小青龍湯中藥提取物配方顆粒湯劑與傳統(tǒng)湯劑的比較研究

任大偉 ，王淑君 ，李 平 ，劉 瓊

（1.上海綠谷制藥有限公司，上海 201203；2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南鄭州 450052）

單味中藥提取物配方顆粒是以中藥材經(jīng)炮制后的飲片為原料，按照藥物性質(zhì)選擇不同方法進(jìn)行大工業(yè)提取，并經(jīng)適當(dāng)濃縮、干燥、制粒等工序精制而成并定量包裝顆粒劑，使用時(shí)按處方當(dāng)量調(diào)劑后熱開(kāi)水沖兌即可，既保留了中藥飲片的藥性藥效，又不需煎煮，易于調(diào)劑、使用方便、質(zhì)量可控，符合現(xiàn)代消費(fèi)與生活需求，是傳統(tǒng)飲片湯劑現(xiàn)代化改革的一種形式[1]。筆者曾對(duì)四逆湯配方顆粒進(jìn)行了研究，取得了滿意的結(jié)果，為進(jìn)一步探討單味中藥提取物配方顆粒的制備方法及成分變化情況，筆者對(duì)小青龍湯配方顆粒與傳統(tǒng)飲片湯劑進(jìn)行了比較研究。

小青龍湯始載于《傷寒雜病論》，為治療風(fēng)寒感冒的重要方劑，由麻黃、桂枝、芍藥、細(xì)辛、半夏、五味子、干姜、甘草共八味藥組成，其中麻黃含麻黃堿，芍藥含芍藥苷，甘草含甘草次酸等有效成分，本研究根據(jù)有效成分的性質(zhì)及方劑特點(diǎn)進(jìn)行了單味中藥提取物配方顆粒的制備，用薄層色譜法對(duì)單味中藥提取物配方顆粒湯劑和傳統(tǒng)湯劑化學(xué)成分進(jìn)行定性定量比較，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下：

1 儀器與試藥

CS-930雙波長(zhǎng)薄層掃描儀（日本島津）；麻黃、桂枝、芍藥、甘草、細(xì)辛、干姜、半夏、五味子生藥飲片均購(gòu)自河南省藥材公司，經(jīng)河南省藥材公司侯惠鳴副主任中藥師鑒定為正品。試劑為分析純，芍藥苷、甘草次酸、麻黃堿標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品制備

2.1.1 單味中藥提取物配方顆粒及其湯劑的制備 麻黃、桂枝、細(xì)辛、干姜、五味子分別提取揮發(fā)油后，殘?jiān)?1∶20，1∶10加水提取兩次，分別為3、1.5 h，合并提取液，80℃以下濃縮至適當(dāng)濃度，噴霧制粒，60℃干燥，加入揮發(fā)油，定量包裝即可；芍藥、甘草、半夏直接按上比例加水，煎煮時(shí)間分別為4、3 h，煎煮液在80℃以下濃縮至適當(dāng)濃度，噴霧制粒，定量包裝，備用。

按處方量取單味中藥提取物配方顆粒，以80℃熱開(kāi)水沖兌。本實(shí)驗(yàn)為方便起見(jiàn)，沖兌成1 000 ml，制成配方顆粒湯劑，備用。

2.1.2 傳統(tǒng)湯劑的制備 取小青龍湯處方量調(diào)劑，按1∶20、1∶10加水煎煮兩次，12層紗布過(guò)濾后，合并煎出液，定容到1 000 ml，備用。

2.2 單味中藥提取物配方顆粒湯劑與傳統(tǒng)湯劑的比較

2.2.1 兩種湯劑中麻黃堿的成分比較[2]

2.2.1.1 麻黃堿的含量測(cè)定 分別精密量取飲片湯劑及顆粒湯劑各60 ml，用10%Na2CO3調(diào)節(jié) pH至 12～13，置分液漏斗中分別以乙醚萃取6次，合并萃取液于三角燒瓶中，回收乙醚后，用95%乙醇定容至1 ml量瓶中，備用。取上述兩種溶液6μl、1.895 mg/ml的麻黃堿對(duì)照品溶液 3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上，以正丁醇∶乙醇∶水∶40%乙醛（16∶1∶4∶2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以0.20%茚三酮乙醇液，110℃烘10 min，兩種湯劑顯示相同顏色的斑點(diǎn)，表明成分的一致性。在CS-930型薄層掃描儀上對(duì)麻黃堿掃描定量（掃描條件：雙波長(zhǎng)反射法鋸齒形掃描，λs 500 nm，λR為 700 nm，Sx＝3，靈敏度：中，狹縫：1.2 mm×1.2 mm），折算為一個(gè)處方量中含量，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 傳統(tǒng)湯劑及配方顆粒湯劑中麻黃堿含量比較Tab.1 Comparison of the ephedrine content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

2.2.1.2 麻黃堿回收率試驗(yàn) 采用加樣回收法。精密取已知含量的樣品，分別精密加入一定量的麻黃堿對(duì)照品，按上述方法制備樣品，按麻黃堿的測(cè)定項(xiàng)下薄層掃描條件進(jìn)行掃描測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 麻黃堿回收率試驗(yàn)Tab.2 Recovery test of the ephedrine

由表2可知，傳統(tǒng)湯劑與單味中藥提取物配方顆粒湯劑相關(guān)成分薄層層析圖譜一致；單味中藥提取物配方顆粒湯劑麻黃堿含量高于傳統(tǒng)湯劑，且含量較為穩(wěn)定。

2.2.2 兩種湯劑中芍藥苷的成分比較[3]分別精密量取飲片湯劑和顆粒湯劑各60 ml，用10%HCl調(diào)pH至2～3，置分液漏斗中分別用乙醚萃取6次，合并萃取液于三角燒瓶中，水浴揮發(fā)乙醚后，用95%乙醇定容至1 ml量瓶中，備用。取上述兩種溶液各6μl及1.956 mg/ml的芍藥苷對(duì)照品溶液9μl，分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上，以氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯（8∶3∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，碘蒸氣顯色。在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上，兩種湯劑顯相同的黃色斑點(diǎn)，以CS-930型薄層掃描儀對(duì)芍藥苷進(jìn)行掃描定量（掃描條件：雙波長(zhǎng)反射法鋸齒形掃描，λS為 415 nm，λR為 650 nm，Sx=3，狹縫：1.2 mm×1.2 mm，靈敏度：中），折算為一個(gè)處方量中含量，結(jié)果見(jiàn)表3。

由表3可知，傳統(tǒng)湯劑與單味中藥提取物配方顆粒湯劑相關(guān)成分薄層層析圖譜一致；單味中藥提取物配方顆粒湯劑芍藥苷含量明顯高于傳統(tǒng)湯劑，且含量較為穩(wěn)定。

2.2.3 兩種湯劑中甘草次酸的成分比較[4]

2.2.3.1 甘草次酸含量測(cè)定 精密吸取飲片湯劑及顆粒湯劑各80 m1，加鹽酸6 ml，回流提取1 h，置分液漏斗分別以氯仿萃取4次，合并氯仿液水浴回收氯仿至干，殘?jiān)砸掖既芙獠⒍ㄈ葜? ml，在同一硅膠G薄層板上分別點(diǎn)樣8μl、2.036 mg/ml的甘草次酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液8μl，用石油醚 （30～60℃）∶苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸（10∶20∶7∶0.5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇液，在105℃烘5 min，兩種湯劑顯相同顏色的斑點(diǎn)，以CS-930型薄層掃描儀上對(duì)甘草次酸進(jìn)行掃描定量（掃描條件：雙波長(zhǎng)反射法鋸齒形掃描，λs=665 nm，λR=400 nm，Sx=3，靈敏度：中，狹縫：1.2 mm×1.2 mm），折算為一個(gè)處方量中含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

表3 傳統(tǒng)湯劑及配方顆粒湯劑中芍藥苷含量比較Tab.3 Comparison of the paeoniflorin content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

表4 傳統(tǒng)湯劑及配方顆粒湯劑中甘草次酸的含量比較Tab.4 Comparison of the cyrrhetinate content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

2.2.3.2 回收率試驗(yàn) 采用加樣回收法。精密取已知含量的樣品，分別精密加入一定量的甘草次酸對(duì)照品，按上述方法進(jìn)行樣品制備和含量測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 甘草次酸回收率實(shí)驗(yàn)Tab.5 Recovery test of cyrrhetinate

由表5可知，傳統(tǒng)湯劑與單味中藥提取物配方顆粒湯劑相關(guān)成分薄層層析圖譜一致；單味中藥提取物配方顆粒湯劑甘草次酸含量明顯高于傳統(tǒng)湯劑，且含量較為穩(wěn)定。

2.3 結(jié)果

2.3.1 傳統(tǒng)湯劑與單味中藥提取物配方顆粒湯劑薄層層析圖譜一致。

2.3.2 單味中藥提取物配方顆粒湯劑中有效成分均高于傳統(tǒng)湯劑，但不同成分高出的倍數(shù)不盡一致。

2.3.3 單味中藥提取物配方顆粒湯劑有效成分含量穩(wěn)定，RSD值小，表明其重現(xiàn)性好。

3 討論

單味中藥提取物配方顆粒湯劑的成分含量與傳統(tǒng)湯劑差別較大，代替飲片湯劑應(yīng)進(jìn)行處方調(diào)劑當(dāng)量的研究。

本研究為保持與傳統(tǒng)湯劑以水為提取溶媒的一致，采用提取揮發(fā)油后再水提的配方顆粒制備方法。配方顆粒制備應(yīng)通過(guò)研究確定不同的方法。

單味中藥提取物配方顆粒湯劑制備時(shí)以熱開(kāi)水沖兌，盡量提高溫度，有利于接近制備飲片湯劑的高溫條件，使兩者盡量趨于一致。

配方顆粒湯劑與傳統(tǒng)湯劑的等效性應(yīng)從成分的比較、藥效的比較和臨床療效的比較3個(gè)方面進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)[5]，本研究?jī)H對(duì)小青龍湯配方顆粒湯劑與傳統(tǒng)湯劑的成分進(jìn)行了比較，藥效和臨床療效的比較有待進(jìn)一步研究。

臨床療效問(wèn)題是制約配方顆粒湯劑臨床推廣的關(guān)鍵因素之一，而質(zhì)量穩(wěn)定才能保證療效，因此，中藥配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研制和發(fā)展，是臨床大規(guī)模推廣使用的基礎(chǔ)和前提[6-8]。

[1]凌?；?劉曉飛.中藥配方顆粒的研究進(jìn)展及應(yīng)用前景分析[J].云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,32(3):68-70.

[2]任大偉,董霄漢,張廣強(qiáng),等.中藥煮散臨床應(yīng)用研究(二)——小青龍湯飲片煎劑與顆粒煎劑的化學(xué)成份對(duì)比分析[J].河南中醫(yī),1989,(4):20-24.

[3]鐘立賢,王運(yùn)榮,李世芳,等.湯劑改進(jìn)研究——復(fù)方小青龍湯濃煎劑的研究[J].中成藥研究,1983,(1):7-10.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].一部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:59-60.

[5]李松林,宋景政,徐宏喜.中藥配方顆粒研究淺析[J].中草藥,2009,40(增刊):1-7.

[6]劉傳明,李華,楊汝文.中藥配方顆粒劑臨床推廣的制約因素調(diào)查[J].中國(guó)臨床康復(fù),2006,10(23):168-169.

[7]王靜,王佩娟,陳炯華,等.中藥配方顆粒的研究近況述評(píng)[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐,2009,23(2):75-77.

[8]王政,謝素治.中藥配方顆粒和傳統(tǒng)飲片的化學(xué)成分及藥效學(xué)研究概述[J].海峽藥學(xué),2004,16(12):78-80.