白介素細(xì)胞因子在變應(yīng)性鼻炎的作用機(jī)理

林志斌 李添應(yīng) 陳冬

變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis，AR)又稱過敏性鼻炎，是發(fā)生在鼻黏膜的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)。特應(yīng)性個(gè)體在接觸致敏原后由IgE介導(dǎo)的介質(zhì)(主要是組胺)釋放、并有多種免疫活性細(xì)胞和細(xì)胞因子等參與的鼻黏膜慢性炎癥反應(yīng)性疾病，可引起多種并發(fā)癥。近年來，隨著生活環(huán)境的變化，其發(fā)病率呈上升趨勢。有研究指出，變應(yīng)性鼻炎約占全部鼻炎的40%。變應(yīng)原經(jīng)呼吸道進(jìn)入人體，經(jīng)巨噬細(xì)胞處理，刺激B淋巴細(xì)胞變?yōu)闈{細(xì)胞，后者產(chǎn)生特異性IgE抗體。當(dāng)變應(yīng)原物質(zhì)再次進(jìn)入鼻黏膜，使肥大細(xì)胞和嗜堿細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)發(fā)生變異，釋放組胺、白細(xì)胞三烯、五羥色胺等多種化學(xué)介質(zhì)，使小血管擴(kuò)張，血管通透性增高，滲出增加，炎性細(xì)胞浸潤(以嗜酸細(xì)胞為主)，組織水腫，神經(jīng)末梢興奮性增強(qiáng)等，上述病理變化即可導(dǎo)致相應(yīng)的臨床癥狀和體征。

近年來有研究指出，變應(yīng)性鼻炎發(fā)病與白細(xì)胞介素等細(xì)胞因子有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)分析了變應(yīng)性鼻炎患者外周血中單個(gè)核細(xì)胞，測定誘導(dǎo)上清液中白介素等細(xì)胞的水平，探討其在變應(yīng)性鼻炎發(fā)病中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2006年2月～2009年12月我院耳鼻喉科收治的變應(yīng)性鼻炎患者86例作為實(shí)驗(yàn)組，所有患者的診斷均符合1997年中華醫(yī)學(xué)會耳鼻咽喉科學(xué)分會修訂的關(guān)于變應(yīng)性鼻炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。86例患者中男性45例，女性41例；年齡12～36歲，平均(27.65±5.62)歲；病程為1.5～6.5年。選取同期來我院體檢的健康者43例作為對照組，其中男性28例，女性15例，年齡14～38歲，平均(28.32±5.83)歲。兩組患者在性別、年齡等一般狀況比較，P＞0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

表1 兩組受試者白介素等細(xì)胞因子的檢測結(jié)果(±s，pg/ml)

表1 兩組受試者白介素等細(xì)胞因子的檢測結(jié)果(±s，pg/ml)

注：與對照組比較, P＜0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

組別 病例數(shù) IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IFN-γ實(shí)驗(yàn)組 86 68.5±10.8 276.5±2.3 989.8±52.9 325.8±20.8 65.4±6.8對照組 43 73.6±11.2 84.9±15.6 552.8±108.9 102.8±45.8 78.9±4.6

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合1997年中華醫(yī)學(xué)會耳鼻咽喉科學(xué)分會修訂的關(guān)于變應(yīng)性鼻炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②性別不限；③年齡16～70周歲；④病程＞1年者；⑤所有受試者在受檢前1周均停用任何藥物。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.2.1 不符合診斷標(biāo)準(zhǔn)及納入標(biāo)準(zhǔn)者。

1.2.2.2 雖符合診斷標(biāo)準(zhǔn),但有下列情況之一者 ①需長期服用阿司匹林或糖皮質(zhì)激素的患者；②伴發(fā)支氣管哮喘、特異性皮炎的患者；③合并慢性鼻竇炎、鼻息肉或鼻中隔明顯偏曲等鼻病者;④伴發(fā)心、腦、腎、肝等臟器器質(zhì)性疾病者; ⑤妊娠期患者。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試藥 白介素定量酶聯(lián)免疫試劑盒購自武漢新啟迪生物科技有限公司,37℃電熱恒溫水溫箱(上海棱譜儀器儀表有限公司),全自動(dòng)洗板機(jī)(北京八方世紀(jì)科技有限公司),全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀(美國伯樂公司生產(chǎn)的CODA型) 。

1.3.2 操作方法 抽取受試者外周血3ml，置于肝素抗凝管中，加等體積D-Hanks液稀釋抗凝血，用淋巴細(xì)胞分離液制備PBMCS，經(jīng)離心洗滌后，用20% FCS-1640液調(diào)整濃度為5×106/ml，于24孔板中,加變應(yīng)原粉塵螨誘導(dǎo)劑,置于37℃孵育箱中孵育60min，取誘導(dǎo)上清液檢測細(xì)胞因子水平。

采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進(jìn)行細(xì)胞因子檢測，嚴(yán)格按照說明進(jìn)行操作,計(jì)算單位:pg/ml。在相應(yīng)細(xì)胞因子檢測板中加入對應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品及待測樣品，在室溫中反應(yīng)60min，洗板后，加生物素化的抗人白介素抗體，常溫反應(yīng)60min，加入酶聯(lián)物，室溫反應(yīng)，加相應(yīng)的顯色劑顯色，用終止液終止反應(yīng)，于酶標(biāo)儀上在450nm處測A值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖并通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出樣品中相應(yīng)細(xì)胞因子的濃度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)處理應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，計(jì)數(shù)資料用率或百分比表示，等級資料采用秩和檢驗(yàn),多個(gè)均數(shù)間兩兩比較采用方差齊性檢驗(yàn)、方差分析及q檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組受試者白介素等細(xì)胞因子的檢測結(jié)果，見表1。由表1可知,變應(yīng)性鼻炎患者血清IL-2、IFN-γ水平低于對照組,二者分別比較，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組受試者血清IL-4、IL-5、IL-6水平與對照組比較顯著增高，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病機(jī)理目前尚未完全明確。目前，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，其發(fā)生發(fā)展多與IgE參與的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)有關(guān)[1]。T細(xì)胞系列中的Th細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子失衡在變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病中起重要作用，Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞間的免疫反應(yīng)失衡可能是導(dǎo)致變應(yīng)性鼻炎發(fā)病的重要免疫學(xué)基礎(chǔ)。IL-2、IFN-γ主要反映Th1細(xì)胞水平的細(xì)胞因子；IL-4、IL-5是主要反映Th2細(xì)胞水平的細(xì)胞因子；IL-6是處于分化晚期的B細(xì)胞生長因子，主要反映疾病是否處于急性期[2]。Th1/Th2 細(xì)胞因子間的平衡對人體免疫功能的調(diào)控有重要意義。IL-2、IFN-γ能增Th1細(xì)胞的活性，增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能；并能夠通過抑制Th2細(xì)胞增殖的作用，抑制體液免疫的反應(yīng)性。它還能夠抑制Th2細(xì)胞產(chǎn)生IL-4等細(xì)胞因子，對疾病的轉(zhuǎn)歸具有正性調(diào)節(jié)的作用[3]。IL-4、IL-5增加，提示Th2細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答增加[4-5]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，變應(yīng)性鼻炎患者血清中IL-4、IL-5的水平顯著高于對照組, IL-2、IFN-γ的水平顯著低于對照組,這幾種細(xì)胞因子的異常反映了變應(yīng)性鼻炎患者免疫調(diào)節(jié)功能的紊亂,并且表明Th2免疫應(yīng)答增強(qiáng), IL-4、IL-5增加,促進(jìn)了炎癥的發(fā)生發(fā)展, IL-6增加則反應(yīng)疾病處于急性期。

綜上所述,本研究通過對變應(yīng)性鼻炎患者血清白介素等細(xì)胞因子的檢測，探討了其與變應(yīng)性鼻炎發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。IL-4、IL-5增加反應(yīng)的Th2細(xì)胞的高表達(dá)及IL-2、IFN-γ減少反應(yīng)的Th1細(xì)胞的低表達(dá)，與變應(yīng)性鼻炎發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，對本病的臨床診斷并判斷療效提供了免疫學(xué)依據(jù)，這可能為變應(yīng)性鼻炎臨床辨證治療提供較為客觀的免疫學(xué)指標(biāo)。

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