宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞 HPV、病變組織 Brn-3a的表達(dá)變化及意義

伊心浩,鄭 妮,王際亮

(勝利油田中心醫(yī)院,山東東營 252700)

研究證實(shí),約 99.8%的宮頸癌合并人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染[1],HPV是宮頸癌的主要致病因子。HPV致癌的分子機(jī)制復(fù)雜,可能與多種因子的表達(dá)有關(guān)。Brn-3a是 POU轉(zhuǎn)錄因子家族的一員,在成人周圍神經(jīng)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)特異區(qū)域高表達(dá),其表達(dá)代表了中樞神經(jīng)系統(tǒng)最早的有絲分裂后神經(jīng)元形成[2]。研究發(fā)現(xiàn),Brn-3a在非神經(jīng)來源的細(xì)胞類型,包括 B和 T淋巴細(xì)胞以及乳腺、宮頸和睪丸細(xì)胞中都有表達(dá)[3]。2006年 10月 ～2008年 6月,我們檢測了 19例宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞中HPV及病變組織中 Brn-3a的表達(dá)變化,并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 104例宮頸病變患者,年齡 21～54歲,平均 34.8歲。其中宮頸炎癥 30例,宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(CINⅠ)20例,CINⅡ級 16例,CINⅢ級 19例,宮頸癌 19例。患者均未接受任何婦科相關(guān)疾病的治療。

1.2 方法

1.2.1 HPV檢測方法 采用導(dǎo)流雜交方法。均用宮頸刷刷取患者宮頸細(xì)胞,分離提取 DNA后按照擴(kuò)增反應(yīng)體系的要求進(jìn)行 PCR擴(kuò)增,然后行 PCR產(chǎn)物雜交,最后顯色判斷結(jié)果。檢測結(jié)果陽性點(diǎn)為清晰可見的藍(lán)紫色原點(diǎn),根據(jù)膜條 HPV分型分布圖判斷陽性點(diǎn)。

1.2.2 Brn-3a檢測方法 采用免疫組化 SP法。取患者宮頸病變組織,常規(guī)制作石蠟標(biāo)本并切片,按試劑盒說明書操作。細(xì)胞顯示棕色或有棕色顆粒者為陽性細(xì)胞。隨機(jī)觀察 5個(gè)高倍視野,每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,計(jì)算陽性細(xì)胞數(shù)的平均百分比。0～5%為 0分,～25%為 1分,～50%為 2分,～75%為3分,＞75%為 4分；染色強(qiáng)度:未染色為 0分,淡黃色為 1分,棕黃色為 2分,棕褐色為 3分；兩者相加所得總分 ＞1分為陽性。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用CS2000統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn),相關(guān)關(guān)系采用配對資料的關(guān)聯(lián)性分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

宮頸炎、CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級和宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞中 HPV陽性率分別為 43.3%、50.0%、68.8%、84.2%、94.7%,宮頸組織中 Brn-3a陽性率分別為 6.7%、15.0%、62.5%、78.9%、89.5%。CINⅡ ～Ⅲ級及宮頸癌患者 HPV、Brn-3a陽性率均明顯高于宮頸炎和 CINⅠ患者(P均 ＜0.01)。宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞中 HPV及病變組織中 Brn-3a的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.283,P＜0.01)。

3 討論

研究表明,HPV感染在宮頸腫瘤發(fā)生發(fā)展中起重要作用[4,5]。近年來,隨著檢測技術(shù)的迅速發(fā)展,HPV在宮頸癌篩查及其癌前病變預(yù)測中發(fā)揮了重要作用,但也存在一些局限性。雖然文獻(xiàn)報(bào)道,HPV感染使宮頸癌的相對危險(xiǎn)性增加 250倍[6],但病毒的短暫感染并不引發(fā)惡性病變的發(fā)生,長期持續(xù)感染才能導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生。因此,積極地治療宮頸高危型 HPV感染,對阻斷病程、預(yù)防宮頸癌,特別是宮頸浸潤癌的發(fā)生具有重要意義。

既往,對 Brn-3a的研究主要集中于神經(jīng)系統(tǒng),包括對其表達(dá)的調(diào)節(jié)及其作用機(jī)制等。Ndisang等[5]認(rèn)為,在人類宮頸細(xì)胞中,Brn-3a有激活編碼HPV E6和 E7蛋白基因轉(zhuǎn)錄的作用,在 CINⅢ患者的宮頸活檢組織中 Brn-3a表達(dá)水平增高。因此,Brn-3a可作為 HPV致癌基因轉(zhuǎn)錄活化的生物標(biāo)志物[6,7],其在宮頸轉(zhuǎn)化過程中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用。本研究發(fā)現(xiàn),CINⅡ、CINⅢ及宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞中 HPV與病變組織中 Brn-3a陽性率較高,且二者的表達(dá)呈正相關(guān)。提示 Brn-3a與 HPV的致癌作用密切相關(guān),聯(lián)合檢測對于病情的判斷具有很好的指導(dǎo)意義。

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