抗環(huán)瓜氨酸抗體在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷中的臨床意義

張琳 王春燕

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是常見(jiàn)的以關(guān)節(jié)滑膜慢性炎癥病變?yōu)橹饕憩F(xiàn)的自身免疫性疾病，發(fā)病兩年內(nèi)出現(xiàn)不可逆的骨關(guān)節(jié)破壞，嚴(yán)重危害患者健康及降低生活質(zhì)量。近年來(lái)，在RA患者中發(fā)現(xiàn)了多種新的抗體，特別是環(huán)瓜氨酸肽(CCP)的自身抗體，因其在RA中的高度敏感性和特異性而倍受關(guān)注［1］。筆者應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELl-SA)，檢測(cè)53例RA患者血清中的抗環(huán)瓜氨酸肽(抗CCP)抗體，旨在探討其對(duì)RA的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 RA組53例，來(lái)自我院2007年6月至2008年3月風(fēng)濕病科門診、住院患者，以上患者符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)1987年修訂的RA診斷分類標(biāo)準(zhǔn)。其中男17例，女33例，年齡14～65歲，平均48.3歲。對(duì)照組42例，其中男13例，女29例，年齡14～70歲，平均51.2歲。包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)10例，原發(fā)性干燥綜合征7例，強(qiáng)直性脊柱炎8例，結(jié)締組織病8例，系統(tǒng)性硬化病3例，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎2例，多發(fā)性皮肌炎2例，骨關(guān)節(jié)炎l例，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎1例，診斷符合各自的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法 采集空腹靜脈血3 ml，分離血清，-20℃保存待測(cè)?？笴CP抗體檢測(cè)采用ELISA，試劑由歐蒙(德國(guó))醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司提供，檢測(cè)結(jié)果＞5 U/ml為陽(yáng)性。抽取靜脈血2 ml，離心分離血清，將待測(cè)血清用樣本緩沖液按1:100稀釋，加入已包被的微孔中，每孔100 μl，室溫孵育30 min，洗板3次后加人辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體100 μl，室溫孵育 30 min，洗板 3 次后加入底物 100 μl 30 min，最后加入終止液100 μl，酶標(biāo)儀上檢測(cè)，設(shè)定波長(zhǎng)為450 mn，每份樣本設(shè)立空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)76照及正常對(duì)照。類風(fēng)濕因子(rheumatoid factor，RF)采用Beckman Coulter公司的Immage特定蛋白分析儀及其配套試劑，使用免疫比濁法檢測(cè)RF水平，檢測(cè)結(jié)果＞20 U/ml判為陽(yáng)性。同時(shí)檢測(cè)RA患者血沉(ESR)、免疫球蛋白(Ig)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、血小板(PLT)等指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，多組樣本均數(shù)比較采用方差分析，兩變量之間的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

RA組血清抗CCP抗體陽(yáng)性率對(duì)RA診斷敏感性為56.6%，RF陽(yáng)性率對(duì)RA診斷敏感性為61.4%，兩者間差異無(wú)顯著性(P＞0.05);抗CCP抗體和RF對(duì)RA診斷的特異性分別為95.1%、71.4%，差異有顯著性(P＜0.05)。RA組血清抗CCP抗體陽(yáng)性率陽(yáng)性率56.6%明顯高于對(duì)照組2.1%，差異有顯著性(P＜0.05)。經(jīng)Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)抗CCP抗體與 ESR、CRP、RF間呈正相關(guān)(r=0.531、0.524、0.574，均 P ＜0.05)。

3 討論

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫性疾病，以滑膜的炎癥為基礎(chǔ)，呈慢性、進(jìn)行性、侵蝕性關(guān)節(jié)破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失。RA為常見(jiàn)風(fēng)濕免疫性疾病，可發(fā)生于任何年齡，在我國(guó)的發(fā)病率達(dá)0.32% ～0.36%。目前對(duì)于RA的診斷仍延用美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)(ACR)1987年修訂的RA分類標(biāo)準(zhǔn)，但該標(biāo)準(zhǔn)要求病程長(zhǎng)，關(guān)節(jié)X線損害明顯，血清學(xué)指標(biāo)僅有特異性相對(duì)較低的類風(fēng)濕因子(RF)，對(duì)于X線關(guān)節(jié)損害不典型及RF陰性RA患者早期診斷困難，失去最佳診治時(shí)機(jī)，如何早期及時(shí)診斷RA成為研究的重點(diǎn)。

研究發(fā)現(xiàn)瓜氨酸是RA血清抗聚絲蛋白相關(guān)抗體識(shí)別的主要抗原決定簇，并建立了以人T合成CCP為抗原的ELISA檢測(cè)法，也證明抗CCP抗體在診斷RA中有著較高的特異度。抗CCP抗體存在于早期的RA患者，且特異性高，與RF相比有較高的特異性［3］。對(duì)于 RF陰性的患者，抗CCP抗體也可以提供可靠的早期診斷依據(jù)。文獻(xiàn)報(bào)道抗CCP抗體與RA患者病情嚴(yán)重程度有關(guān)［4］。本研究顯示，RA患者的抗CCP抗體濃度明顯高于其他結(jié)締組織病和正常對(duì)照組，并且與某些炎癥指標(biāo)有相關(guān)性，如將抗CCP抗體與RF及抗角蛋白抗體等指標(biāo)結(jié)合起來(lái)將大大提高診斷RA的特異性，有助于RA的早期診斷，早期治療，最大程度的緩解病情，促進(jìn)康復(fù)，改善生活質(zhì)量。由于ELISA方法成熟、方便，可能在臨床上有廣泛的應(yīng)用前景。

本研究結(jié)果顯示，抗CCP抗體對(duì)RA的敏感性與RF相比較，其對(duì)RA診斷的敏感性差異無(wú)顯著性，而特異性明顯高于RF。提示在RA血清中存在特異性識(shí)別CCP的抗體，對(duì)RF診斷是一個(gè)非常有價(jià)值的臨床檢測(cè)指標(biāo)?？笴CP抗體除了對(duì)RA的診斷具有一定的價(jià)值外，其對(duì)于RA的早期診斷、病情活動(dòng)性及預(yù)后也有一定的價(jià)值。有研究表明，抗CCP抗體的出現(xiàn)先于RF，可用于對(duì)極早期滑膜炎的診斷研究。進(jìn)一步的研究表明:在RA患者，抗CCP抗體陽(yáng)性組和陰性組在晨僵時(shí)間、受累關(guān)節(jié)夜間痛發(fā)生率、關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)、X線病情分期、醫(yī)師和患者對(duì)病情活動(dòng)性的評(píng)分、IgG、ESR和CRP水平差異均有顯著性［5］。有研究人員對(duì)RA患者的影像學(xué)評(píng)分進(jìn)行連續(xù)觀察，發(fā)現(xiàn)抗CCP抗體陽(yáng)性者的骨破壞較抗體陰性者嚴(yán)重，提示抗CCP與RA病情嚴(yán)重程度及其發(fā)展有關(guān)。

［1］姜東林，孫鈞銘，姜升陽(yáng)，等.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者抗MCV、抗CCP抗體與RF診斷價(jià)值比較.臨床檢驗(yàn)雜志，2009，27(2):137-138.

［2］Habib HM，Mosaad YM.Youssef HM.Anti.cyclic citrullinated peptide antibodies in patients with juvenile idiopathic arthritis.Immunol Invest.2008，37(8):849-857.

［3］彭曉冬.李夔新，白楊娟，等.抗CCP抗體、AKA及RF對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值.四川大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，37(2):317-318.

［4］Fabien N.Goetz J，Sordet C，et al.New autoanti-bodiesinrheumstoid arthritis:anti-citmllinated protein or peptide autoanti-bodies and the others.Pressc Med，2008，1(1):20.

［5］Mortia Y，Muro Y，Sugiura K，et al.Anti-cyclic citrullinated peptide antibody in systemic sclerosis.Clin Exp Rheumatol，2008，26(4):542-547.