)試驗(yàn)。

4 血型基因診斷和臨床應(yīng)用

隨著血型遺傳學(xué)的迅速發(fā)展,通過(guò)分子遺傳學(xué)技術(shù)已經(jīng)能夠獨(dú)立地使血清學(xué)上的血型鑒定的困難或者不可能定型的血型鑒定出來(lái)。分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,使人們不斷報(bào)道出以前未知的血型等位基因。但同時(shí)常常發(fā)生假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果。隨著技術(shù)上的發(fā)展,定義不同的等位基因在人類(lèi)血細(xì)胞上的表達(dá)已成為隨之而來(lái)的更為重要的工作。而發(fā)現(xiàn)等位基因的時(shí)代也隨之過(guò)渡到了探明基因表達(dá)階段的時(shí)代。比如,用為矩陣的自動(dòng)定型方法來(lái)取代血清學(xué)定型。此外,PCR產(chǎn)物與探針雜交后,通過(guò)芯片掃描可分析熒光強(qiáng)度的方法能夠快速并且自動(dòng)化地將供者和受者的血液進(jìn)行“完全”定型,以增加輸血的配合率,并將同種免疫反應(yīng)的危險(xiǎn)性降到最低。

臨床上所發(fā)生的輸血反應(yīng)并不全都是有血型抗原的同種免疫造成的。有時(shí),同樣的血輸給不同的人,會(huì)產(chǎn)生不同的結(jié)果。有研究發(fā)現(xiàn)惡性實(shí)體瘤、異基因干細(xì)胞移植、有糖尿病病史的患者產(chǎn)生同種免疫的風(fēng)險(xiǎn)性較高。機(jī)體處于炎癥狀態(tài)時(shí),免疫反應(yīng)可能增強(qiáng)等都有可能增加輸血反應(yīng)的發(fā)生。

綜上所述,在各種血型鑒定與配血試驗(yàn)中,免疫血液學(xué)研究方法只有標(biāo)準(zhǔn)的操作步驟,并沒(méi)有通用的、唯一的方法。各種血型抗原與抗體都有其自身的特性,我們需研究和選用更為合適的方法對(duì)樣本的血型進(jìn)行測(cè)定,已達(dá)到更為快速、準(zhǔn)確的血型定型。以便于提供安全、及時(shí)、有效臨床用血,解除患者的疾患。

[1]朱自嚴(yán),等.提高輸血療效必須首先完善輸血前血液的相容性試驗(yàn).中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2009,2:134-136.