辣椒品種疫霉菌抗性鑒定試驗(yàn)研究

咸文榮 ，張登峰 ，董亮

（1.西北農(nóng)林科技大學(xué)，陜西楊凌，712100；2.青海省農(nóng)科院植保所）

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌（Phytophora capsici）引起的毀滅性土傳真菌病害，輕者減產(chǎn)20%～30%，重則減產(chǎn)一半以上，甚至絕收[1，2]。近年來隨著陜西省辣椒種植面積的不斷擴(kuò)大，辣椒疫病發(fā)生為害程度日趨嚴(yán)重，成為辣椒生產(chǎn)的重要障礙因子。目前，改進(jìn)栽培措施和使用化學(xué)農(nóng)藥是防治辣椒疫病的常規(guī)技術(shù)，但防效均不理想[3]。探索新的防治途徑已成為控制辣椒疫病，發(fā)展辣椒產(chǎn)業(yè)亟待解決的重大問題。選育和種植抗病的辣椒品種不僅可以減輕病害損失，且不污染環(huán)境，是防治辣椒疫病最經(jīng)濟(jì)有效的措施。本研究擬對(duì)引進(jìn)的辣椒品種進(jìn)行疫霉菌抗性鑒定，以期從中篩選出抗疫病性強(qiáng)的材料，為抗病育種和辣椒嫁接試驗(yàn)篩選砧木提供可靠的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)苯菲贩N

從國(guó)內(nèi)外引進(jìn)辣椒品種共計(jì)77個(gè)，其中線椒、干椒和朝天椒29個(gè)，牛角椒和羊角椒38個(gè)，甜椒10個(gè)。

1.2 供試菌種的分離及孢子囊培養(yǎng)

①供試菌種的分離和純化 辣椒疫病病株采自青海省樂都縣碾伯鎮(zhèn)北門村白如蒲大棚辣椒發(fā)病田中，用PSA培養(yǎng)基分離培養(yǎng)疫霉菌，純化保存?zhèn)溆谩?/p>

②孢子囊誘導(dǎo)[4，6]土壤浸出液制備：取菜田肥沃表土500 g，加入1 000 mL蒸餾水，攪拌后靜置24 h，取上清液用濾紙過濾2次，濾液即為土壤浸出液，置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

土壤浸出液培養(yǎng)法：將25 mL土壤浸出液加入9 cm×9 cm培養(yǎng)皿中，把PSA平板上生長(zhǎng)7 d的疫霉菌用手術(shù)刀分割成1 cm×1 cm大小的菌絲塊，取8～10塊置于土壤浸出液中，菌絲塊的菌絲面朝上，讓土壤浸出液剛剛淹過菌絲面，置于26℃，光照連續(xù)照射72 h，菌絲塊表面可產(chǎn)生大量孢子囊。將培養(yǎng)72 h的菌絲塊及浸出液一同倒入三角瓶中，用力振蕩10 min，促使孢子囊從菌絲叢上脫落，用雙紗布過濾懸浮液，濾去培養(yǎng)基和部分菌絲，濾液為孢子囊懸浮液。用血球計(jì)數(shù)板測(cè)定孢子囊懸浮液的濃度，然后稀釋到試驗(yàn)所需的接種濃度，接種液要求現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)分2次育苗，2006年6月15日播種干椒和線椒品種，6月19日播種牛角椒、羊角和甜椒品種，各品種直播于4 cm×4 cm（72目）育苗盤的基質(zhì)中。育苗和接菌試驗(yàn)在西寧市蔬菜研究所自控溫室中進(jìn)行。

接種采用育苗盤灌根法。接種前1 d苗盤澆適量水，保證土壤保持半干半濕狀態(tài)。育苗47 d后，即苗齡為5～6葉期接種，接種孢子囊濃度為10 250個(gè)/mL，用注射器吸取5 mL接種液接種于植株根際土壤中，接種液不能接觸到植株根莖部。每個(gè)品種重復(fù)3次，每次重復(fù)10株幼苗，共30株，留10～20株不接種作對(duì)照。接種至發(fā)病期間保持土壤濕度近飽和。于接種后見有發(fā)病株開始調(diào)查，間隔3 d調(diào)查1次，計(jì)算發(fā)病率、病情指數(shù)。

1.4 調(diào)查分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

0級(jí)：無病；1級(jí)：幼苗根莖部輕微變黑，葉片不萎蔫或可恢復(fù)性萎蔫；2級(jí)：幼苗根莖部變黑達(dá)1～2 cm，葉片不可恢復(fù)性萎蔫，下部葉片偶有脫落；3級(jí)：幼苗根莖部變黑超過2 cm，葉片明顯萎蔫或落葉明顯；4級(jí)：幼苗根莖部變黑縊縮，除生長(zhǎng)點(diǎn)外全部落葉或植株萎蔫；5級(jí)：植株枯死。

1.5 品種群體抗病性劃分標(biāo)準(zhǔn)

高抗（HR）：病情指數(shù)≤10；抗病（R）：10<病情指數(shù)≤30；中抗（MR）：30<病情指數(shù)≤50；感?。⊿）：病情指數(shù)>50。

2 結(jié)果與分析

接菌15 d后幼苗發(fā)病速度緩慢，病情穩(wěn)定，故以接菌后15 d調(diào)查的結(jié)果進(jìn)行抗性分析。調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)甜椒品種發(fā)病速度最快，其次是干椒、線椒和朝天椒。另外，各品種發(fā)病率和病情指數(shù)亦存在一定差異，結(jié)果如下。

2.1 干椒、線椒和朝天椒品種苗期疫霉菌抗性鑒定

從圖1可以看出，供鑒定的29份干椒、線椒和朝天椒品種中高抗品種有12個(gè)，其中，發(fā)病率為0的品種 6 個(gè)， 分別是 4，6，23，25，26，31 號(hào)； 抗病品種有 6個(gè)；感病品種有11個(gè)。

2.2 甜椒品種苗期疫霉菌抗性鑒定

從圖2可以看出，供鑒定的10份甜椒品種中，沒有高抗、抗病品種，中抗品種1個(gè)（8號(hào)），感病品種有9個(gè)。

2.3 牛、羊角椒品種苗期疫霉菌抗性鑒定

從圖3可以看出，供鑒定的38份牛、羊角椒品種中，沒有高抗品種，抗病品種有 4 個(gè)（7，9，24，38 號(hào)）；中抗品種3個(gè)；其余31個(gè)品種抗性系數(shù)小，表現(xiàn)為感病。

3 結(jié)論

鑒定辣椒種質(zhì)資源對(duì)疫霉菌的抗性是抗病育種的關(guān)鍵。通過溫室接種試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，不同辣椒品種對(duì)疫病的抗性存在明顯差異。供試的77個(gè)樣品中，干椒、線椒和朝天椒品種 1，4，6，7，8，9，10，23，25，26，27 和31號(hào)共12個(gè)品種表現(xiàn)為高度抗病，屬高抗品種，占鑒定總數(shù)的15.58%；抗病品種共計(jì)10個(gè)，其中6個(gè)來自干椒、線椒品種，4個(gè)來自牛、羊角椒品種，占鑒定總數(shù)的12.99%；甜椒沒有高抗、抗病品種。試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，隨著接種時(shí)間的延長(zhǎng)，3類不同品種的發(fā)病速率不同，甜椒發(fā)病速率最快；其次為牛、羊角椒，而線椒、干椒和朝天椒相對(duì)較慢。以上結(jié)果可為青海省辣椒生產(chǎn)合理利用品種，減少辣椒疫病的為害提供依據(jù)。

圖1 干辣椒品種接種抗性鑒定

圖2 甜椒品種接種抗性鑒定

圖3 牛角椒、羊角椒品種接種抗性鑒定

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