子宮內(nèi)膜異位癥大鼠妊娠、哺乳期異位內(nèi)膜的觀察*

冉青珍，何彥麗，陳萬(wàn)群

(廣州中醫(yī)藥大學(xué)1第二臨床醫(yī)學(xué)院婦科，2病理教研室，廣東 廣州 510120;3暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)系，廣東 廣州 510632)

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EM)是婦科的常見病。自體移植法子宮內(nèi)膜異位癥動(dòng)物模型是傳統(tǒng)的子宮內(nèi)膜異位癥實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，理論上模擬了異位病灶侵襲生長(zhǎng)的特點(diǎn)，至今仍被廣泛延用。本研究對(duì)自體移植法大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型妊娠、哺乳期在位、異位內(nèi)膜病理狀態(tài)進(jìn)行比較研究，以進(jìn)一步分析該模型是否能代表子宮內(nèi)膜異位癥患者所表現(xiàn)病理生理特征。

材料和方法

1 動(dòng)物

SPF級(jí)雌性成熟未交配過(guò)的 SD大鼠16只，體重180－220 g，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)為SYXK粵2006－0074。

2 造模方法

子宮內(nèi)膜異位癥大鼠造模方法參照文獻(xiàn)[1]，制備自體移植法子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型，移植物種植在腹壁上，左右各一。4周后隨機(jī)取2只大鼠剖腹驗(yàn)證造模成功。

3 觀測(cè)指標(biāo)

模型大鼠以雌雄比例2∶1與有生育能力的雄鼠夜間同籠，每天清晨陰道細(xì)胞涂片，以發(fā)現(xiàn)精子當(dāng)天定為“孕鼠”及“妊娠”第1 d，分籠飼養(yǎng)，直至所有雌鼠“受孕”。“孕鼠”等比隨機(jī)分為2組，第1組于“孕”第12 d處死，觀察異位病灶生長(zhǎng)情況，剝?nèi)≡谖患爱愇蛔訉m內(nèi)膜組織，甲醛固定，行石蠟病理切片。第2組留待自然分娩、哺乳20 d后處死，觀察異位病灶生長(zhǎng)情況，剝?nèi)≡谖患爱愇粌?nèi)膜組織，同法固定、切片。

結(jié) 果

1 動(dòng)物情況

第1組“孕鼠”中2只未受孕。第2組繼續(xù)喂養(yǎng)后6只自然分娩，1只最終證實(shí)未受孕。

2 子宮內(nèi)膜異位癥大鼠妊娠12 d在位、異位內(nèi)膜比較

Figure1.The eutopic endometrium of the endometriosis rats at 12 d pregnancy(×200).A:endometrium appeared A－S reaction;B:a lot of deciduas and decidual vasculars were seen，secretions were rich and some decidual giant cells could be seen.圖1 妊娠12 d的子宮內(nèi)膜異位癥大鼠在位子宮內(nèi)膜

2.1 子宮內(nèi)膜異位癥大鼠妊娠12 d的在位內(nèi)膜符合妊娠期改變，子宮內(nèi)膜出現(xiàn)A－S反應(yīng)，見大量蛻膜組織及扁平裂隙狀腺體，蛻膜血管豐富，分泌旺盛，可見蛻膜巨細(xì)胞，見圖1。

2.2 子宮內(nèi)膜異位癥大鼠妊娠12 d的異位內(nèi)膜呈分泌期改變，同只大鼠異位內(nèi)膜與在位內(nèi)膜比較未見明顯蛻膜樣改變，間質(zhì)細(xì)胞減少、間質(zhì)水腫及少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，內(nèi)膜上皮細(xì)胞呈矮柱狀或扁平，具有不同程度的分泌現(xiàn)象，未見明顯的A－S反應(yīng)，見圖2。

Figure2.The ectopic endometrium of the endometriosis rats at 12 d pregnancy(×200)).A:epithelial cells showed low columnar，no significant decidual－ like stromal changes were seen，fewer cells were seen and these cells accompanied with edema and a small amount of inflammatory cells;B:epithelial cells were flat and no obvious A －S reactions were found.圖2 妊娠12 d的子宮內(nèi)膜異位癥大鼠異位子宮內(nèi)膜

3 子宮內(nèi)膜異位癥大鼠哺乳期在位、異位內(nèi)膜比較

哺乳期的子宮內(nèi)膜異位癥大鼠在位子宮內(nèi)膜呈增生期改變:子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞呈矮柱狀，腺體稀少，腔小而圓。間質(zhì)致密。哺乳期的子宮內(nèi)膜異位癥大鼠異位子宮內(nèi)膜與同只大鼠的在位子宮內(nèi)膜比較發(fā)育較遲，呈早期增生期改變，伴變性壞死。腺體更加稀少，腺上皮細(xì)胞可見核周空泡，間質(zhì)細(xì)胞排列疏松，呈星狀，胞漿少，間質(zhì)中可見炎癥反應(yīng)，血管少，見圖3。

Figure3.The eutopic and ectopic endometrium of the endometriosis rats at lactation(×200).A:the eutopic endometrium appeared early proliferative changes;B:the ectopic endometrium with fewer glands and perinuclear vacuolization in glandular epithelial cells.圖3 哺乳期的子宮內(nèi)膜異位癥大鼠在位及異位子宮內(nèi)膜

討 論

近年來(lái)關(guān)于人類子宮內(nèi)膜異位癥患者異位內(nèi)膜與在位內(nèi)膜分子生物學(xué)上差異的報(bào)道非常廣泛。如有研究表明異位內(nèi)膜組織中孕激素受體亞型PR2 A和(或)PR2B的表達(dá)較正常內(nèi)膜減弱且周期性變化紊亂，表明異位內(nèi)膜對(duì)激素調(diào)節(jié)的反應(yīng)性不如在位內(nèi)膜好[2，3]。

子宮內(nèi)膜異位癥大鼠妊娠期的在位子宮內(nèi)膜呈現(xiàn)蛻膜樣反應(yīng)及A－S反應(yīng)，是孕激素及絨毛膜促性腺激素過(guò)度刺激的結(jié)果。然而異位的子宮內(nèi)膜卻未能呈現(xiàn)同步反應(yīng)，僅僅表現(xiàn)為孕激素作用下的分泌期改變。哺乳期大鼠尚未恢復(fù)正常的動(dòng)情周期，在位子宮內(nèi)膜處于增生期改變，在同樣的激素水平作用下，異位的子宮內(nèi)膜發(fā)育較在位子宮內(nèi)膜遲，而且在經(jīng)過(guò)了一個(gè)完整的妊娠期及哺乳期后，異位的子宮內(nèi)膜呈現(xiàn)出了壞死的趨勢(shì)。

妊娠或哺乳期閉經(jīng)對(duì)內(nèi)膜異位癥病情具有抑制作用，可視為內(nèi)膜異位癥的自然療法[4]。但卻不能解釋，為什么正常的子宮內(nèi)膜在經(jīng)過(guò)妊娠哺乳之后可以恢復(fù)月經(jīng)周期改變，而異位的子宮內(nèi)膜卻有可能在妊娠及哺乳期結(jié)束后枯萎。本實(shí)驗(yàn)完整地監(jiān)測(cè)到了這一過(guò)程，也印證了這一理論。我們認(rèn)為，由于生長(zhǎng)環(huán)境的差異，異位的子宮內(nèi)膜對(duì)相應(yīng)內(nèi)分泌狀態(tài)的反應(yīng)不如在位子宮內(nèi)膜敏感，正是這種差別，造成妊娠、哺乳之后異位子宮內(nèi)膜的枯萎。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了妊娠、哺乳期閉經(jīng)對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的治療意義。

[1]冉青珍，司徒儀，杜標(biāo)炎.自體移植法復(fù)制大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型[J].中國(guó)病理生理雜志，2004，20(8):l534－1536.

[2]Misao R，Nakanishi Y，F(xiàn)ujimoto J，et al.Expression of sex hormone－binding globulin exon VII splicing variant messenger ribonucleic acid in human ovarian endometriosis[J].Fertil Steril，1998，69(2):324 －328.

[3]Mylonas I，Jeschke U，Shabani N，et al.Immunohistochemical analysis of estrogen receptor alpha，estrogen receptor beta and progesterone receptor in normal human endometrium[J].Acta Histochem，2004，106(3):245－252.

[4]董桂蘋.子宮內(nèi)膜異位癥的病因與治療進(jìn)展[J].中國(guó)婦幼保健，2008，23(25):3634－3637.