冰黃膚樂(lè)軟膏的體外抗菌活性觀察

王成玉

(勝利油田臨盤(pán)醫(yī)院,山東臨邑 251507)

冰黃膚樂(lè)軟膏外用主要治療濕疹、神經(jīng)性皮炎、足癬、銀屑病等瘙癢性皮膚病,為探討其對(duì)常見(jiàn)細(xì)菌、真菌的體外抗菌作用,筆者進(jìn)行了相關(guān)試驗(yàn)。現(xiàn)報(bào)告如下。

藥品與菌種:冰黃膚樂(lè)軟膏購(gòu)自西藏藥業(yè)公司,氟康唑原料粉購(gòu)自齊魯制藥廠,夫西地酸原料粉購(gòu)自成都天始山公司,三氦嗎啡啉丙磺酸(MOPS)購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)滬試公司。白色念珠菌、紅色毛癬菌、絮狀表皮癬菌源自山東大學(xué)齊魯醫(yī)院皮膚科真菌室,均從皮膚癬菌病患者皮損中分離而得;金黃色葡萄球菌(金葡菌)從我院膿皰瘡患者痂皮中分離而得;綠膿桿菌源自我院檢驗(yàn)科細(xì)菌室。將受試菌在培養(yǎng)基上連續(xù)轉(zhuǎn)接 2次,以常規(guī)方法取細(xì)菌第 2或 3代新鮮培養(yǎng)物,制備成 107CFU/ml,再用培養(yǎng)基稀釋成 105CFU/ml供試驗(yàn)用。

培養(yǎng)基制備及藥物配制:①牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:取牛肉膏 3.00 g、蛋白胨 10.00 g、氯化鈉 5.00g、瓊脂 20.00g,加蒸餾水至 1 000m l,用 0.1mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié) pH 7.2～7.4,煮沸后分裝于三角燒瓶?jī)?nèi),121℃滅菌 15min,4℃冰箱保存。②RPIM 1640培養(yǎng)基:取上海普飛公司產(chǎn) RPIM 1640培養(yǎng)粉 10.40 g,MOPS 34.53 g,加去離子水 900m l,用 0.1 mol/LNaOH調(diào)節(jié) pH 7.0,定容至 1L,使MOPS終濃度0.165 mol/L。用0.22μm微孔濾膜濾過(guò)除菌,4℃冰箱保存。③藥物配制:精密稱取樣品,溶于二甲基亞砜中,以蒸餾水稀釋成 1g/ml工作液。取工作液 10ml至第 1皿,加 90m l已熔化并保溫于56℃的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或RPIM1640培養(yǎng)基中混勻,制成含藥培養(yǎng)基。取含抗生素工作液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或 RPIM 1640培養(yǎng)基 50ml置于第 2皿,加 50ml相應(yīng)的不含抗生素工作液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或 RPIM1640培養(yǎng)基混勻,1∶1等倍稀釋,制成終濃度 100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0.78 、0.39mg/ml的含藥液培養(yǎng)基。

檢測(cè)方法:①最低抑菌濃度(MIC):取滅菌試管若干支編號(hào),每個(gè)菌株 12管,1～9管分別加上述各濃度含藥液培養(yǎng)基 1ml,其中分別加入 105CFU/ml不同細(xì)菌或真菌菌液50μl混勻。同法設(shè) 10～12管分別為試藥對(duì)照(不加菌液)、菌株對(duì)照(加不含藥物液培養(yǎng)基)、陽(yáng)性對(duì)照(加氟康唑、夫西地酸)。置 37℃溫箱 24 h,觀察菌株生長(zhǎng),以不混濁、無(wú)微生物生長(zhǎng)的最高藥物稀釋倍數(shù)為藥物對(duì)該菌株的 MIC。②最低殺菌濃度(MBC):選出MIC中無(wú)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基試管,用接種環(huán)取一環(huán)接種于新鮮不含藥物的培養(yǎng)基上,置 37℃溫箱 48 h,觀察菌株生長(zhǎng)。如菌株未生長(zhǎng)表示其被藥物完全殺死,完全無(wú)菌生長(zhǎng)的試藥濃度為其對(duì)該菌株的MBC。

結(jié)果:冰黃膚樂(lè)軟膏、氟康唑、夫西地酸的體外 MIC、MBC見(jiàn)表 1、2。

表1 黃膚樂(lè)軟膏、氟康唑、夫西地酸的體外M IC(mg/m l)

表2 黃膚樂(lè)軟膏、氟康唑、夫西地酸的體外MBC(mg/m l)

討論:冰黃膚樂(lè)軟膏由大黃、姜黃、硫黃、黃芩、甘草、冰片、薄荷腦等組方而成,研究表明,其對(duì)皮膚真菌感染有良好療效。李進(jìn)忠等用該藥治療股癬患者 50例,3～5 d癥狀緩解,繼而皮損改善。藥理學(xué)研究證實(shí),大黃、姜黃、黃芩、冰片對(duì)金葡菌、綠膿桿菌等細(xì)菌及常見(jiàn)致病真菌有明顯抑制作用。胡萍等用大黃腹腔注射制備小鼠細(xì)菌性腹膜炎模型,發(fā)現(xiàn)小鼠死亡及菌血癥發(fā)生率明顯降低,表明大黃對(duì)大腸桿菌和變形桿菌感染小鼠有良好的保護(hù)作用。侯君藝等用姜黃素腹腔注射制備小鼠細(xì)菌膿毒癥模型,發(fā)現(xiàn)其可明顯減少TNF-α、NO和氧自由基產(chǎn)生,減輕臟器的病理?yè)p害。鄧淑華等從黃芩莖葉中提取黃芩莖葉總黃酮,體外試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),黃芩莖葉總黃酮對(duì)金葡菌、葡萄球菌等G+細(xì)菌的抗菌作用較強(qiáng),且黃芩苷能抑制白色念珠菌增殖。本試驗(yàn)表明,冰黃膚樂(lè)軟膏體外抗菌活性良好,其 MIC、MBC略高于夫西地酸和氟康唑,可用于治療體足癬。