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    復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊對(duì)乳腺增生小鼠子宮、卵巢重量影響及作用機(jī)制的研究

    2010-06-02 08:36:08趙文靜趙向上旺建偉剛宏林姜虹王艷宏張曉琳
    中醫(yī)藥信息 2010年3期
    關(guān)鍵詞:花盤(pán)重量空白對(duì)照

    趙文靜,趙向上,旺建偉,剛宏林,姜虹,王艷宏,張曉琳

    (1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150040;2.哈爾濱市第二醫(yī)院,黑龍江 哈爾濱 150056;3.哈爾濱市食品藥品監(jiān)督管理局,黑龍江 哈爾濱 150028)

    乳腺增生病(Hyperplasia of Mammary Gland,HMG)又稱乳腺結(jié)構(gòu)不良,是女性常見(jiàn)、多發(fā)疾病,病變是以乳腺固有組織增生為主的非炎癥性、非腫瘤性病變,主要包括乳腺囊性增生病、小葉增生、腺病、纖維性?。?]。近年來(lái)其癌變率有逐年升高的趨勢(shì)。子宮、卵巢是調(diào)節(jié)性激素的重要器官,它們重量的輕微變化會(huì)影響性激素對(duì)乳房刺激的敏感性及持續(xù)的時(shí)間,而FSH含量的變化是子宮、卵巢的功能正常與否的客觀指標(biāo)。鹿花盤(pán)是梅花鹿 (Cerrus nippon Temminck)每年春季長(zhǎng)新茸時(shí)自然脫落的部分,《神農(nóng)本草經(jīng)》認(rèn)為,該品有溫補(bǔ)肝腎、活血消腫之功效,能治療陰證瘡瘍,乳癰初起,瘀血腫痛等疾患[2]。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用鹿花盤(pán)與其他中藥配伍,制成復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊,觀察其對(duì)乳腺增生小鼠子宮、卵巢重量及重量指數(shù)和對(duì)FSH含量的影響,進(jìn)而判斷乳腺增生的療效及預(yù)后。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 藥材及制劑

    中藥鹿花盤(pán)取材于黑龍江省祿寶益生鹿業(yè)開(kāi)發(fā)有限公司,柴胡、白芍、三棱、莪術(shù)、浙貝母、淫羊藿等中藥由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院提供。復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊濃縮后用蒸餾水配制成濃度分別為217g·L-1、434g·L-1、868g·L-1的低、中、高三種溶液備用。

    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    清潔級(jí)昆明種小白鼠,體重18~22g,雌性,由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物合格證號(hào):黑動(dòng)字第09-2-2號(hào)。

    1.3 藥品及試劑

    苯甲酸雌二醇注射液(Estradiol Benzoate Injection,上海通用藥業(yè)股份有限公司);促卵泡生成素(FSH)放免試劑盒(北京市福瑞生物工程公司);他莫昔芬(Tamoxifen,上海華聯(lián)制藥有限公司)。

    1.4 實(shí)驗(yàn)儀器

    電子天平(梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司);低速離心機(jī)(科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司)。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 模型制備、分組與灌胃劑量

    實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水16h,空白對(duì)照組10只常規(guī)飼養(yǎng),不施加任何藥物,其他小鼠在同等條件下,腹腔注射苯甲酸雌二醇,每2日1次,每次0.5mg·kg-1,共注射15次,在注射苯甲酸雌二醇后第4d小白鼠均出現(xiàn)不同程度的乳腺隆起外觀。取模型制備成功小鼠,按體重隨機(jī)分模型組、他莫昔芬組、鹿低劑量組、鹿中劑量組、鹿高劑量組五組,每組各10只。于造模第5d開(kāi)始分別用藥灌胃治療,空白對(duì)照組不用任何藥物,模型組生理鹽水 15mL·kg-1,他莫昔芬組3.9mg·kg-1,復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊低、中、高劑量組分別是3.25、6.5、13g·kg-1,連續(xù)灌胃 30d[3]。

    2.2 標(biāo)本取材

    連續(xù)灌胃30d后,分離子宮、卵巢,剔除周?chē)闹窘M織等,迅速稱重,測(cè)定子宮、卵巢指數(shù)[4,5]。

    將各組小鼠稱重后摘除眼球各取血3mL,室溫靜置2h后于3000r·min-1離心3min,吸取上部取血清,-20℃保存待測(cè)。依照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。采用放免分析法測(cè)定血清中FSH的含量[6]。

    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用SPSS 12.0軟件,實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間差異顯著性用t檢驗(yàn)比較。

    3 結(jié)果

    3.1 復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊對(duì)乳腺增生小鼠FSH含量的影響

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示,他莫昔芬、鹿中、高劑量組均能升高模型組FSH含量,且有非常顯著性差異(P<0.01),鹿低劑量組與模型組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且鹿花盤(pán)三劑量組彼此無(wú)顯著性差別。結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊對(duì)乳腺增生小鼠FSH含量的影響(±s)

    表1 復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊對(duì)乳腺增生小鼠FSH含量的影響(±s)

    注:與模型組相比較,**P<0.01;與空白對(duì)照組比較,▲▲P<0.01。

    3.48±0.29模型組 15mL 2.57±0.31▲▲他莫昔芬組 3.9mg 3.37±0.22**鹿低劑量組 3.25 2.90±0.48鹿中劑量組 6.5 3.22±0.35**鹿高劑量組 13 3.36±0.36空白對(duì)照組-**

    3.2 復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊對(duì)乳腺增生小鼠子宮、卵巢的影響

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示,模型組與空白對(duì)照組比較,子宮重量增加,且有顯著性差異(P<0.05),鹿高劑量組能明顯降低模型組子宮重量,兩組有顯著性差異(P<0.05),并且鹿高劑量組與空白對(duì)照組子宮重量實(shí)際數(shù)據(jù)非常接近;同時(shí),西藥他莫昔芬組與空白對(duì)照組比較,子宮重量低于空白對(duì)照組,且有顯著性差異(P<0.05),從實(shí)際數(shù)據(jù)也反映出西藥組過(guò)度降低乳腺增生小鼠子宮重量(P<0.05),導(dǎo)致低于正常子宮的重量范圍;在對(duì)乳腺增生小鼠卵巢方面的影響實(shí)驗(yàn)中,鹿低、中、高劑量組與模型組均無(wú)顯著性差別,在這點(diǎn)上,鹿低、中、高三劑量組均不如西藥他莫昔芬組作用更明顯。結(jié)果見(jiàn)表2。

    表2 復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊對(duì)乳腺增生小鼠子宮卵巢的影響(±s,n=10)

    表2 復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊對(duì)乳腺增生小鼠子宮卵巢的影響(±s,n=10)

    注:與模型組相比較,*P<0.05,**P<0.01;與空白對(duì)照組比較,▲P<0.05。

    空白對(duì)照組- 118.51±43.78 0.372±0.119 20.63±7.00 0.067±0.026模型組 15mL 166.39±41.08▲ 0.562±0.127▲ 20.05±8.380 069±0.032他莫昔芬組 3.9mg 78.16±25.55▲** 0.268±0.072▲** 12.62±2.73* 0.044±0.011*鹿低劑量組 3.25 125.94±51.52 0.425±0.180 14.52±5.68 0.049±0.021鹿中劑量組 6.5 161.43±186.35 0.563±0.653 16.34±4.23 0.058±0.014鹿高劑量組 13 118.94±29.26* 0.389±0.090*14.30±6.24 0.047±0.021

    4 討論

    乳房為性激素作用的靶器官,其生長(zhǎng)發(fā)育到衰退均受到下丘腦-垂體-卵巢軸的調(diào)控,子宮內(nèi)膜也受該系統(tǒng)的控制,所以卵巢、子宮、乳房三者在發(fā)生乳腺增生病的時(shí)候關(guān)系最為密切、直接。而子宮、卵巢起著調(diào)節(jié)和平衡雌、孕激素的重要作用,它們?cè)谛螒B(tài)重量上的輕微變化常常會(huì)引起女性性激素水平明顯的起落,一旦發(fā)生乳腺增生病,往往伴有子宮、卵巢在形態(tài)學(xué)上的異常變化,由此也可以初步推斷到其調(diào)節(jié)內(nèi)分泌的功能也會(huì)有相應(yīng)的失調(diào);婦女的月經(jīng)周期基本可分為卵泡期、黃體期,這兩個(gè)期性激素水平會(huì)有其周期性的變化,而FSH含量變化可以影響及反應(yīng)子宮、卵巢調(diào)節(jié)性激素的功能,進(jìn)而間接影響性激素對(duì)乳房刺激的強(qiáng)度和持續(xù)的時(shí)間。

    本課題是通過(guò)復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊的不同劑量組和西藥對(duì)照組相比較,來(lái)觀察該膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性乳腺增生小鼠子宮、卵巢重量的變化,結(jié)果是鹿高劑量組能明顯降低乳腺增生模型組子宮重量,差異性顯著,且實(shí)際數(shù)據(jù)接近空白對(duì)照組子宮重量,提示該劑量有很好的恢復(fù)乳腺增生小鼠子宮形態(tài)作用,同時(shí)也優(yōu)于西藥組對(duì)子宮重量過(guò)度降低的作用,而鹿低、中劑量組在這方面與模型組比較沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在對(duì)卵巢重量影響方面,鹿三個(gè)劑量組弱于西藥對(duì)照組;在對(duì)于FSH含量影響方面,鹿中、高劑量組療效較顯著。

    由此可以推斷,復(fù)方鹿花盤(pán)膠囊一定劑量可以直接作用于子宮,恢復(fù)實(shí)驗(yàn)性乳腺增生小鼠子宮重量,并通過(guò)調(diào)節(jié)FSH含量間接的促進(jìn)子宮、卵巢功能,加強(qiáng)對(duì)下丘腦-垂體-卵巢軸的調(diào)控,從而平衡性激素的含量而使乳腺組織受到性激素良性、周期性的合理刺激,最終達(dá)到治療乳腺增生的目的。

    [1]蔡國(guó)良,王友和.對(duì)乳腺增生的再認(rèn)識(shí)[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,25(1):24-25.

    [2]王振玉.鹿花盤(pán)注射液研究[J].生化藥物雜志,1987(2):10-12.

    [3]李建國(guó),朱建宙,張玉芝,等.“藥味乳康罩”抑制小白鼠乳腺小葉增生病理組織學(xué)觀察研究[J].河南中醫(yī),1993,13(3):111-112.

    [4]張少卓,柳占彪.乳樂(lè)寧對(duì)小鼠雌激素活性的影響[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2004,23(4):41-42.

    [5]鄒世潔,陳小野,蔣小麗,等.雌激素對(duì)大鼠性腺乳腺影響觀察[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2006,24(1):52-54.

    [6]戴麗軍,廖軍,黃月玲,等.Fmr1基因敲除小鼠血清雌性激素含量的比較研究[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志,2006,16(8):459-462.

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