Survivin蛋白在胃癌中的表達(dá)及其與幽門螺桿菌感染的相關(guān)性

孫秋艷

Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成員，Survivin具有腫瘤特異性，只表達(dá)于腫瘤和胚胎組織，且與腫瘤細(xì)胞的分化增殖及浸潤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［1］。幽門螺桿菌感染是慢性活動(dòng)性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴組織(MALT)淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年世界衛(wèi)生組織/國際癌癥研究機(jī)構(gòu) (WHO/IARC)將幽門螺桿菌定為Ⅰ類致癌原［2］。但是，國內(nèi)很少報(bào)道Survivin蛋白在腫瘤中的表達(dá)及與Hp感染之間的聯(lián)系。筆者對(duì)胃癌組織中Survivin蛋白的表達(dá)應(yīng)用免疫組化方法進(jìn)行檢測(cè)及研究其與HP感染之間的聯(lián)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采集我院2009年3月至2010年2月行手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)收集的胃癌標(biāo)本50例，50例患者術(shù)前未行放、化療。所有標(biāo)本采用40 g/L中性甲醛進(jìn)行固定，石蠟包埋，4μm厚切片，HE染色及復(fù)核病理診斷，同時(shí)按照WHO標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)。所有患者中男36例，女14例，年齡36～79歲，平均59.9歲;中高分化18例，低分化32例;有淋巴轉(zhuǎn)移38例。癌組織浸潤至黏膜下層及以上5例，浸潤至肌層14例，浸潤至漿膜層及以下31例。

1.2 檢測(cè)試劑及方法 采用免疫組化SP法檢測(cè)Survivin蛋白表達(dá)。羊抗人Survivin(1:150)(美國 Santa cruz公司生產(chǎn))，羊SP試劑盒(北京中杉金橋生物工程有限公司生產(chǎn))。用已知胃癌陽性切片作陽性對(duì)照，陰性對(duì)照省略一抗，用封閉血清代替。

1.3 結(jié)果評(píng)定［3］Survivin陽性染色為棕黃色顆粒，定位于細(xì)胞漿或細(xì)胞核，部分細(xì)胞膜少量表達(dá)。每張切片隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野(×400倍)，每個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)100個(gè)癌細(xì)胞，觀察陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度，并計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。首先按染色強(qiáng)度計(jì)分:0分:基本不著色1分;著色淡;2分:棕黃色;3分:深棕黃色或棕褐色。其次按著色細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分率:0分:≤5%;1分:6% ～30%;2分:31% ～70%;3分:≥71%;將每張切片的兩種方法分?jǐn)?shù)相加，0分:陰性(-);1～2分:弱陽性(+);3～4分:中陽性(2+);5～6分:強(qiáng)陽性(3+)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 50例胃癌組織中有37例Survivin表達(dá)陽性，其中弱陽性8例，中陽性14例，強(qiáng)陽性15例，陽性表達(dá)率為74.0(37/50)，癌旁組織有21例表達(dá)陽性，其中弱陽性13例，中陽性8例，無強(qiáng)陽性，陽性表達(dá)率為42.0%(21/50)。胃癌組織Survivin的陽性表達(dá)率高于癌旁組織，二者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);胃癌組織中Survivin的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于癌旁組織(P＜0.05)。

2.2 Survivin蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理特征間的關(guān)系

2.2.1 Survivin蛋白表達(dá)與患者性別關(guān)系 男患者中陽性表達(dá)率為80.6%(28/36)，女患者為78.6%(11/14)，在性別中陽性表達(dá)無明顯差異(P＞0.05)。

2.2.2 Survivin蛋白表達(dá)與臨床分期、浸潤深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系 臨床分期中，Ⅰ～Ⅱ陽性表達(dá)率為61.5%(16/26)，Ⅲ ～Ⅳ為87.5%(21/24);浸潤深度中，黏膜下層及以上患者的陽性表達(dá)率為40.0%(2/5)，肌層為64.2%(9/14)，漿膜層及以下為83.9%(26/31);分化程度中，中高分化中陽性表達(dá)率為50%(9/18)，低分化為87.5%(28/32);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性表達(dá)率為84.2%(32/38)，無有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性表達(dá)率為50%(6/12)，可見，Survivin蛋白表達(dá)與臨床分期、浸潤深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯關(guān)聯(lián)(P＜0.05)。

2.3 Survivin蛋白表達(dá)與Hp感染之間的關(guān)系 Hp陽性胃癌組織Survivin蛋白的陽性表達(dá)率為88.2%(30/34)，Hp陰性組胃癌組織中Survivin蛋白的陽性表達(dá)率為43.8%(7/16)，HP陽性組胃癌組織中Survivin蛋白表達(dá)強(qiáng)度顯著高于Hp感染陰性組(P＜0.05)。

3 討論

Survivin是IAPs家族中最小成員，它在正常分化成熟的組織中不表達(dá)，而廣泛表達(dá)于人類常見的腫瘤組織。它可促進(jìn)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化、抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖、參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的有絲分裂，并可能參與血管生成，對(duì)腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移可能起重要作用。Survivin在幾乎所有被檢測(cè)過的惡性腫瘤組織中有不同程度的表達(dá)，表達(dá)率為30% ～100%［4］，且Survivin的表達(dá)與多種腫瘤的生物學(xué)特性和(或)疾病分期有關(guān)。正常胃黏膜組織、淺表型胃炎組織中不表達(dá)，提示Survivin蛋白的表達(dá)發(fā)生在胃癌惡性轉(zhuǎn)化的早期和進(jìn)展期，表明Survivin蛋白與胃癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。Survivin蛋白在胃癌組織中高表達(dá)，相應(yīng)癌旁組織中無表達(dá)。本研究采用免疫組化法檢測(cè)了胃癌組織中Survivin的表達(dá)，結(jié)果顯示陽性染色均定位于胃癌細(xì)胞漿中，遠(yuǎn)癌黏膜組織中Survivin不表達(dá)，胃癌組織中Survivin的陽性表達(dá)率明顯高于癌旁組織，提示Survivin蛋白的表達(dá)與胃癌的發(fā)生有關(guān)。Survivin蛋白表達(dá)與腫瘤預(yù)后、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級(jí)無關(guān)。根據(jù)筆者研究，臨床分期晚者，浸潤深度深者，分化程度低者及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，Survivin蛋白的表達(dá)增強(qiáng)(P＜0.05)，提示Survivin蛋白與胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為及發(fā)展有關(guān)。

在胃癌的形成過程中，Hp感染可明顯增加胃黏膜增殖。Hp感染可引起胃黏膜損傷，同時(shí)可引起DNA的損傷及基因突變。Hp感染可上調(diào)胃黏膜組織中ras-p21和p53基因的表達(dá)，參與胃癌的發(fā)生發(fā)展。在腸化生的過程中Hp可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，但在不典型增生過程中，Hp可以抑制細(xì)胞凋亡［5］。Hp感染與Survivin的表達(dá)之間的關(guān)系，目前尚缺乏研究。胃癌組織中Hp感染陽性組Survivivn蛋白的表達(dá)顯著高于陰性組，提示Survivin蛋白在胃癌組織中的表達(dá)與Hp感染有關(guān)，兩者在胃癌的發(fā)生中可能有協(xié)同作用。Hp陽性胃癌組織中Survivin蛋白的陽性表達(dá)率高于Hp陰性組，Hp陽性胃癌組織中Survivin蛋白的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于Hp陰性者，提示Hp感染可促使胃癌組織Survivin蛋白的表達(dá)水平的增高。

綜上所述，病理上Survivin蛋白表達(dá)在胃癌中的發(fā)生發(fā)展中有著非常重要的意義，同時(shí)胃癌組織中Survivin蛋白的表達(dá)可因幽門螺桿菌感染而增強(qiáng)。

［1］趙君寧，張振玉，孫士其，等.Survivin在胃癌中的表達(dá)及其與COX-2相關(guān)性的研究.中國癌癥雜志，2004，14(1):15-18.

［2］李鳳朝，孔慶兗，楊雪梅.Survivin在胃癌中的表達(dá)及其與細(xì)胞凋亡、p53的關(guān)系.實(shí)用腫瘤學(xué)雜志，2004，18(6):451-453.

［3］呂曉君，吳東瑛，楊琳，等.胃癌前病變及胃癌組織中survivin和caspase-3蛋白表達(dá)的意義.世界華人消化雜志，2005，13(16):1951-1955.

［4］李美梁.胃鏡活檢標(biāo)本診斷胃癌的臨床病理分析.醫(yī)學(xué)信息，2010，23(3):765-766.

［5］Okada E，Murai K ，Isizawa S，et al.Survivin expression in tumor cell nuclei is predictive of a favorable prognosis in gastric cancer patients.Cancer Lett，2001，163(1):109-116.