TrkB蛋白在宮頸上皮內(nèi)瘤變中的表達(dá)及臨床意義

劉 芳，余愛(ài)平，陳紅菊

（武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北武漢 430064）

近年來(lái)隨著宮頸病變?cè)\斷技術(shù)的提高及廣大婦女對(duì)婦科普查的重視，宮頸癌及癌前病變的發(fā)現(xiàn)亦逐漸增多。目前對(duì)宮頸病變的診斷，仍主要采用細(xì)胞學(xué)和活體組織學(xué)檢查等形態(tài)學(xué)方法。因此，尋找相關(guān)生物標(biāo)志，用于宮頸病變的輔助診斷，為臨床提供可靠的依據(jù)仍是廣大學(xué)者的重任。本文應(yīng)用免疫組化，對(duì)正常及炎性宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）和宮頸鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)行酪氨酸激酶受體B（TrkB）蛋白檢測(cè)，探討TrkB蛋白在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌發(fā)生及發(fā)展中的作用，以指導(dǎo)宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌的診斷。

表1 TrkB蛋白在宮頸組織中的表達(dá)[n(%)]Tab.1 Expression of TrkB protein in cervical tissues[n(%)]

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院婦產(chǎn)科2008年1月～2010年1月門(mén)診宮頸活檢及住院子宮切除標(biāo)本共105例，均經(jīng)病理醫(yī)生確診?；颊吣挲g18～66歲，其中，正常宮頸組織10例，宮頸炎15例，CINⅠ～CINⅢ、宮頸癌各20例。

1.2 檢查方法

對(duì)正常宮頸組織、宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ）、宮頸癌病理標(biāo)本進(jìn)行切片，常規(guī)行HE染色，應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法進(jìn)行TrkB蛋白染色，TrkB蛋白為鼠抗人單克隆抗體，購(gòu)自武漢博士德生物技術(shù)有限公司。

1.3 結(jié)果判定

細(xì)胞質(zhì)及膜染黃色或棕黃色為染色陽(yáng)性結(jié)果，依半定量標(biāo)準(zhǔn)[1]，據(jù)染色陽(yáng)性細(xì)胞占比例及分布情況：（-）：陰性，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%，單個(gè)細(xì)胞染色；（+）：弱陽(yáng)性，散在的細(xì)胞染色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比為5%～24%；（++）：陽(yáng)性，片狀細(xì)胞染色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比為25%～50%；（+++）：強(qiáng)陽(yáng)性，細(xì)胞染色彌散，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比為＞50%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

各組計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

TrkB蛋白在宮頸組織中的表達(dá)見(jiàn)表1。

3 討論

宮頸癌是女性生殖器官中最常見(jiàn)的惡性腫瘤。高危型人類(lèi)乳頭狀瘤病毒（HPV）感染為引起宮頸癌的主要原因[2]；但從正常宮頸發(fā)展為宮頸癌前病變甚至宮頸癌的過(guò)程中，其發(fā)生及發(fā)展機(jī)制仍不明確。本結(jié)果顯示，TrkB蛋白的異常表達(dá)可能是其原因之一。TrkB是腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）的特異性受體[3]，許多腫瘤中可有TrkB的過(guò)表達(dá)或過(guò)激活，如多發(fā)性骨髓瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等[4]。在肺癌、肝癌、胰腺癌、腎母細(xì)胞瘤、霍奇金淋巴瘤等一些非神經(jīng)源性腫瘤中有TrkB的表達(dá)，甚至在EB病毒轉(zhuǎn)化的B淋巴細(xì)胞中也有表達(dá)[5-9]。研究顯示，TrkB基因通過(guò)激活PI3K/Akt誘導(dǎo)細(xì)胞生存和增殖，促進(jìn)瘤細(xì)胞浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[10]。

TrkB是由821個(gè)氨基酸殘基組成的高度糖基化分子，胞外區(qū)包括一個(gè)由32個(gè)氨基酸殘基組成的信號(hào)肽。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的受體以Trks形式，BDNF特異性受體為T(mén)rkB，BDNF發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)主要依賴(lài)于和受體TrkB的結(jié)合，促進(jìn)TrkB同源二聚體形成，激活受體酪氨酸激酶活性，致受體自身酪氨酸殘基磷酸化，活化的TrkB依順序激活多種蛋白和酶，將其信號(hào)傳至細(xì)胞核，啟動(dòng)即早基因和延遲反應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄或直接參與多種生理反應(yīng)[10]，TrkB具有使細(xì)胞骨架變形、遷移、附著、轉(zhuǎn)移瘤生成及新血管生成等癌轉(zhuǎn)移和侵襲的特性[11]。研究表明，TrkB-BDNF信號(hào)軸通過(guò)刺激 HIF-1α因子上調(diào)VEGF。在人類(lèi)腫瘤如肺癌、胰腺癌、肝細(xì)胞癌、前列腺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤等中的表達(dá)顯示，TrkB-BDNF信號(hào)軸對(duì)腫瘤的生存和發(fā)展具有重要意義[4]。研究報(bào)道，TrkB基因可作為一種強(qiáng)效的癌基因、一種抑制“失巢凋亡”的基因，若用藥物來(lái)抑制TrkB，可能對(duì)TrkB過(guò)表達(dá)或突變的人類(lèi)腫瘤的致瘤和轉(zhuǎn)移力有明顯作用。

本研究結(jié)果提示，TrkB蛋白在宮頸癌及癌前病變高表達(dá)，且與宮頸癌前病變的分級(jí)有關(guān)，CINⅠ＜CINⅡ＜CINⅢ＜宮頸癌（P＜0.01），可能與宮頸癌的的發(fā)生及發(fā)展有一定的關(guān)系，其蛋白表達(dá)陽(yáng)性有可能作為宮頸癌診斷的參考指標(biāo)，TrkB表達(dá)水平隨著CIN的發(fā)展而增強(qiáng)，這一變化有助于預(yù)測(cè)CIN的發(fā)展。因此，對(duì)TrkB的研究，有助于進(jìn)一步了解和揭示細(xì)胞癌變和腫瘤轉(zhuǎn)移的又一相關(guān)調(diào)控機(jī)制，對(duì)研究宮頸癌的發(fā)生及發(fā)展具有一定的重要意義，TrkB有望成為預(yù)測(cè)宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)展的重要生物標(biāo)志。

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