nm23基因在消化道腫瘤研究中的應用

史宏偉 侯振江

1.河北省順平縣醫(yī)院檢驗科，河北 順平 072270；2.河北省滄州醫(yī)學高等?？茖W校，河北 滄州 061001

nm23基因是1988年由Steeg首次從小鼠黑色素瘤K-1735細胞株中用消減雜交法分離出來的能抑制肺癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因。原位雜交發(fā)現(xiàn)，其在低轉(zhuǎn)移株中的表達強度為高轉(zhuǎn)移株的10倍。人類nm23基因有兩種，即nm23-H1和nm23-H2，其編碼蛋白與核苷二磷酸激酶（NDPK）的A、B亞基分別相對應，編碼蛋白的氨基酸序列與NDPK的同源性分別為89%和97%，二者之間的同源性為88%[1]。人類nm23基因家族數(shù)目有8個，即nm23-H1、nm23-H2、DR-nm23、nm23-H4、nm23-H5、nm23-H6、nm23-H7、nm23-H8[2]，其中研究最多的是主要與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的nm23-H1和調(diào)控c-myc和PDGF基因轉(zhuǎn)錄的nm23-H2。周清華等發(fā)現(xiàn)，nm23基因水平的低表達或雜合性缺失與多種腫瘤的高轉(zhuǎn)移潛力、遠處轉(zhuǎn)移和預后不良有關(guān)，而且常伴有一些腫瘤侵襲相關(guān)分子的異常。還有研究表明，nm23在某些腫瘤基因組中表現(xiàn)為丟失、擴增和突變，并與轉(zhuǎn)移有關(guān)，起轉(zhuǎn)移抑制基因的作用，但在轉(zhuǎn)移能力不同腫瘤中的表達并非一致。本文就nm23基因在消化道腫瘤研究中的應用概述如下。

1 食管癌

陳峰等[3]報道，食管癌組織標本中nm23-H1蛋白陽性表達率為54.1%（33/61），與性別、年齡、腫瘤部位、大小、病理類型和浸潤程度無關(guān)；食管癌旁無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組nm23-H1陽性表達率為61.5%（32/52），顯著高于有轉(zhuǎn)移組（11.1%，1/9）；還與術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移、復發(fā)有關(guān)，nm23-H1陽性表達組術(shù)后生存期明顯長于nm23-H1陰性表達組（p＜0.01）。結(jié)果表明：食管癌伴腫瘤轉(zhuǎn)移者nm23-H1蛋白的陽性表達率明顯低于無腫瘤轉(zhuǎn)移者，且高表達對食管癌轉(zhuǎn)移有一定的作用，其低表達預示患者術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移和復發(fā)的可能性大，生存期短，預后差。因此，檢測nm23-H1的表達有助于了解食管癌生物學行為和判斷預后。

2 胃癌

Nakayama等分別用Southern、Northern及Western印跡法研究胃癌患者nm23基因表達，結(jié)果80%的有基因雜合性丟失（LOH），84%的原發(fā)灶mRNA表達高于移行組織，但與臨床病理特征無密切關(guān)系。用免疫組化法則發(fā)現(xiàn)有轉(zhuǎn)移的胃癌患者，52%的轉(zhuǎn)移灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)nm23表達低于原發(fā)灶，72%的肝轉(zhuǎn)移灶呈弱陽性，提示nm23過度表達與胃癌形成有關(guān)，降低則促進轉(zhuǎn)移。Kodera等[4]在31例胃癌中，T3、T4期胃癌nm23-H1mRNA顯著降低，且低表達者生存期縮短（p＜0.02）。施秀清等[5]用原位分子雜交技術(shù)（ISH）檢測112例胃癌組織中nm32-H1mRNA表達，結(jié)果胃癌腫瘤區(qū)、移行區(qū)及癌旁區(qū)的陽性表達率分別為42.9%、27.6%和18%，呈梯度下降趨勢；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌的表達陽性率為87.2%（41/47），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者為10.8%（7/65）；隨訪88例中≥3年生存者中68.6%（24/35）nm23-H1mRNA陽性表達，＜3年生存者為37.9%（11/29）。nm23-H1mRNA陽性表達在胃癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、非轉(zhuǎn)移中差異顯著（p＜0.01）。結(jié)合臨床資料綜合研究顯示，nm23-H1mRNA表達率的降低與胃癌患者淋巴結(jié)的高轉(zhuǎn)移、生存期短有關(guān)。反之，nm23-H1mRNA表達率的升高與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)，與患者的生存期呈正相關(guān)，與文獻報告結(jié)果一致[4，6]。因此檢測nm23，對胃癌患者的診療，及術(shù)后復發(fā)、轉(zhuǎn)移的預測有指導意義。

3 肝癌

Yamaguchi等[7]報道，nm23-H1在肝內(nèi)轉(zhuǎn)移HCC患者中的陽性表達率為26.7%，而陰性者為70%（p＜0.05）；從生存曲線看，nm23表達陽性組3年生存率達62.5%，陰性組無2年以上生存者（p＜0.01）。結(jié)果提示nm23與HCC的肝內(nèi)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)，低表達者生存期短。Lizuka[8]用定量RT-PCR研究30例HCC手術(shù)標本，僅發(fā)現(xiàn)nm23-H1與肝內(nèi)轉(zhuǎn)移和TNM分期呈明顯負相關(guān)，且nm23-H1mRNA含量與其表達水平一致。Boix發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中nm23-H1mRNA的過度表達與小而獨立的HCC手術(shù)切除后的低復發(fā)有關(guān)。張松平等[9]用免疫組化法對104例HCC進行nm23-H1基因檢測，發(fā)現(xiàn)HCC陽性率為51.9%，其陽性表達與癌旁有無肝硬化（44.83%比70.59%）及門靜脈癌栓其nm23陽性組30.43%（14/46）比nm23陰性組72.22%（26/36）。nm23在肝癌切除術(shù)后無瘤生存率大于5-10年以上病例中的陽性率達80%（24/30），而術(shù)后12-32個月復發(fā)病例中的陽性率僅26.09%。故認為nm23-H1在肝癌內(nèi)轉(zhuǎn)移、復發(fā)較nm23-H2重要，是一個獨立的重要預后指標。

4 膽道腫瘤

Lee等[10]報道，67%低分化膽囊腺癌和50%中等分化腺癌中nm23-H1蛋白表達缺乏，與慢性膽囊炎組相比差異顯著（p=0.002），且表達水平與患者生存期呈正相關(guān)（R分別為0.687，0.652，相應P值為0.01，0.016）；在膽囊良性病變中未發(fā)現(xiàn)nm23降低。而所有膽總管癌、67%的原位壺腹癌和43%的壺腹癌中，nm23呈中等以上表達。Fujii等[11]報道72%（78/107）膽囊癌組織中nm23蛋白呈陽性表達，而正常膽囊黏膜的nm23免疫活性非常弱。其陽性表達與腫瘤的組織類型、浸潤深度（或腫瘤分期）及轉(zhuǎn)移無明顯關(guān)系。不同作者研究結(jié)果不一致，有待于進一步研究。

5 胰腺癌

Nanamori等[12]用免疫組化法檢測31例根治性胰腺癌手術(shù)標本，發(fā)現(xiàn)nm23/NDPK陽性表達中77%的有遠方轉(zhuǎn)移，與陰性組相比差異非常顯著（p＜0.02）。47例浸潤性胰腺導管細胞癌中66%呈強陽性，而12例良性或非浸潤性胰腺外分泌瘤中僅17%陽性（p＜0.01）；陽性組生存期短（p＜0.03），且與組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（p＜0.05）及核仁形成區(qū)嗜銀細胞計數(shù)（p＜0.01）呈正相關(guān)。李玉軍等[13]報道，47例胰腺癌組織中nm23基因產(chǎn)物NDPK的表達率為59.6%（28/47），組織學為Ⅰ級病例NDPK的陽性率（73.3%）明顯高于Ⅲ級者（41.7%，P＜0.05）；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的陽性率（80.8%）顯著高于有轉(zhuǎn)移者（33.3%，p＜0.01）；NDPK表達陽性者術(shù)后1年生存率（25.0%）明顯高于陰性者（0%，p＜0.05）；NDPK陽性率與胰腺癌病理類型無關(guān)。結(jié)果表明，nm23基因?qū)σ认侔┺D(zhuǎn)移具有抑制作用，NDPK表達情況有助于了解胰腺癌的生物學行為，并可作為判斷患者預后的生物學指標。

6 大腸癌

Wang等用Southern印跡法及RT-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)，20例大腸癌患者中，8例有淋巴結(jié)及遠處轉(zhuǎn)移者中4例有等位基因丟失或突變，12例無轉(zhuǎn)移者無上述變化。nm23-H1等位基因缺失與低分化程度密切相關(guān)，且生存期短。劉勇等[14]報道大腸癌組織中nm23陽性率為71.6%，其低表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05），在Ⅳ型膠原表達不同的腸癌中nm23-H1的表達無明顯差異。齊秀恒等[15]用流式細胞術(shù)（FCM）測定64例大腸癌患者nm23和CD44基因蛋白，以熒光指數(shù)（FI）表示，結(jié)果大腸癌細胞nm23FI值顯著低于正常大腸黏膜（P＜0.001），說明大腸癌的發(fā)生與nm23基因的低表達有關(guān)；Dukes'C、D期FI值（0.80±0.08）低于Dukes'A、B期FI值（0.89±0.10，P＜0.05）；臨床上浸潤型和潰瘍型大腸癌均較隆起型的浸潤性強，轉(zhuǎn)移和復發(fā)率高，其FI值前者（0.80±0.08）明顯低于后者（0.88±0.10，P＜0.05），表明nm23在大腸癌局部發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移中起負調(diào)控作用，CD44基因蛋白起正調(diào)控作用。nm23基因蛋白低表達和CD44基因蛋白高表達的大腸癌預后差。趙川等[16]報道nm23在結(jié)直腸癌淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組顯著高于有轉(zhuǎn)移組（P＜0.05），與結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)。還顯示在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌中，nm23與c-erbB-2的表達呈負相關(guān)，提示c-erbB-2和nm23基因蛋白異常表達在結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起重要作用，聯(lián)合檢測對判斷結(jié)直腸癌的預后和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定價值。

[1] 陳宇霞，王一飛.nm23基因與肺癌的研究進展的影響[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2004.

[2] 陳峰，蔣耀光，高奉尋.食管癌組織中nm23-H1蛋白表達及其臨床意義[J].實用癌癥雜志，1998.

[3] 施秀清，李功，倪燦榮，等.胃癌抗轉(zhuǎn)移癌基因nm23-H1mRNA的表達意義[J].新消化病學雜志，1997.