兩種分析儀C反應(yīng)蛋白檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)

孟秀芹 張善輝

近年來(lái)C反應(yīng)蛋白(CRP)作為一種敏感的急性時(shí)相蛋白，頗受臨床的重視。本室近期引進(jìn)一臺(tái)由芬蘭Orion Diaqnostica公司提供的小型QuikRead CRP分析儀。根據(jù)臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理的要求，臨床實(shí)驗(yàn)室采用新的檢測(cè)系統(tǒng)，必須對(duì)該系統(tǒng)的性能進(jìn)行測(cè)試驗(yàn)證［1］。我們以目前檢測(cè)血清CRP較為成熟的ARRAY360特定蛋白分析儀作為比對(duì)系統(tǒng)，對(duì)QuikRead CRP分析儀的精密度、線性、可比性等進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 儀器 芬蘭QuikRead 101 CRP分析儀，檢測(cè)原理:人血清或全血中的CRP與包被在微球顆粒上的抗人CRP抗體結(jié)合，產(chǎn)生濁度，在QuikRead上可測(cè)得其濁度改變，根據(jù)隨試劑配備磁卡上儲(chǔ)存的預(yù)先設(shè)定的校正曲線，可直接讀出其濃度值;美國(guó)ARRAY360特定蛋白分析儀，原理為速率散射比濁法。

1.2 試劑 QuikRead CRP分析儀采用Orion Diaqnostica公司提供的 CRP原裝試劑和配套質(zhì)控品;ARRAY360采用Beckman-Coulter公司提供的CRP原裝試劑和配套質(zhì)控品。

1.3 樣本 收集50例無(wú)溶血、脂血及黃疸的新鮮血樣各兩管，一份不抗凝，一份用EDTA-K2抗凝。

1.4 方法

1.4.1 儀器定標(biāo) 常規(guī)開機(jī)后用各自的配套定標(biāo)系統(tǒng)對(duì)CRP進(jìn)行定標(biāo)。

1.4.2 質(zhì)量控制 采用配套質(zhì)控品分別在兩臺(tái)儀器上作室內(nèi)質(zhì)控，確保質(zhì)控結(jié)果在允許范圍內(nèi)。

1.5 評(píng)價(jià)方法

1.5.1 重復(fù)性測(cè)定 將本院2008～2010年間由特定蛋白儀檢測(cè)的1832例血清樣本的CRP濃度進(jìn)行分組(見表1);按照CRP濃度的分布情況，選取由QuikRead CRP分析儀測(cè)得的80 mg/L(高)、20 mg/L(中) 、3 mg/L(低)全血標(biāo)本各1例，重復(fù)測(cè)定6次，記錄結(jié)果;將樣本在室溫放置2 h后，重復(fù)上述操作，所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，可觀察到不同濃度水平的批內(nèi)和批間精密度(見表2)。

1.5.2 線性檢測(cè) 1份CRP濃度為140 mg/L的全血標(biāo)本，用新鮮混合血漿(CR P＜1 mg/L)稀釋為以下8個(gè)濃度:140、120、100、80、60、40、20、10 mg/L，按常規(guī)方法測(cè)定 CRP，各個(gè)濃度測(cè)定3次，結(jié)果見表3，并用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行測(cè)定值與理論值相關(guān)性分析。

1.5.3 對(duì)比實(shí)驗(yàn) 按照表1中CRP濃度分布比例，取CRP低值(＜10 mg/L)、中值(10～50 mg/L)和高值(＞50 mg/L)共50份血樣，在QuikRead上檢測(cè)每份標(biāo)本全血和血漿的CRP濃度，在ARRAY360測(cè)定血清CRP濃度，比較3組結(jié)果的相關(guān)性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 線性回歸和相關(guān)性分析均由SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件完成。

2 結(jié)果

見表 1、2、3、4。

表1 1832例血清樣本的CRP濃度分組結(jié)果

表2 不同濃度水平的批內(nèi)和批間精密度

表3 線性稀釋結(jié)果

表4 比對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 討論

C反應(yīng)蛋白(C reactiveprotein，CRP)是急性時(shí)相反應(yīng)中重要的標(biāo)志物之一，在各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤、手術(shù)創(chuàng)傷等時(shí)迅速升高，病變好轉(zhuǎn)時(shí)又迅速降至正常［2］。新生兒期感染性疾病缺乏特異性表現(xiàn)，特別是新生兒敗血癥，病原菌的分離、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，陽(yáng)性率低，使早期診斷受到限制，而CRP可為新生兒感染性疾病的早期診斷提供有效的客觀依據(jù)［3］。連續(xù)、定量、快速測(cè)定CRP，有利于疾病早期診斷、監(jiān)測(cè)療效及預(yù)后判斷，對(duì)抗生素應(yīng)用是否有效，更有獨(dú)特的重要作用。

目前檢測(cè)CRP較為廣泛和成熟的系統(tǒng)是特定蛋白分析儀，本科一直使用ARRAY360檢測(cè)血清CRP，但因標(biāo)本用量大、嬰幼兒采血困難、報(bào)告不及時(shí)等因素，CRP作為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白的優(yōu)勢(shì)不能充分體現(xiàn);而QuikRead CRP分析儀使用簡(jiǎn)便、用血量少(全血20 μl)、2.5分鐘內(nèi)即可檢出結(jié)果。

QuikRead檢測(cè)CRP時(shí)，如樣本濃度＞160 mg/L，則需對(duì)樣本進(jìn)行稀釋;通過(guò)對(duì)近兩年本院血清CRP濃度分布的分析，血清CRP濃度＞160 mg/L的樣本只占1.3%，可見常規(guī)工作中，需要稀釋的樣本很少;重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果顯示QuikRead檢測(cè)全血CRP濃度結(jié)果精確性較高;比對(duì)結(jié)果顯示:CRP的QuikRead血漿濃度和ARRAY360血清濃度的相關(guān)性極好(r=0.998)，優(yōu)于QuikRead全血濃度和ARRAY360血清濃度的相關(guān)性(r=0.964)，也優(yōu)于QuikRead全血濃度和QuikRead血漿濃度的相關(guān)性(r=0.968)，分析原因，QuikRead全血檢定的試劑定標(biāo)是在紅細(xì)胞壓積為40時(shí)測(cè)定的，因此全血CRP濃度受紅細(xì)胞壓積的影響;在進(jìn)行全血CRP線性稀釋試驗(yàn)時(shí)，按照儀器說(shuō)明提供的紅細(xì)胞壓積校正公式將稀釋結(jié)果進(jìn)行了校正，結(jié)果顯示，全血CRP有良好的稀釋線性，線性范圍亦較寬。

QuikRead可檢測(cè)全血或血漿CRP，因?qū)嶋H工作中CRP通常與血常規(guī)聯(lián)單，兩個(gè)項(xiàng)目可共用一管EDTA-K2抗凝全血，我科首選檢測(cè)全血CRP，簡(jiǎn)化操作，方便患者，亦可彌補(bǔ)紅細(xì)胞壓積對(duì)全血CRP濃度的影響。

［1］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.東南大學(xué)出版社，2006:58.

［2］周宓，潘柏申.C反應(yīng)蛋白在臨床應(yīng)用中的進(jìn)展.國(guó)外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè)，2005，26(1):56-57.

［3］昊苔，陳莉亞.血清C反應(yīng)蛋白在新生兒感染時(shí)的變化.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2001，13:46.