咸文榮 ,張登峰 ,董亮
(1.西北農(nóng)林科技大學(xué),陜西楊凌,712100;2.青海省農(nóng)科院植保所)
辣椒疫病是由辣椒疫霉菌(Phytophora capsici)引起的毀滅性土傳真菌病害,輕者減產(chǎn)20%~30%,重則減產(chǎn)一半以上,甚至絕收[1,2]。近年來隨著陜西省辣椒種植面積的不斷擴(kuò)大,辣椒疫病發(fā)生為害程度日趨嚴(yán)重,成為辣椒生產(chǎn)的重要障礙因子。目前,改進(jìn)栽培措施和使用化學(xué)農(nóng)藥是防治辣椒疫病的常規(guī)技術(shù),但防效均不理想[3]。探索新的防治途徑已成為控制辣椒疫病,發(fā)展辣椒產(chǎn)業(yè)亟待解決的重大問題。選育和種植抗病的辣椒品種不僅可以減輕病害損失,且不污染環(huán)境,是防治辣椒疫病最經(jīng)濟(jì)有效的措施。本研究擬對(duì)引進(jìn)的辣椒品種進(jìn)行疫霉菌抗性鑒定,以期從中篩選出抗疫病性強(qiáng)的材料,為抗病育種和辣椒嫁接試驗(yàn)篩選砧木提供可靠的依據(jù)。
從國(guó)內(nèi)外引進(jìn)辣椒品種共計(jì)77個(gè),其中線椒、干椒和朝天椒29個(gè),牛角椒和羊角椒38個(gè),甜椒10個(gè)。
①供試菌種的分離和純化 辣椒疫病病株采自青海省樂都縣碾伯鎮(zhèn)北門村白如蒲大棚辣椒發(fā)病田中,用PSA培養(yǎng)基分離培養(yǎng)疫霉菌,純化保存?zhèn)溆谩?/p>
②孢子囊誘導(dǎo)[4,6]土壤浸出液制備:取菜田肥沃表土500 g,加入1 000 mL蒸餾水,攪拌后靜置24 h,取上清液用濾紙過濾2次,濾液即為土壤浸出液,置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>
土壤浸出液培養(yǎng)法:將25 mL土壤浸出液加入9 cm×9 cm培養(yǎng)皿中,把PSA平板上生長(zhǎng)7 d的疫霉菌用手術(shù)刀分割成1 cm×1 cm大小的菌絲塊,取8~10塊置于土壤浸出液中,菌絲塊的菌絲面朝上,讓土壤浸出液剛剛淹過菌絲面,置于26℃,光照連續(xù)照射72 h,菌絲塊表面可產(chǎn)生大量孢子囊。將培養(yǎng)72 h的菌絲塊及浸出液一同倒入三角瓶中,用力振蕩10 min,促使孢子囊從菌絲叢上脫落,用雙紗布過濾懸浮液,濾去培養(yǎng)基和部分菌絲,濾液為孢子囊懸浮液。用血球計(jì)數(shù)板測(cè)定孢子囊懸浮液的濃度,然后稀釋到試驗(yàn)所需的接種濃度,接種液要求現(xiàn)配現(xiàn)用。
試驗(yàn)分2次育苗,2006年6月15日播種干椒和線椒品種,6月19日播種牛角椒、羊角和甜椒品種,各品種直播于4 cm×4 cm(72目)育苗盤的基質(zhì)中。育苗和接菌試驗(yàn)在西寧市蔬菜研究所自控溫室中進(jìn)行。
接種采用育苗盤灌根法。接種前1 d苗盤澆適量水,保證土壤保持半干半濕狀態(tài)。育苗47 d后,即苗齡為5~6葉期接種,接種孢子囊濃度為10 250個(gè)/mL,用注射器吸取5 mL接種液接種于植株根際土壤中,接種液不能接觸到植株根莖部。每個(gè)品種重復(fù)3次,每次重復(fù)10株幼苗,共30株,留10~20株不接種作對(duì)照。接種至發(fā)病期間保持土壤濕度近飽和。于接種后見有發(fā)病株開始調(diào)查,間隔3 d調(diào)查1次,計(jì)算發(fā)病率、病情指數(shù)。
0級(jí):無病;1級(jí):幼苗根莖部輕微變黑,葉片不萎蔫或可恢復(fù)性萎蔫;2級(jí):幼苗根莖部變黑達(dá)1~2 cm,葉片不可恢復(fù)性萎蔫,下部葉片偶有脫落;3級(jí):幼苗根莖部變黑超過2 cm,葉片明顯萎蔫或落葉明顯;4級(jí):幼苗根莖部變黑縊縮,除生長(zhǎng)點(diǎn)外全部落葉或植株萎蔫;5級(jí):植株枯死。
高抗(HR):病情指數(shù)≤10;抗病(R):10<病情指數(shù)≤30;中抗(MR):30<病情指數(shù)≤50;感?。⊿):病情指數(shù)>50。
接菌15 d后幼苗發(fā)病速度緩慢,病情穩(wěn)定,故以接菌后15 d調(diào)查的結(jié)果進(jìn)行抗性分析。調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)甜椒品種發(fā)病速度最快,其次是干椒、線椒和朝天椒。另外,各品種發(fā)病率和病情指數(shù)亦存在一定差異,結(jié)果如下。
從圖1可以看出,供鑒定的29份干椒、線椒和朝天椒品種中高抗品種有12個(gè),其中,發(fā)病率為0的品種 6 個(gè), 分別是 4,6,23,25,26,31 號(hào); 抗病品種有 6個(gè);感病品種有11個(gè)。
從圖2可以看出,供鑒定的10份甜椒品種中,沒有高抗、抗病品種,中抗品種1個(gè)(8號(hào)),感病品種有9個(gè)。
從圖3可以看出,供鑒定的38份牛、羊角椒品種中,沒有高抗品種,抗病品種有 4 個(gè)(7,9,24,38 號(hào));中抗品種3個(gè);其余31個(gè)品種抗性系數(shù)小,表現(xiàn)為感病。
鑒定辣椒種質(zhì)資源對(duì)疫霉菌的抗性是抗病育種的關(guān)鍵。通過溫室接種試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),不同辣椒品種對(duì)疫病的抗性存在明顯差異。供試的77個(gè)樣品中,干椒、線椒和朝天椒品種 1,4,6,7,8,9,10,23,25,26,27 和31號(hào)共12個(gè)品種表現(xiàn)為高度抗病,屬高抗品種,占鑒定總數(shù)的15.58%;抗病品種共計(jì)10個(gè),其中6個(gè)來自干椒、線椒品種,4個(gè)來自牛、羊角椒品種,占鑒定總數(shù)的12.99%;甜椒沒有高抗、抗病品種。試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn),隨著接種時(shí)間的延長(zhǎng),3類不同品種的發(fā)病速率不同,甜椒發(fā)病速率最快;其次為牛、羊角椒,而線椒、干椒和朝天椒相對(duì)較慢。以上結(jié)果可為青海省辣椒生產(chǎn)合理利用品種,減少辣椒疫病的為害提供依據(jù)。
圖1 干辣椒品種接種抗性鑒定
圖2 甜椒品種接種抗性鑒定
圖3 牛角椒、羊角椒品種接種抗性鑒定
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