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    乙型肝炎病毒外膜大蛋白檢測的臨床應用

    2010-07-19 12:22:30陳惠文劉壬通羅宜招賀勇鋒
    中國醫(yī)藥指南 2010年22期
    關(guān)鍵詞:乙型肝炎陽性率陰性

    陳惠文 劉壬通 羅宜招 賀勇鋒

    1 廣東省惠東縣婦幼保健院(516300)

    2 廣東省惠東縣人民醫(yī)院(516300)

    乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)感染是全球健康性問題,其中慢性HBV感染者約占世界的1/3[1]。臨床應用上主要以肝功能是否得到改善,HBeAg和HBV DNA是否轉(zhuǎn)陰作為乙型肝炎病毒復制與抗病毒療效的監(jiān)測的指標,在不具備實驗室條件時,對HBV感染者的評估存在一定的局限。我們對147例患者同時進行ELISA方法檢測乙型肝炎病毒外膜大蛋白(hepatitis B Virus Large Surface Protein,LHBs)、實時熒光法檢測HBV DNA ,對結(jié)果進行統(tǒng)計學分析,探討慢性乙型肝炎患者血清中LHBs與HBVDNA的關(guān)系。探討LHBs檢測作為反映乙型肝炎患者體內(nèi)病毒的復制情況的評估指標。

    表1 不同乙型肝炎標志物模式LHBs、HBV DNA陽性率比較

    1 材料與方法

    1.1 對象

    147例乙型肝炎患者血清HBsAg均陽性,年齡14~55歲,病程2~5年。診斷均符合第十次全國病毒性肝炎及肝病學術(shù)會議修訂的《病毒性肝炎防治方案》[2],排除了其他類型的肝炎、失代償期肝硬化、糖尿病、結(jié)核病等慢性疾病。

    1.2 儀器與試劑

    HBV DNA用實時熒光定量分析法進行檢測,HBV DNA<1.0×103copy/L為陰性,儀器用杭州博日BIORE line-gene,試劑由中山大學達安基因生物公司生產(chǎn)。LHBs用ELISA方法檢測,試劑購自北京熱景生物技術(shù)有限公司。

    2 結(jié) 果

    2.1 LHBs與HBV DNA結(jié)果表明,在相同乙型肝炎模式中,LHBs與HBV DNA結(jié)果陽性率經(jīng)χ2檢驗差異無顯著性(均P>0.05),見表1。

    2.2 HBeAg陽性和陰性血清LHBs、HBV DNA的檢出情況比較 在HBeAg陽性血清中LHBs和HBV DNA的陽性率明顯高于HBeAg陰性組,經(jīng)χ2檢驗有顯著性差異(P<0.05),見表2。

    3 討 論

    討論LHBs是HBV的包膜蛋白,包括HBsAg與前S蛋白(PreS1 蛋白和PreS2蛋白)。近年研究表明,LHBs與病毒侵入、組裝和復制等密切相關(guān),能反映患者機體內(nèi)HBV復制情況。研究鴨乙型肝炎動物模型發(fā)現(xiàn)含有嗜肝病毒血清的感染性不僅依賴于具有感染性的Danc顆粒的多少,還依賴缺乏葉酸的亞病毒顆粒的數(shù)量[3]。國內(nèi)外研究表明,LHBs是導致肝細胞病變及凋亡的主要原因[4]。這個結(jié)果表明,LHBs可用于觀察臨床療效和估計預后。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),對147例慢性乙型肝炎患者中血清LHBs與HBV DNA檢測,LHBs陽性結(jié)果與HBV DNA陽性結(jié)果無顯著性差異(P>0.05),LHBs在一定程度上可作為HBV復制的指標。表2結(jié)果中有7例HBV DNA陰性的標本LHBs檢測為陽性,可能是新的HBV突變株引起,導致PCR引物存在漏檢,或者存在HBV DNA檢測的方法學與靈敏度缺陷,導致低水平的HBV DNA漏檢。結(jié)果表明,乙型肝炎患者HBV DNA結(jié)果陰性而LHBs結(jié)果陽性,可能是肝內(nèi)病毒繼續(xù)復制或抗病毒治療不徹底的現(xiàn)象。同時,血清LHBs與HBV DNA陽性率也具有一致性,LHBs可作為HBV病毒復制及療效監(jiān)測的指標。

    表2 HbeAg陽性和陰性血清LHBs、HBV DNA的檢出情況比較 [例(%)]

    過去臨床認為,HBeAg陰轉(zhuǎn)是HBV復制減弱、傳染性降低和預后好轉(zhuǎn)的表現(xiàn),習慣認為乙型肝炎兩對半模式中的HBeAg抗原和HBV DNA作為評估HBV病毒復制的指標,大量實驗證明,因HBV的變異,HBV基因前C區(qū)或CP區(qū)的變異[5],導致HBeAg合成障礙,HBeAg轉(zhuǎn)陰后仍有患者存在病毒復制的現(xiàn)象,因此,HBeAg作為評估HBV病毒復制指標受到一定的限制。HBV DNA定量PCR檢測是評估HBV復制最直接和可靠的指標,許多基層醫(yī)療單位因受實驗室條件限制不能開展HBV-DNA定量檢測,不能廣泛應用臨床。

    目前有專家提倡,HBV DNA轉(zhuǎn)陰、HBeAg血清轉(zhuǎn)陰已不能作為抗病毒治療的終點。本研究結(jié)果表明,LHBs和HBV DNA的結(jié)果有較好的一致性,能夠反映乙型肝炎患者體內(nèi)病毒的復制情況,尤其對

    HBeAg陰性的慢性乙型肝炎患者的應用價值更大,LHBs可單獨或聯(lián)合其他檢測方法評估HBV復制狀況的指標。

    [1] 梁曉峰,陳園生,王曉軍等.中國3歲以上人群乙型肝炎血清流行病學研究[J].中華流行病學雜志,2005,26(9):655-658.

    [2] 中華醫(yī)學會傳染病與寄生蟲學會,肝病分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華傳染病雜志,2001,19(1):56-62.

    [3] Hidt E,Saher G,Bruss V,et al.The hepaititis B virus large surface protein LHBs is a transcriptional activator[J].Virology,1996,225(1):235-239.

    [4] Roingeard P,Sureau C.Ultrastructural analysis of hepatitis B virus in HepG2-transfected cells with special emphasis on sub viral filament morphogenesis[J].Hepatology,1998,28(4):1128-1133.

    [5] Hamasaki K,Nakata K,Nagayama Y,et al.Change in prevalence of HbeAg negative mutant hepatitis B virus during the course of chronic hepatitis B[J].Hepatology,1994,20(1 Pt 1) :8-14.

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