助陽舒心方抗抑郁作用研究

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(1.武漢工業(yè)學(xué)院 醫(yī)學(xué)院,湖北 武漢 430023；2.臺(tái)州醫(yī)院,浙江 臺(tái)州 317000)

抑郁癥(Depression)是指以顯著而持久的情緒低落、活動(dòng)能力減退、思維與認(rèn)知功能遲緩為主要臨床特征的一類心境障礙?？蓺w于中醫(yī)“虛勞病”范疇，病位主要在肝腎，同時(shí)兼及心脾，病機(jī)以陽氣不足、升發(fā)無力為主，可出現(xiàn)痰、瘀等病理產(chǎn)物。其中，腎陽虧虛是抑郁癥的發(fā)病基礎(chǔ)，肝陽虧虛、虛氣郁滯是抑郁癥的發(fā)病關(guān)鍵，運(yùn)用益氣助陽中藥治療可取得較好的療效[1-3]。本文是以小鼠懸尾、游泳、利血平導(dǎo)致眼瞼下垂等實(shí)驗(yàn)為觀察項(xiàng)目，探討助陽舒心方的抗抑郁效果。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器 恒溫水浴鍋(型號(hào)：B-260，上海亞榮生化儀器廠)；JY6001型電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；1/100S電子秒表。

1.2 藥品與試劑 助陽舒心方中巴戟天、石菖蒲、肉桂等藥材均購自武漢市湖北金貴中藥飲片有限公司；實(shí)驗(yàn)用雄性昆明小鼠由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，體重為(25±5)g。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 供試藥制備 根據(jù)臨床助陽舒心方組方,依據(jù)《中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法》[4]中動(dòng)物與人體表比換算法, 由成人劑量換算成小鼠用藥量。提取方法：藥材粉碎至一定細(xì)度，加8倍量水，浸泡30 min，煎煮60 min，傾出藥液，壓濾，藥渣加入4倍量水，煎煮45 min，壓濾。二次煎煮均回收餾出液。合并液體，減壓濃縮至一定濃度，加入乙醇至終濃度達(dá)60%,低溫存放48 h，過濾沉淀，回收乙醇，調(diào)整至濃度為1 g/mL(藥材總質(zhì)量/體積)。

2.2 動(dòng)物分組及給藥量 實(shí)驗(yàn)用小白鼠根據(jù)實(shí)驗(yàn)組數(shù)隨機(jī)分成3組，每組10只。低劑量組、中劑量組、高劑量組分別按2 g/kg,5 g/kg，12.5 g/kg(藥材總質(zhì)量/小鼠體重)計(jì)算小鼠灌胃量。

2.3 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)(Tail Suspension Test,TST) 4組小鼠(生理鹽水模型組，藥物低劑量組、中劑量組和高劑量組)，適應(yīng)環(huán)境1周后，均按劑量要求灌胃給藥，每日1次,連續(xù)給藥7 d，并于實(shí)驗(yàn)第1，3，7 d進(jìn)行懸尾實(shí)驗(yàn)測(cè)試。實(shí)驗(yàn)前24 h動(dòng)物單籠飼養(yǎng)，禁食不禁水。測(cè)試當(dāng)天各組動(dòng)物于給藥1 h后，用膠布將小鼠尾在距尾尖2 cm處粘于懸尾平衡支架,勿使小鼠尾部扭曲折疊，使其頭部向下懸掛呈倒懸狀，頭部距離桌面15 cm，每只小鼠懸尾6 min，前2 min適應(yīng)，記錄后4 min內(nèi)的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間(不動(dòng)指小鼠除呼吸外所有肢體均不動(dòng))。

2.4 小鼠游泳實(shí)驗(yàn)(Forced Swimming Test,FST) 4組小鼠(生理鹽水模型組，藥物低劑量組、中劑量組和高劑量組)，適應(yīng)環(huán)境1周后，均按劑量要求灌胃給藥,每日1次，連續(xù)給藥7 d，并于實(shí)驗(yàn)第1，3，7 d進(jìn)行游泳實(shí)驗(yàn)測(cè)試。實(shí)驗(yàn)前24 h動(dòng)物進(jìn)行游泳訓(xùn)練15 min，并單籠飼養(yǎng)，禁食不禁水。實(shí)驗(yàn)時(shí)將給藥1 h后的小鼠單只放入直徑約18 cm，水深18 cm,水溫(25±1)℃的圓形容器內(nèi)，適應(yīng)2 min后開始計(jì)算后4 min內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間(漂浮不動(dòng)狀態(tài)，僅露出鼻孔保持呼吸，四肢偶爾劃動(dòng)以保持身體不至于沉下去)。

2.5 利血平所致上眼瞼下垂實(shí)驗(yàn) 5組雄性昆明小鼠(即正常組,利血平組，低劑量藥物+利血平組，中劑量藥物+利血平組，高劑量藥物+利血平組)。適應(yīng)環(huán)境1周后，均灌胃給藥，每日1次，連續(xù)給藥7 d，于第7 d測(cè)試。測(cè)試實(shí)驗(yàn)當(dāng)天于給藥后1 h，正常組腹腔注射生理鹽水4 mg/kg，其余4組腹腔注射利血平4 mg/kg，1 h后觀察小鼠眼瞼下垂程度，并以打分的方式進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，打分標(biāo)準(zhǔn)為:完全開眼為0分，1/4閉眼為1分，1/2閉眼為2分，3/4閉眼為3分，完全閉眼為4分。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見表1。

表1 不同劑量中藥組合物對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響

結(jié)果表明,從給藥第1 d開始，同測(cè)試時(shí)間點(diǎn)低、中、高劑量組與模型組比較，小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間明顯縮短(P<0.01)；且隨助陽舒心方劑量的增加，不動(dòng)時(shí)間縮短；同時(shí)，隨服藥時(shí)間的延長(zhǎng)，各劑量組不動(dòng)時(shí)間縮短。結(jié)果還表明，模型組小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間第1，3，7 d逐漸縮短，說明小鼠在不給藥的情況下,具有自我調(diào)節(jié)本能，對(duì)該實(shí)驗(yàn)本身有適應(yīng)性。

3.2 小鼠游泳不動(dòng)時(shí)間結(jié)果 見表2。

表2 不同劑量中藥組合物對(duì)小鼠游泳不動(dòng)時(shí)間的影響

結(jié)果表明，從給藥第1 d開始，同測(cè)試時(shí)間點(diǎn)低、中、高劑量組與模型組比較,小鼠游泳不動(dòng)時(shí)間明顯縮短(P<0.01)；且隨助陽舒心方劑量的增加，不動(dòng)時(shí)間縮短；同時(shí)，隨服藥時(shí)間的延長(zhǎng)，各劑量組不動(dòng)時(shí)間縮短。

3.3 小鼠利血平實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見表3。

表3 不同劑量中藥組合物對(duì)小鼠上眼瞼下垂作用評(píng)分

結(jié)果表明，助陽舒心方中、高劑量+利血平組與利血平組比較，眼瞼下垂等級(jí)組別平均分有明顯下降，且有顯著性差異(P<0.01)；低劑量+利血平組雖然癥狀有改善(較利血平組組別平均分下降)，但無顯著性差異。

4 討論

現(xiàn)代對(duì)于抑郁癥的西藥治療主要包括三環(huán)及四環(huán)類抗抑郁劑、單胺氧化酶抑制劑、選擇性5-HT再攝取抑制劑、5-HT和NE再攝取抑制劑、去甲腎上腺素和特異性5-HT能神經(jīng)抗抑郁藥。從藥物的治療角度表明,大多數(shù)藥物針對(duì)5-HT和NE的合成及代謝途徑在進(jìn)行治療。由于5-HT和NE在體內(nèi)的作用比較復(fù)雜，造成藥物不良反應(yīng)大、價(jià)格昂貴、依從性差的特點(diǎn)。

筆者前期從西醫(yī)對(duì)抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合中醫(yī)的基礎(chǔ)理論，研究發(fā)現(xiàn)從中醫(yī)臨床角度出發(fā)，抑郁病位主要在肝腎，同時(shí)兼及心脾，病機(jī)以陽氣不足、升發(fā)無力為主，故開發(fā)出助陽舒心方。本次試驗(yàn)即是依靠抑郁癥的經(jīng)典藥效觀察實(shí)驗(yàn)(小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)，游泳實(shí)驗(yàn)，利血平實(shí)驗(yàn))，研究助陽舒心方是否具有抗抑郁作用。結(jié)果表明，各劑量助陽舒心方能明顯縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間及游泳不動(dòng)時(shí)間，即助陽舒心方有明顯的抗抑郁作用，其有進(jìn)一步開發(fā)的前景。

[1]張遠(yuǎn)懷,包祖曉,孫偉,等.益氣溫陽1號(hào)方治療抑郁癥的臨床觀察[J].福建中醫(yī)藥,2007,38(6):3-4.

[2]包祖曉.精神抑郁癥從肝氣虛論治的體會(huì)[J].四川中醫(yī),2001,19(8):11-12.

[3]包祖曉,田青,高新彥.抑郁癥與陽氣虧虛的相關(guān)性探討[J].江西中醫(yī)藥,2009(6):9-10.

[4]陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,1994:206.