湖南郴州地區(qū)年輕女性宮頸炎癥患者的病原學(xué)研究

曹艷華 譚紅專 楊志英 陽(yáng)帆 李勇

宮頸炎是女性生殖道的常見疾病，可由多種病原體引起，如沙眼衣原體(Ct)、奈瑟淋球菌(NG)、單純皰疹病毒(HSV)、人乳頭瘤病毒(HPV)、生殖支原體(Mg)、解脲脲原體(Uu)及厭氧菌、真菌等[1-2]。隨著性傳播疾病(STD)發(fā)病率的增多，由此引起的宮頸炎也逐漸增多。湖南省郴州地區(qū)是我省性傳播疾病的高發(fā)區(qū)，流動(dòng)人口多，旅游、娛樂(lè)行業(yè)發(fā)達(dá)，在中低檔娛樂(lè)場(chǎng)所及性工作者中安全套推廣項(xiàng)目尚未普及。為此，本文對(duì)郴州市第一人民醫(yī)院2007年11月～2010年4月門診患者的184份陰道分泌物樣本的檢查結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，旨在了解郴州地區(qū)女性宮頸炎的病原學(xué)情況，為臨床用藥及疾病監(jiān)測(cè)提供一定依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料 酵母提取液、瓊脂購(gòu)自英國(guó)Oxoid公司，Uu、Mh、NG培養(yǎng)基購(gòu)自珠海麗珠試劑有限公司，哥倫比亞瓊脂為生物梅里埃中國(guó)有限公司產(chǎn)品。DNA提取試劑盒、Taq DNA聚合酶分別購(gòu)自上海生工和TaKaRa公司。Mg、Ct、HPV和HSV-2分別來(lái)自東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院、中國(guó)預(yù)防科學(xué)院皮膚性病研究所、中國(guó)疾病預(yù)防控制中心和南京皮膚性病研究所。其他均為分析純產(chǎn)品，主要購(gòu)自上海生物工程公司和北京鼎國(guó)公司。

1.2 研究對(duì)象 隨機(jī)選取184例于2007年11月～2010年4月在普通婦科門診及婦女保健門診就診的女性為研究對(duì)象，研究對(duì)象選擇標(biāo)準(zhǔn)：所有對(duì)象均有性生活史(包括非婚性接觸史)，在兩周內(nèi)未使用過(guò)任何抗生素，取樣3d內(nèi)沒(méi)有陰道沖洗，無(wú)陰道用藥及性生活，排除經(jīng)期女性。同時(shí)隨機(jī)選取該時(shí)間段在門診進(jìn)行健康檢查和孕前檢查的女性128名，年齡20～40歲，平均27.56歲。

1.3 宮頸炎診斷標(biāo)準(zhǔn) 所有入選對(duì)象的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合《實(shí)用婦產(chǎn)科學(xué)》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。

1.4 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 用無(wú)菌窺陰器擴(kuò)張陰道，用宮頸試子于穹窿部停留1min，將取樣后的棉拭子放入盛有l(wèi)ml無(wú)菌生理鹽水的尖底無(wú)菌試管中漂洗片刻，在管壁上擠干后丟棄拭子，用于分離培養(yǎng)或分子生物學(xué)檢測(cè)用。按照上海生工試劑盒提供的方法提取基因組DNA，設(shè)計(jì)針對(duì)Mg，Ct，HSV和HPV的特異性引物，PCR擴(kuò)增。每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)用已知陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)株作對(duì)照。尤其是在PCR反應(yīng)時(shí)，對(duì)于陰性標(biāo)本，會(huì)再次加入標(biāo)準(zhǔn)品DNA，一同擴(kuò)增，以排除標(biāo)本里抑制物的存在。

2 結(jié)果

2.1 研究對(duì)象基本情況 隨機(jī)所選的184例研究對(duì)象，年齡18～39歲，病程：2～648d，平均58d。其中有尿道刺激癥狀、陰道口灼痛、白帶增多、下腹痛的共138例，無(wú)上述癥狀16例，宮頸脆性增加易出血和(或)宮頸不同程度糜爛116例。

2.2 各種病原體感染狀況 在所研究的184例初步診斷為宮頸炎的研究組中，共檢測(cè)出157例陽(yáng)性，檢出率為85.33%。而在同期128例體檢對(duì)照組當(dāng)中，僅檢測(cè)出39例，檢出率為30.4%。宮頸炎組和對(duì)照組的病原體感染情況見表1。

表1 宮頸炎患者及對(duì)照組體內(nèi)各種病原體的檢出情況

表2 157例陽(yáng)性標(biāo)本中病原體混合感染情況(%)

2.3 混合感染情況 如表2所示，研究組所檢出的157例患者中，其中有2種或2種以上病原體混合感染的患者有26例，占14.13%，其中15例為2種病原體混合感染，主要是Uu、Ct、NG、Mg、HSV和HPV間的混合感染，并且以Uu合并Ct和Uu合并Mg感染最多見。

3 討論

宮頸炎從病因?qū)W上可分為感染性宮頸炎和非感染性宮頸炎，感染性宮頸炎主要由外源性病原體感染所致，如細(xì)菌、真菌、病毒、支原體和衣原體等[1]。本研究結(jié)果顯示在184例宮頸炎患者中，檢出病原體157例，以Uu的陽(yáng)性檢出率最高，其次為Ct、Mg、NG、Mh、HSV-2和HPV，分別占23.27%、8.7%、7.61%、5.43%、4.35%和4.35%。本研究從病原學(xué)上證實(shí)了在宮頸炎患者中不僅存在Ct、NG感染，而且還存在其他病原體感染。但Uu的檢出率與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，說(shuō)明Uu可能與宮頸炎的發(fā)病無(wú)關(guān)，因?yàn)橛醒芯繉?duì)生殖道感染的女性進(jìn)行PCR檢測(cè)，Uu的檢出率為70%，其中微小脲原體占80%以上，顯示Uu的致病性可能與其基因型有一定聯(lián)系，同時(shí)也間接說(shuō)明本地區(qū)Uu的感染率可能低于國(guó)外其他地區(qū)[4]。另外，一些研究資料顯示，Mg、HSV-2、HPV等與宮頸炎相關(guān)，我們的研究結(jié)果與此相符[5]。本研究PCR對(duì)Mg基因檢測(cè)，檢出率為8.7%，略高于國(guó)外報(bào)道[6]。分析其原因，主要有：①技術(shù)因素，如PCR抑制物的存在及引物的選擇等而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)敏感性不同。②采樣方法：很多文獻(xiàn)采樣部位大多數(shù)為宮頸口，認(rèn)為支原體一般寄生于宮頸上皮細(xì)胞。但Mg在pH=7或稍酸或稍堿時(shí)生長(zhǎng)良好。因此我們認(rèn)為對(duì)女性進(jìn)行Mg感染的檢測(cè)可選擇陰道彎窿部采集標(biāo)本，而不一定要取材于宮頸上皮細(xì)胞。陰道彎隆部是上、下生殖道的聯(lián)接部分，因此無(wú)論是上生殖道還是下生殖道的支原體感染都比較容易在該部位的標(biāo)本中檢測(cè)到，另外陰道彎隆部本身呈現(xiàn)弱酸性，也有利于支原體的寄生。③本地區(qū)Mg感染引起宮頸炎的比例呈上升趨勢(shì)。事實(shí)上，在本研究當(dāng)中，我們對(duì)于陰性結(jié)果進(jìn)行了排除，凡是陽(yáng)性結(jié)果我們都在不同時(shí)間重復(fù)了2次。因此本研究當(dāng)中我們認(rèn)為第3種可能性最大，應(yīng)引起臨床醫(yī)師高度重視。同時(shí)，HSV-2和HPV的檢出率均為4.35%，與世界其他地區(qū)相比較低，這可能與不同地域及生活方式有關(guān)[7]。因此，臨床上應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注宮頸炎的無(wú)癥狀患者，這對(duì)于防止宮頸癌及癌前病變的發(fā)生有重要意義。另外不應(yīng)遺漏其宮頸的檢查，如宮頸涂片細(xì)胞學(xué)檢查，并視情況行陰道鏡檢查及陰道鏡指引下的病理活檢。

綜上所述，Ct、Mg以及NG是引起宮頸炎的重要病原體，事實(shí)上，宮頸炎患者體內(nèi)存在的Uu、Mg、HSV-2和HPV單獨(dú)或混合感染也是一個(gè)不可忽視的病因之一。在184例擬診的宮頸炎患者中各種病原體感染157例，其中單項(xiàng)病原體感染131例(71.2%)、混合病原體感染26例(14.13%)。1例宮頸炎患者可同時(shí)感染兩種或兩種以上性病病原體，在混合感染中以Uu合并Ct最高，占34.62%，其次是Uu和Mg，占26.92%。因此在臨床上若部分患者久治不愈，且無(wú)新發(fā)感染，應(yīng)考慮混合的可能。多種病原體反復(fù)感染導(dǎo)致黏膜上皮細(xì)胞損傷，大大增加了其他病原體感染的可能性。

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