氣相色譜質(zhì)譜法檢測(cè)蔬菜中多效唑的殘留

呂 燕，趙 健，楊 挺，王立君

（農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，浙江 寧波 315040）

1 引 言

多效唑（Paclobutrazol）是三唑類植物生長(zhǎng)延緩劑，廣泛應(yīng)用于蔬菜生產(chǎn)中，具有延緩植物生長(zhǎng)、抑制莖枝伸長(zhǎng)、促進(jìn)分蘗、促進(jìn)成花和座果、增強(qiáng)抗旱及抗寒性、提高耐鹽性和延緩植物衰老等多種效應(yīng)[1-7]?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有水果[8-9]、糧谷[10]等多效唑的檢測(cè)方法，而蔬菜中殘留的檢測(cè)方法仍少見，用氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定蔬菜中多效唑殘留量的方法卻未見報(bào)道。該文采用乙腈作為提取液，通過(guò)對(duì)弗羅里硅土凈化柱洗脫行為的優(yōu)化，建立了用氣相色譜-質(zhì)譜選擇離子方式測(cè)定蔬菜中多效唑的方法，該方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 試劑與材料

丙酮（色譜純），正己烷（色譜純），氯化鈉（分析純），乙腈（分析純），固相萃取柱（弗羅里硅土，1 g/6 mL），多效唑標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.0%Dr.Ehrenst orfer GmbH）。

淋洗液：取5mL丙酮，用正己烷稀釋至100mL；

洗脫液：取15 mL丙酮，用正己烷稀釋至100mL。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和工作液的配制

多效唑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：用少量丙酮溶解，正己烷定容，配制成1000mg/L，再于4℃冰箱中冷藏保存，有效期3個(gè)月。

標(biāo)準(zhǔn)工作液：將儲(chǔ)備液用正己烷稀釋成濃度為0.050～1.0mg/L標(biāo)準(zhǔn)工作液。

2.3 儀器與設(shè)備

Agilent 6890N GC/5973 MS氣質(zhì)聯(lián)用儀（配備電子轟擊離子源（EI））；梅特勒-托利多AX205型精密分析電子天平，感量0.01 mg；梅特勒-托利多PL3002型電子天平，感量0.01g；BUCHI V850型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；德國(guó)IKA T25型勻漿機(jī)；高速冷凍離心機(jī)（SIGMA 3K15）；固相萃取儀（Supeclo）。

2.4 實(shí)驗(yàn)步驟

2.4.1 提取

準(zhǔn)確稱取25.00 g勻漿后的抽取樣品，置于250mL勻漿瓶中，加入50.0mL乙腈，10000r/min勻漿2 min后靜置10 min，用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有10 g氯化鈉的100 mL具賽量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上蓋子劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30min，使乙腈相和水相分層。

2.4.2 凈化

從100 mL具塞量筒中吸取乙腈相10.00 mL至250mL燒杯中，燒杯在70℃水浴鍋上加熱，杯中緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)猓舭l(fā)近干，加入2.0mL淋洗液溶解，待凈化。

將弗羅里硅土固相萃取小柱，用5.0 mL正己烷預(yù)處理，活化，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即倒入上述待凈化溶液，用10.0mL淋洗液淋洗棄去全部流出液，然后用30.0mL洗脫液洗脫，收集洗脫液于50 mL濃縮瓶中，將盛有洗脫液的濃縮瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在40℃水浴條件下，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，殘?jiān)谜和槿芙獠⒍ㄈ葜?.0mL，待測(cè)定。

2.5 添加回收率實(shí)驗(yàn)

設(shè)添加水平為 0.040 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，并設(shè)空白對(duì)照，重復(fù)5次，處理同“2.4”。

2.6 儀器參數(shù)與測(cè)定條件

2.6.1 氣相色譜部分

HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱：30m×0.25mm（i.d.），0.25 μm；程序升溫：起始溫度 100℃，以 20℃/min升溫至220℃，再以5℃/min升溫至250保持8 min；進(jìn)樣口溫度：280℃；傳輸線溫度：280℃；進(jìn)樣模式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1μL；載氣流速：1.1mL/min。

2.6.2 質(zhì)譜部分

四極桿溫度：150℃；離子源溫度：230℃；電子能量：70eV。數(shù)據(jù)采集方式：選擇離子監(jiān)測(cè)方式（SIM），監(jiān)測(cè)離子 125，167，236。

3 結(jié)果與討論

3.1 實(shí)驗(yàn)條件選擇

3.1.1 提取劑的選擇

分別選用丙酮、乙腈、乙酸乙酯、丙酮-乙酸乙酯提取樣品中的多效唑，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，單獨(dú)用丙酮作為提取溶劑，提取液濃縮后溶液的粘稠度高，使凈化工作無(wú)法進(jìn)行；用乙酸乙酯或丙酮-乙酸乙酯進(jìn)行提取，雖然不影響凈化，但是提取效率低；選用乙腈作為提取溶劑，樣品回收率在85%以上，故選用乙腈作為提取溶劑。

3.1.2 洗脫劑的選擇

分別用正己烷、5%丙酮-正己烷、10%丙酮-正己烷、15%丙酮-正己烷、30%丙酮-正己烷進(jìn)行洗脫實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，用正己烷和5%丙酮-正己烷作為洗脫劑時(shí)，多效唑不能被洗脫下來(lái)；選用10%丙酮-正己烷多效唑可被洗脫下來(lái)，但定量回收所需溶劑多；采用15%丙酮-正己烷和30%丙酮-正己烷溶液均可只用少量洗脫劑定量洗脫組分，但后者同時(shí)使大量的雜質(zhì)洗脫下來(lái)。故選用10mL 5%丙酮-正己烷淋洗，用15%丙酮-正己烷洗脫收集，洗脫溶劑用量少，樣品也得到了較好的凈化。

3.2 線性范圍與檢測(cè)限

取多效唑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用正己烷稀釋配置成濃度為 0.050 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.0 mg/L系列標(biāo)準(zhǔn)工作液液，按2.5儀器條件測(cè)定，獲得不同濃度的多效唑響應(yīng)峰面積，以定量離子的峰面積（Y）對(duì)相應(yīng)多效唑標(biāo)液質(zhì)量濃度（X）作線性回歸，結(jié)果表明多效唑在0.050～1.0mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其回歸方程為Y=5.71×105X-7.58×103（R2為0.9998）。通過(guò)計(jì)算空白樣品信噪比S/N=3獲得該方法檢出限為量0.01mg/kg。圖1～圖5為標(biāo)準(zhǔn)溶液、空白樣品和添加樣品的總離子流圖和質(zhì)譜圖。

3.3 準(zhǔn)確度和精密度

在未檢出多效唑的白菜和黃瓜樣品中分別添加3個(gè)不同含量水平的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液，渦旋混合2 min，靜置30 min，使添加濃度分別為0.040 mg/kg，0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，每個(gè)水平做5次平行實(shí)驗(yàn)，按照2.4處理后進(jìn)樣，計(jì)算加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），結(jié)果見表1。此結(jié)果回收率良好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%，符合農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。

對(duì)于實(shí)際樣品，白菜和黃瓜中多效唑的最低檢出濃度為0.01mg/kg。

4 結(jié)束語(yǔ)

實(shí)驗(yàn)以乙腈高速勻漿提取，再經(jīng)弗羅里硅土固相萃取小柱凈化，建立了蔬菜中多效唑殘留量的氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)方法，該方法靈敏度高，選擇性好，通過(guò)選擇離子的相對(duì)豐度，可以對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行確證。經(jīng)考察，該方法在選定的濃度范圍內(nèi)，多效唑回收率高，測(cè)定精密度好。

表1 蔬菜中多效唑的添加回收率

目前，我國(guó)規(guī)定了花生中多效唑的最大殘留限量值為0.5mg/kg[11]，但尚未制定白菜和黃瓜中多效唑的最大殘留限量值，而日本肯定列表中未見白菜和黃瓜的最大殘留限量，所以兩種蔬菜中多效唑最大殘留限量歸為“一律標(biāo)準(zhǔn)”，即為0.01 mg/kg。該研究方法符合殘留分析試驗(yàn)要求，能夠用于檢測(cè)蔬菜中多效唑的農(nóng)藥殘留。

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