巨細(xì)胞病毒感染與冠心病患者的白細(xì)胞介素-10水平升高相關(guān)

研究顯示，炎癥參與了動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)生、發(fā)展以至最終血栓形成[1-2]。還有研究表明，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)與缺血性心臟病有關(guān)，炎癥標(biāo)致物C-反應(yīng)蛋白和其它細(xì)胞因子，如白介素(Interleukin，IL)-1和IL-6，被認(rèn)為能增加動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥反應(yīng)[1-2]，而IL-10，則被認(rèn)為是細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中的負(fù)相調(diào)節(jié)細(xì)胞因子[3]。IL-10主要由Th2、巨噬細(xì)胞和活化B細(xì)胞產(chǎn)生，它抑制T細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子，如：IL-1、IL-6、γ-干擾素和腫瘤壞死因子-α，并抑制抗原提呈和免疫激活過(guò)程中細(xì)胞表面的分子表達(dá)，在抑制細(xì)胞免疫的同時(shí)，增強(qiáng)體液免疫[4-5]。體外和動(dòng)物試驗(yàn)顯示，IL-10在動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)生和發(fā)展中，有抗炎和抑制病變的作用[6-9]，但臨床上，有關(guān)冠心病患者IL-10水平的研究結(jié)果并不一致[10-13]。

巨細(xì)胞病毒(Cytomegalovirus，CMV)、單純皰疹病毒-1型[14]、單純皰疹病毒-2型[15]、肺炎衣原體[16-17]等微生物感染可能參與心血管病的發(fā)生[18]，造成冠狀動(dòng)脈粥樣斑塊不穩(wěn)定，加速動(dòng)脈粥樣硬化病變和增加心血管事件[18]。有研究表明，在冠心病患者，CMV感染參與上調(diào)局部和循環(huán)中的炎癥細(xì)胞因子，如：IL-1，IL-6和C反應(yīng)蛋白[19], 但CMV感染對(duì)IL-10水平的影響知之甚少，因此，本研究意欲探討CMV感染對(duì)冠心病患者血清IL-10水平的影響。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇水利醫(yī)院住院患者188例，其中冠心病患者106例，對(duì)照組患者82例。所有10例冠心病患者均行冠狀動(dòng)脈造影，證實(shí)有1支或1支以上的主要冠脈分支存在≥50% 的狹窄。對(duì)照組患者為或有不典型冠心病癥狀，或有冠心病傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素，而懷疑患有冠心病，但經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影證實(shí)冠脈壁光滑，而在臨床上排除患有冠心病。另外，57例冠狀動(dòng)脈造影顯示有冠脈管壁有不規(guī)則病變者，被排除出本研究。

1.2 一般資料

188例患者的基本統(tǒng)計(jì)學(xué)資料見(jiàn)表1。在冠心病組，患者合并糖尿病、高血壓的比例顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。 冠心病組與對(duì)照組相比，CMV IgG陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)學(xué)差異無(wú)顯著性(38.9% vs.37.6%，P>0.05 )。冠心病組IL-10水平顯著高于對(duì)照組，7.3(3.0 -12.5) pg/ml vs. 5.9 (3.2 - 10.4) pg/ml(P= 0.043)。

1.3 方法

1.3.1 IL-10的相關(guān)因素 本研究分析了影響IL-10潛在的相關(guān)因素包括：年齡、性別、吸煙、糖尿病、血脂紊亂、高血壓、體重指數(shù)、體力活動(dòng)少和血清CMV- IgG陽(yáng)性。吸煙狀態(tài)分為目前吸煙、既往吸煙(停止吸煙>1個(gè)月至<40年)和不吸煙(從不吸煙或戒煙 ≥40年)。糖尿病患者指空腹血糖 ≥7.0 mmol/L (126 mg/dl) 或者已經(jīng)使用口服降糖藥物或胰島素治療者。高血壓指收縮壓 ≥140 mmHg和/或舒張壓 ≥90 mmHg或已經(jīng)應(yīng)用降壓藥物治療的患者。血脂紊亂指空腹總膽固醇 ≥220 mg/dl (5.72 mmol/L), 或甘油三脂 ≥200 mg/dl (2.26 mmol/L), 或HDL-C<40 mg/dl (1.04 mmol/L), 或經(jīng)計(jì)算的LDL-C ≥140 mg/dl (3.64 mmol/L), 或者已接受調(diào)脂治療。從事較多腦力勞動(dòng)者被認(rèn)為體力活動(dòng)少。

1.3.2 試驗(yàn)技術(shù) 患者入院后，取過(guò)夜空腹血。標(biāo)本采集后放置-80℃冰箱保存。使用美國(guó)BioSource International生產(chǎn)(雙單抗夾心法)的高靈敏度人IL-10 ELISA試劑，定量測(cè)量IL-10，檢測(cè)限度為 0.3 pg/ml，組間變異為 7.8%。CMV (AD 169)-IgG檢測(cè)試劑盒購(gòu)于中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所，其原理基于間接固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，根據(jù)陰性和陽(yáng)性對(duì)照，得出CMV IgG陽(yáng)性界值，CMV IgG陽(yáng)性表示既往CMV感染。

表1 研究對(duì)象的一般資料

注：括號(hào)內(nèi)為百分?jǐn)?shù)；290例患者(83.3%)的吸煙資料可用

1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析 記數(shù)資料采用Pearson χ2檢驗(yàn)或Fisher檢驗(yàn)進(jìn)行分析。體重指數(shù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用t檢驗(yàn)分析。IL-10為非正態(tài)分布，用中位數(shù)及(25%和75%)百分位數(shù)表示，兩組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)(Mann-Whitney U 檢驗(yàn))。所有個(gè)體(n=288)，據(jù)計(jì)算出的IL-10中位數(shù)值(6.84 pg/ml)，分高、低IL-10組[20]，以高IL-10作為應(yīng)變量，其它可能的相關(guān)因素作為因變量，以Logistic回歸分析IL-10的影響因素，并用調(diào)整后的危險(xiǎn)度比值比(OR)和95%的可信區(qū)間表示相關(guān)因素對(duì)IL-10的影響。P<0.05統(tǒng)計(jì)學(xué)差異具有顯著性。SPSS 10統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 IL-10升高相關(guān)的單因素分析

如表2所示，高IL-10組的CMV IgG陽(yáng)性率顯著高于低IL-10組的CMV IgG陽(yáng)性率(46.8% vs. 30.4%,P<0.001)，而性別、年齡、吸煙、高血壓、糖尿病和血脂紊亂在高、低IL-10組間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 在冠心病組，高IL-10 組中的CMV IgG陽(yáng)性率顯著高于低IL-10組的CMV IgG陽(yáng)性率(48.1% vs. 28.6 %，P<0.001)，但在對(duì)照組患者的高、低IL-10 組中，未見(jiàn)CMV IgG陽(yáng)性率的顯著差異(40.4% vs. 35.6%，P=0.588)，見(jiàn)表3。

2.3 IL-10升高相關(guān)因素的多元Logistic回歸分析

表4為高IL-10的每個(gè)相關(guān)因素調(diào)整后的OR值和95%的可信區(qū)間。在冠心病組，只有CMV IgG陽(yáng)性與高IL-10獨(dú)立相關(guān)，調(diào)整的OR值為2.3(1.6～3.4，P<0.001)。在對(duì)照組，CMV IgG陽(yáng)性與高IL-10調(diào)整后的OR值為1.1(0.5～2.5，P=0.83)。調(diào)整變量包括年齡、性別、吸煙、高血壓、血脂紊亂、糖尿病及較少體力活動(dòng)。

3 討論

本研究表明：在冠心病患者，CMV感染與血清IL-10水平升高獨(dú)立相關(guān)。

CMV感染與冠心病患者血清IL-10水平升高相關(guān)的機(jī)制，可能與CMV感染刺激體內(nèi)Th2細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞產(chǎn)生IL-10有關(guān)[4-5]。盡管體外研究顯示單核細(xì)胞被CMV感染后不能產(chǎn)生IL-10[21]，但CMV感染后，腎移植患者血漿IL-10水平升高[22]，肺組織和支氣管肺泡灌洗出的細(xì)胞中IL-10mRNA 水平較高，支氣管肺泡灌洗液中的IL-10升高[23]。本研究也表明CMV感染與冠心病患者高IL-10水平相關(guān)。因此，CMV體內(nèi)感染可能與疾病相關(guān)因素協(xié)同作用于IL-10的產(chǎn)生。

表2 高IL-10相關(guān)因子的單因素分析

注：高、低IL-10組據(jù)所有個(gè)體的IL-10水平的中位數(shù)(6.84 pg/ml)界定;括號(hào)內(nèi)為百分?jǐn)?shù)；290例患者(83.3%)的吸煙資料可用

表3 高、低IL-10組中的CMV IgG陽(yáng)性率比較

注：高、低IL-10組據(jù)所有個(gè)體的IL-10水平的中位數(shù)(6.84 pg/ml)界定;括號(hào)內(nèi)為百分?jǐn)?shù)

表4 高IL-10影響因素的多元Logistic回歸分析 [調(diào)整后的OR值(95% 可信區(qū)間)]

注：aP<0.001

本研究資料雖然未顯示冠心病和冠狀動(dòng)脈壁光滑的CMV感染率有顯著差異，但CMV感染對(duì)IL-10水平的影響主要是在冠心病患者，而對(duì)冠狀動(dòng)脈壁光滑者的影響不顯著。結(jié)合其它研究報(bào)道，有理由認(rèn)為，在某些冠心病患者(IL-10產(chǎn)生與遺傳相關(guān)[24-25])，CMV感染不僅參與上調(diào)局部和循環(huán)中的致炎細(xì)胞因子，如：IL-1，IL-6和C反應(yīng)蛋白[19]，也與抗炎細(xì)胞因子IL-10的水平增加有關(guān)。因此，冠心病時(shí)，體液循環(huán)中和動(dòng)脈粥樣病變的局部，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)可能處于超敏狀態(tài)，致炎和抗炎細(xì)胞因子水平都增加，而這種有個(gè)體差異的細(xì)胞因子超敏狀態(tài)激活或維持，可能與CMV感染有關(guān)。換言之，冠心病與CMV感染使患者的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)處于超敏狀態(tài)有關(guān)，增高的細(xì)胞因子還可能參與免疫細(xì)胞的激活，由此產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。基于此，將外源性IL-10用于CHD的治療值得商榷，也許將冠心病患者血中的細(xì)胞因子超敏狀態(tài)下調(diào)至正常，比給予患者外源性IL-10[20]，更有益于冠心病的預(yù)后。因?yàn)楸狙芯窟€表明，冠狀動(dòng)脈光滑者的IL-10水平比冠心病患者低。我們還認(rèn)為，CMV感染誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生IL-10原因，也有可能使CMV更容易逃逸機(jī)體的免疫反應(yīng)清除。無(wú)論如何，冠心病患者CMV感染與IL-10升高的意義，需要謹(jǐn)慎的解釋和進(jìn)一步研究。

有報(bào)道高膽固醇血癥的IL-10水平較高[26]，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑[27]和β受體阻滯劑[28]可降低IL-10水平，而類固醇激素的應(yīng)用則有上調(diào)IL-10水平的作用[29]。本研究中的所有個(gè)體均為住院患者，藥物治療對(duì)IL-10水平可能有一定的影響。盡管如此，本研究資料未顯示傳統(tǒng)的危險(xiǎn)因素，如：高血壓、血脂紊亂、糖尿病、吸煙和體重指數(shù)對(duì)冠心病患者的血清IL-10水平有顯著影響。

本研究中有二方面局限性。首先，特異性的CMV IgG陽(yáng)性或陰性，不是衡量CMV感染與否的金標(biāo)準(zhǔn)，但是，與CMV IgG陰性個(gè)體相比，CMV IgG陽(yáng)性可認(rèn)為是經(jīng)常性的、近期的、或較嚴(yán)重的CMV慢性感染。其次，本研究設(shè)計(jì)為橫斷面病例對(duì)照研究，因此，我們只能據(jù)此提出假設(shè)，而非因果關(guān)系的證明。

總之，本研究表明CMV感染與冠心病患者的IL-10升高相關(guān)，CMV感染可能增加冠心病患者IL-10產(chǎn)生。因此，我們認(rèn)為，在冠心病患者，CMV感染的免疫應(yīng)答可能是一個(gè)影響細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜反應(yīng)。

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