黃芪多糖對小鼠免疫功能影響的實驗研究

高 旭，李麗芬，劉斌鈺

(山西大同大學醫(yī)學院，山西 大同 037009)

黃芪為一種扶正固本的臨床常用中藥,中國藥典規(guī)定,藥用黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根.黃芪味甘、性溫，有補氣升陽、固表止汗、脫毒排膿和生肌等功效[1].近年來研究發(fā)現(xiàn)，黃芪中除黃芪甲甙、黃酮等小分子化合物具有較強的生物活性外，大分子化合物如黃芪多糖 (Astrgalus Polysaccharides APS)也同樣具有多方面的活性，其利用價值日益受到重視.黃芪多糖是一種具有代表性的大分子多糖，由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等組成.現(xiàn)代藥理學研究表明，黃芪多糖能增加超氧化物歧化酶(SOD)活性、降低丙二醛(MDA)含量，具有延緩衰老[2]、雙向調節(jié)血糖、保護腎臟[3-5]、增強耐力[6]減輕心肌損傷[7]等作用，本實驗旨在探討黃芪多糖對小鼠免疫功能及血常規(guī)的影響,為臨床應用提供理論基礎和實驗依據.

1 材料

1.1 試驗藥物

黃芪多糖購于陜西寶雞方晟生物開發(fā)有限公司，用前配成所需濃度.

1.2 動物

昆明種小白鼠，♀♂皆用，由山西大同大學動物室提供.

2 方法

2.1 黃芪多糖對小白鼠生長情況及對血常規(guī)的影響

實驗取體重20 g左右小白鼠30只，隨機分為3組，黃芪多糖大、小劑量組和生理鹽水組，黃芪多糖大、小劑量組分別灌胃黃芪多糖150 mg·kg-1.d-1，50 mg·kg-1·d-1，對照組灌胃等劑量的生理鹽水，連續(xù)7 d.在末次給藥后2 h從小鼠尾部取血檢測血常規(guī).實驗參照文獻[8]進行.

2.2 黃芪多糖對小白鼠免疫器官重量的影響

實驗取體重10～12 g幼鼠30只，隨機分為3組，黃芪多糖大、小劑量組和對照組(簡稱A、B、C組)，給藥劑量同上，連續(xù)10 d，在末次給藥后2 h處死小鼠，分別稱取體重、胸腺和脾臟的質量，以胸腺、脾臟的質量(mg)與體質量(g)之比作為胸腺、脾臟的指數(shù).實驗參照文獻[9]進行.

2.3 黃芪多糖對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響

實驗取體重22～24 g小白鼠30只，隨機分為3組，黃芪多糖大、小劑量組和生理鹽水組，給藥劑量同上，連續(xù)7 d.在末次給藥后1 h每只小鼠腹腔注射5%的可溶性滅菌淀粉1 mL，24 h后再次腹腔注射5% 雞紅細胞生理鹽水懸液0.5 mL，30 min后處死動物，打開腹腔作腹腔液涂片，“瑞氏”染液染色，鏡下觀察并計算巨噬細胞吞噬百分率及吞噬指數(shù)[10].

吞噬百分率=具有吞噬能力的巨噬細胞數(shù)/巨噬細胞觀察數(shù)×100%

吞噬指數(shù)=吞噬的雞紅細胞總數(shù)/巨噬細胞觀察數(shù)×100%

2.4 統(tǒng)計學處理

3 結果

3.1 肉眼觀察動物生長情況及對血常規(guī)的影響

服用黃芪多糖組小鼠(A、B組)比對照組(C組)小鼠個頭大、粗壯，毛順而光亮，非常活潑，體格健壯，活動度與進食增加，血常規(guī)及血紅蛋白檢測結果見表1.

表1 黃芪多糖對小白鼠血常規(guī)和血紅蛋白的影響n=10()

表1 黃芪多糖對小白鼠血常規(guī)和血紅蛋白的影響n=10()

注：與對照組相比 *P ＜ 0.05，**P ＜ 0.01

組別 RBC/(1012·L-1) Hb/(g·L-1) WBC/(109·L-1) LC/% 中性粒細胞/% 單核細胞/%A 組 7.39±0.46** 138±12 1.73±0.41** 74.1±7.9** 35±8.3 0.8±0.3 B 組 7.14±0.52* 131±15 1.55±0.37* 71.5±6.8* 32±7.5 0.7±0.6 C 組 6.58±0.34 127±14 1.08±0.34 62.3±7.4 34±8.9 0.9±0.5

從表1可見，黃芪多糖可以使紅細胞、白細胞和淋巴細胞增加，與對照組比較有顯著性差異，血紅蛋白、中性粒細胞及單核細胞與對照組比較無顯著性差異.

3.2 黃芪多糖對小白鼠免疫器官重量的影響

實驗計算幼鼠的胸腺和脾臟的指數(shù)，結果見表2.

表2 黃芪多糖對小白鼠免疫器官重量的影響(n=10)

從表2可見黃芪多糖能促進正常小鼠胸腺和脾臟重量的增加，經單因素方差分析，與對照組比較有顯著性差異.

3.3 黃芪多糖對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響

實驗分組與給藥劑量同上，連續(xù)7 d，常規(guī)染色，鏡下觀察，結果見表3、圖1，均為HE染色×400倍.

表3 黃芪多糖對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響(n=10)

從表3可見，黃芪多糖能增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬百分率，并且使吞噬指數(shù)提高，黃芪多糖大劑量組的作用明顯強于小劑量組.經單因素方差分析，組間比較，黃芪多糖大、小劑量組與對照組比較有顯著性差異.從圖1可見，對照組的巨噬細胞吞噬的雞紅細胞很少，而黃芪多糖大、小劑量組的巨噬細胞吞噬的雞紅細胞很多.

圖1 黃芪多糖對小白鼠巨噬細胞吞噬的雞紅細胞的影響

4 討論

30多年前，人們對中草藥免疫藥理進行研究時發(fā)現(xiàn)，許多補益類中藥的活性成分是以多糖的形式存在.大量的實驗研究證明多糖對機體特異性免疫與非特異性免疫、細胞免疫與體液免疫有廣泛的影響[11].多糖可分為植物性多糖、動物性多糖、微生物多糖和海藻多糖四類.黃芪多糖屬于植物性多糖.

目前認為，中藥及中藥提取物本身并沒有抗菌或抗病毒的作用，而是通過提高機體免疫力，從而起到增強機體抗炎和抗病毒的效應.由于體內的免疫細胞大多分布在胸腺和脾臟中，所以胸腺和脾臟是動物的重要免疫器官.一般胸腺在動物生長到一定時候就萎縮了，所以必須選擇幼鼠來觀察胸腺，胸腺的免疫功能主要是誘導T細胞的分化和成熟，輔助T細胞產生抗體；動物成熟后脾臟就成為其最大的免疫器官，內含大量的免疫細胞，其中T淋巴細胞約占40%左右，B淋巴細胞約占60%左右，在體液免疫中的地位極其重要[12].因此研究黃芪多糖對機體免疫器官的作用是研究多糖免疫調節(jié)作用的一個重要方面.胸腺和脾臟與免疫的產生密切相關，若指數(shù)都增加，說明對細胞免疫和體液免疫都有促進作用，相對地表明機體免疫功能增強.因此測定動物胸腺和脾臟重量指數(shù)能反映機體免疫力.巨噬細胞是一種非特異性免疫細胞，它能吞噬和消滅外來異物和自身死亡細胞.小鼠黃芪多糖灌胃10 d后，紅細胞、白細胞、淋巴細胞、吞噬率和吞噬指數(shù)與對照組比較均有顯著性差異.由此表明黃芪多糖能明顯提高巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬率和吞噬指數(shù).

已知機體的衰老不僅出現(xiàn)易疲勞、免疫功能低下的反應，而且還伴有外觀行為的變化，從而出現(xiàn)了臨床年邁體衰病多的現(xiàn)象.如果設法增強機體的免疫功能、應激能力和耐力，將有助于延緩衰老過程和老年病的防治.隨著對祖國傳統(tǒng)醫(yī)學研究的不斷深入，越來越多的中草藥及中草藥提取物的應用得到了大家的重視，特別是中藥多糖的應用，必將在醫(yī)療方面為人民提供新的視野和方法.

綜上所述，黃芪多糖能提高小鼠紅細胞、白細胞和淋巴細胞數(shù)量，促進正常小鼠胸腺和脾臟重量的增加，增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬百分率，并且使吞噬指數(shù)提高.本實驗揭示黃芪多糖延緩衰老的作用可能是通過增強機體免疫功能來實現(xiàn)的.

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