火焰原子吸收分光光度法測(cè)定透析液中K+、Na+、Ca2+、Mg2+ 離子的含量

張成 黎雋 陜西省醫(yī)療器械檢測(cè)中心 (西安 710061)

血液透析是在血液與透析液間放置一透析膜，通過(guò)彌散、對(duì)流等物理過(guò)程清除患者血液中的代謝廢物和向患者體內(nèi)補(bǔ)充溶質(zhì)的方法。一般透析液是由透析濃縮液或干粉按指定比例用透析用水稀釋配制而成，其成分與人體內(nèi)環(huán)境成分相似，主要有K+、Na+、Ca2+、Mg2+四種陽(yáng)離子，Cl和堿基兩種陰離子，部分透析液中還含有葡萄糖[1]。

國(guó)內(nèi)目前對(duì)于透析液中K+、Na+、Ca2+、Mg2+含量的測(cè)定方法尚未統(tǒng)一，對(duì)于Ca2+、Mg2+的測(cè)定多采用經(jīng)典的EDTA滴定方法。該方法比較成熟，已被我國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[2]指定為仲裁檢驗(yàn)方法。但是存在絡(luò)合反應(yīng)速度較慢，滴定終點(diǎn)不易判斷的缺點(diǎn)。對(duì)于K+、Na+的測(cè)定我國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[2]采用火焰發(fā)射光譜法和離子色譜法，并將火焰發(fā)射光譜法指定為仲裁檢驗(yàn)方法?？紤]到該方法干擾大、不穩(wěn)定的缺點(diǎn)，我們選擇了火焰原子吸收分光光度法測(cè)定透析液中的K+、Na+、Ca2+、Mg2+的含量。我們通過(guò)建立科學(xué)有效的配液方法、優(yōu)化儀器工作條件，確定供試液合適的稀釋比例，實(shí)現(xiàn)了在同一份供試液中同時(shí)測(cè)定K+、Na+、Ca2+、Mg2+的含量，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作，提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

1 儀器與試藥

美國(guó)熱電公司S2AA型原子吸收分光光度計(jì)；K、Na、Ca、Mg空心陰極燈(北京浩天暉科貿(mào)有限公司)；SIMS50000個(gè)人型純水機(jī)(美國(guó)MILLIPORE)。

K單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/mL，批號(hào)：GBW(E)0801257071；Na單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/mL，批號(hào)：GBW(E)0801278071；Ca單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL，批號(hào)： GBW (E)0801187093；Mg單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/mL，批號(hào)： GBW (E) 0801267041；以上標(biāo)準(zhǔn)溶液均為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供；鹽酸(優(yōu)級(jí)純)。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器工作條件

表1 原子吸收分光光度計(jì)工作條件

2.2 供試品溶液的制備

2.2.1 透析濃縮液的配制

取透析干粉(A粉、B粉)各一個(gè)獨(dú)立包裝，按照產(chǎn)品使用說(shuō)明的要求加適量超純水溶解至規(guī)定體積，即得到透析濃縮A液、B液。

2.2.2 最終透析液的配制

按照使用說(shuō)明書(shū)中A液、B液和超純水的比例，計(jì)算出應(yīng)移至500mL容量瓶中的A液、B液和超純水的體積，然后精密移取A液至容量瓶中，用適量超純水稀釋后再精確加入B液，最終加超純水稀釋至刻度。

2.2.3 供試品溶液的制備

再精密量取最終透析液2ml，加超純水稀釋至100ml量瓶中，搖勻，即得。

2.3 對(duì)照品溶液的制備

K、Ca、Mg單元素中間標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：用移液管分別移取K、Ca、Mg單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液各10mL于3個(gè)100mL容量瓶中，加超純水稀釋至刻度，搖勻后，立即轉(zhuǎn)移至聚乙烯瓶中備用。

2.4 線性關(guān)系考察

分別精密量取一定量1000μg/mL的Na單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液、100μg/mL的K、Ca、Mg單元素中間標(biāo)準(zhǔn)溶液于100mL容量瓶中，加入2.5mL鹽酸，加超純水稀釋至刻度，搖勻后立即轉(zhuǎn)移至聚乙烯瓶中。在選定的儀器工作條件下，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中各元素在其選定波長(zhǎng)處的吸光度，分別以各元素的吸光度為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)濃度為橫坐標(biāo)，繪制K、Na、Ca、Mg的工作曲線，計(jì)算回歸方程見(jiàn)表2。

表2 4種元素的線性關(guān)系

2.5 精密度試驗(yàn)

取批號(hào)090340供試品溶液，按上述條件重復(fù)測(cè)定6次，測(cè)定吸光度，計(jì)算得K+、Na+、Ca2+、Mg2+的RSD分別為1.2%、2.3%、2.7%、2.6%，表明儀器精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取批號(hào)090340供試品溶液，按上述條件分別于0，1，2，3，4，5h測(cè)定吸光度，計(jì)算得 K+、Na+、Ca2+、Mg2+的RSD分別為1.1%、2.6%、1.9%、2.8%。表明供試品溶液在5h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

取批號(hào)090340供試品溶液，按上述條件試驗(yàn)，測(cè)定，平行試驗(yàn)6份，計(jì)算得K+、Na+、Ca2+、Mg2+的RSD分別為1.2%、1.5%、2.7%、1.4%，表明重復(fù)性良好。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)

取批號(hào)090340最終透析液1ml，置100ml聚四氟乙烯容量瓶中，分別精密加入K、Na、Ca、Mg單元素標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，加超純水稀釋至刻度，搖勻后立即轉(zhuǎn)移至聚乙烯瓶中，測(cè)定，平行試驗(yàn)6份，計(jì)算回收率，K+、Na+、Ca2+、Mg2+的平均回收率分別為：102.8%、97.1%、101.2%、108.3%。RSD分別為1.5%、2.3%、2.6%、2.5%。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 樣品測(cè)定

取3批供試液，每批2份，按上述條件試驗(yàn)，測(cè)定，計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 3批不同透析液中元素測(cè)定結(jié)果

4 討論

由于各透析粉生產(chǎn)企業(yè)對(duì)干粉中各組分的混合工藝不同，導(dǎo)致了干粉中各組分的均勻程度不同，因此透析干粉的充分溶解和濃縮液的準(zhǔn)確定容將直接影響到溶質(zhì)濃度測(cè)定的準(zhǔn)確性。與臨床使用中采用透析機(jī)(濃縮液泵)配制透析液相比，實(shí)驗(yàn)室配液不易控制。應(yīng)注意對(duì)于B粉(主要成分為碳酸氫鈉)，溶解時(shí)應(yīng)控制溫度，通常在40℃左右時(shí)，有利于干粉的溶解；溫度過(guò)高，則會(huì)導(dǎo)致碳酸氫鹽的分解。其次在將配制好的濃縮液(A、B)與超純水混合配制最終透析液的過(guò)程中，應(yīng)先將超純水與含有K+、Na+、Ca2+、Mg2+的酸性濃縮液(A液)混合，pH值在2.7以下，再與碳酸氫鹽濃縮液(B液)混合，pH值達(dá)7.4左右，這樣可以減少Ca2+、Mg2+離子與堿基反應(yīng)析出沉淀的機(jī)會(huì)。

[1]梅長(zhǎng)林等主編.實(shí)用透析手冊(cè).北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2003

[2]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局YY0598-2006 血液透析及相關(guān)治療用濃縮物

[3]國(guó)家藥典委員會(huì)，中華人民共和國(guó)藥典。2005年版二部；化學(xué)工業(yè)出版社，2005，附錄ⅣD