類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者IL-17、IL-18、IL-6和TNF-α檢測的意義

陳良東 林潔 周劍波 顧麗萍

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎又稱類風(fēng)濕(rheum atoid arth ritis,RA)，是一種可累及全身的慢性炎癥性自身免疫性疾病，以慢性、對稱性、多滑膜關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)外病變?yōu)橹饕卣?，其發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，與多種因素有關(guān)。各種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)的異常表達(dá)在RA的發(fā)病過程中發(fā)揮重要的作用。現(xiàn)將我院2006年3月～2008年4月收治的RA患者各種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)的檢測結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 按照美國風(fēng)濕病協(xié)會(ACR)1987年修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)選擇RA患者,根據(jù)Stoke指數(shù)分為活動期和穩(wěn)定期[1]。RA患者均為我院2006年3月～2008年4月的患者。活動期RA患者40例，其中男性9例，女性31例，年齡36～63歲，平均(50.5±6.62)歲；穩(wěn)定期RA患者40例，其中男性11例，女性29例，年齡37～68歲，平均(48.6±8.52)歲；對照組40例為我院正常體檢健康者，性別、年齡與患者組相匹配。

1.2 方法 白細(xì)胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量的測定均采用雙抗夾心ELISA法，試劑盒由第四軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)教研室生產(chǎn)；白細(xì)胞介素-17(IL-17)和白細(xì)胞介素-18(IL-18)檢測試劑盒購自美國eBioscience公司；所有操作均嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 RA患者不同病期四項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果 活動期RA患者的血清中IL-17、IL-18、IL-6和TNF-α含量明顯高于穩(wěn)定期RA患者(P＜0.01)和健康對照組(P＜0.01)；穩(wěn)定期RA患者的血清中IL-17和IL-18含量高于健康對照組(P＜0.05)，而IL-6和TNF-α含量與對照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，結(jié)果見表1。

2.2 四項(xiàng)指標(biāo)間的相關(guān)分析 RA活動期患者四項(xiàng)指標(biāo)間(除IL-17/IL-18，r=0.122，P＞0.05)均呈正相關(guān)，結(jié)果見表2。

2.3 血清IL-17、IL-18、IL-6、TNF-α與RA病情活動性的關(guān)系 血清IL-17、IL-18、IL-6、TNF-α與RA病情活動性有顯著差異(P＜0.01)，結(jié)果見表3。

3 討論

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)，是一種病因尚未闡明的慢性炎癥性疾病，主要累及關(guān)節(jié)滑膜，屬于自身免疫性疾病。在RA的發(fā)生、發(fā)展過程中，伴隨著多種免疫細(xì)胞的活化和細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)的參與。IL-17是T細(xì)胞源性促炎因子，主要由T細(xì)胞，特別是記憶型T細(xì)胞，如CD4+，CD45RO+產(chǎn)生。在RA病人滑膜上清液中，發(fā)現(xiàn)有生物活性的IL-17，并在其滑膜中發(fā)現(xiàn)高水平的IL-17。Chabaud等[2]發(fā)現(xiàn)，IL-17通過滑膜細(xì)胞使MMP-1的表達(dá)水平增加5倍，在抗IL-17的抗體存在的條件下，RA滑膜細(xì)胞MMP-1的表達(dá)水平和膠原酶的活性降低50%，I型膠原的C端的碎片釋放于表層的量也降低50%，這些表明IL-17在RA中直接起到了損傷作用。

IL-17可通過誘導(dǎo)其他細(xì)胞因子、蛋白酶和黏附分子的產(chǎn)生發(fā)揮其在RA中的作用。IL-17可通過PI3K/AKT和NF-κB途徑來增強(qiáng)自身的表達(dá)量，促進(jìn)成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等分泌IL-6、IL-8，并導(dǎo)致T細(xì)胞的增殖。IL-17與TNF-α關(guān)系密切，IL-17可增加TNF-α刺激基因6(tum or necrosis factor alpha-simulated gene-6,TSG-6)的表達(dá),這一作用存在時(shí)間和劑量的依賴性，且依賴于促有絲分裂活化蛋白激酶p38的存在。IL-17與IL-1、TNF-α合用可增強(qiáng)成骨細(xì)胞樣細(xì)胞中激活蛋白-1(AP-1)家族成員、NF-κB的表達(dá),且可上調(diào)TNF-α刺激基因6(TSG-6)、IL-6、IL-8的表達(dá)水平[3-4]。IL-17的相關(guān)融合蛋白和抗體可明顯降低CIA鼠的關(guān)節(jié)炎癥，減輕骨組織的破壞，并下調(diào)IL-6等炎癥介質(zhì)的表達(dá)。表明IL-17可作為治療RA的臨床療效和預(yù)后判斷的重要指標(biāo)。

表1 RA患者活動期、穩(wěn)定期四項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果(±s)

表1 RA患者活動期、穩(wěn)定期四項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果(±s)

注：與穩(wěn)定期RA患者血清相比，a P＜0.01；與對照組RA患者血清相比，b P＜0.01；與對照組RA患者血清相比，c P＜0.05。

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表2 40例活動期IL-17、IL-18、IL-6、TNF-α間相關(guān)分析

表3 血清IL-17、IL-18、IL-6、TNF-α與RA病情活動性的關(guān)系

IL-18由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，可協(xié)同IL-12誘導(dǎo)TNF-α的表達(dá)，促進(jìn)關(guān)節(jié)炎的發(fā)生和滑膜組織的增生。IL-18刺激關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞iNOS、COX-2、IL-6等基因的表達(dá),誘導(dǎo)產(chǎn)生大量NO、PGE2,參與關(guān)節(jié)的炎癥、損傷、退行性變等[5]。IL-18可誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞生產(chǎn)MMP-1、MMP-3、MMP-13等而促進(jìn)軟骨組織的降解。此外研究證實(shí)，IL-18經(jīng)NF-κB和PI3K途徑上調(diào)TNF受體、VCAM-1、ICAM-1的表達(dá)，從而促進(jìn)單核/巨噬細(xì)胞生產(chǎn)TNF-α[6]。

IL-18可直接刺激RA患者的滑膜細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α和IL-6，此效用成劑量依賴性，在體外TNF-α可增加滑液IL-18m RNA的表達(dá)。有文獻(xiàn)報(bào)道，RA患者不僅血清中IL-18增高，而且關(guān)節(jié)液中的IL-18顯著高于血清。IL-18單克隆抗體、IL-18結(jié)合蛋白等可明顯改善RA患者的病情，控制炎癥的進(jìn)一步發(fā)展，表明IL-18可作為治療RA的臨床療效和預(yù)后判斷的重要指標(biāo)。

TNF-α和IL-6均由單核/巨噬細(xì)胞在外來刺激(如病毒感染或內(nèi)毒素等)作用下產(chǎn)生的炎癥性細(xì)胞因子，在RA發(fā)病過程中發(fā)揮重要的作用。TNF-α為具有廣泛生物活性的多肽調(diào)節(jié)因子，在RA中不僅參與滑膜炎癥反應(yīng)，同時(shí)也破壞軟骨，誘發(fā)關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的破壞，對滑膜凋亡也有重要影響[7]。

IL-6是一種促炎癥細(xì)胞因子，刺激B細(xì)胞產(chǎn)生多種炎癥介質(zhì)，參與免疫調(diào)節(jié)。在RA的致病作用中，IL-6與IL-1β和TNF-α不同,它不直接刺激滑膜纖維母細(xì)胞和軟骨細(xì)胞產(chǎn)生PGE2和膠原酶,而是增加IL-1β和TNF-α的某些生物效應(yīng)的放大因子,并能誘導(dǎo)肝臟合成急性期蛋白和類風(fēng)濕因子[8]。活動期RA患者血清中IL-6明顯升高,在緩解期又迅速下降至基本正常水平。

本研究結(jié)果顯示，患者活動期四項(xiàng)指標(biāo)含量水平顯著高于穩(wěn)定期患者和正常對照組(P＜0.01)；穩(wěn)定期患者的IL-17的含量高于健康對照組(P＜0.05)，與張曲濤等報(bào)道一致[9]。穩(wěn)定期患者的IL-18的含量高于健康對照組(P＜0.05)，與張玲英等報(bào)道一致[10]。穩(wěn)定期患者的IL-6和TNF-α與健康對照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。以上結(jié)果提示四項(xiàng)指標(biāo)參與RA的病理損傷過程，促進(jìn)病情的發(fā)展。在患者四項(xiàng)指標(biāo)的檢測結(jié)果中，除IL-17與IL-18之間無相關(guān)性外，其余各檢測結(jié)果之間均呈正相關(guān)，表明在RA的病情發(fā)生、發(fā)展過程中，四項(xiàng)指標(biāo)的含量與RA患者的病情密切相關(guān)，有助于RA患者的臨床療效的觀察。在RA病人中具有較高水平的IL-17、IL-18、IL-6和TNF-α其活動期人數(shù)較穩(wěn)定期人數(shù)顯著增多(P＜0.01)，結(jié)果提示血清中IL-17、IL-18、IL-6和TNF-α水平的測定對RA患者病情活動性的判斷有一定的價(jià)值。

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