豬乳中多胺濃度的研究進(jìn)展

程志斌，廖啟順，蘇子峰

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，昆明 650031；3.大理大學(xué)生命科學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南 大理 671003）

豬乳中含有多種微量生物活性分子，例如胰島素、表皮生長(zhǎng)因子和類胰島素生長(zhǎng)因子等[1]。自從Sanguansermsri等在人乳和牛乳中發(fā)現(xiàn)腐胺、亞精胺和精胺3種多胺活性分子后，營(yíng)養(yǎng)學(xué)家對(duì)乳中多胺的研究逐步深入[2]。目前已經(jīng)在人乳和大鼠、牛以及羊乳中均檢測(cè)出了多胺分子[2－4]。涉及豬乳多胺的研究較少，且測(cè)定豬乳中多胺濃度差異較大。為了正確掌握豬乳中多胺濃度的變化規(guī)律，分析了豬乳中3種多胺的濃度。

1 豬乳多胺濃度的測(cè)定

Kelly等研究表明，豬乳中含有亞精胺，不含有腐胺和精胺，哺乳期1～3周乳中亞精胺濃度低于5 μmol·L－1，3～7 周亞精胺濃度呈持續(xù)升高趨勢(shì)，至第 7 周達(dá)到峰值（≥ 20 μmol·L－1）[5]。Motyl等研究表明，豬乳中存在精胺和亞精胺，精胺濃度峰值（21.60 μmol·L－1）出現(xiàn)在第 1 周，最低值（5.16 μmol·L－1）出現(xiàn)在第 5 周，亞精胺濃度峰值（7.14 μmol·L－1）出現(xiàn)在第 2 周，最低值（2.05 μmol·L－1）出現(xiàn)在第 5周[6]。Loret等測(cè)定了4頭“長(zhǎng)白×漢普夏”哺乳母豬第25天豬乳中多胺的濃度。結(jié)果顯示，豬乳中精胺濃度為 2.64μmol·L－1、亞精胺濃度為 23.62 μmol·L－1、腐胺濃度為 1.83 μmol·L－1[7]。Cheng等分別研究了初乳和常乳中多胺濃度，結(jié)果表明，豬初乳中精胺和亞精胺濃度持續(xù)升高，峰值分別為10.26和4.54μmol·L－1（24 h），然而腐胺濃度相對(duì)較低，且保持穩(wěn)定，無顯著差異（P＞0.05）。常乳中，精胺濃度在哺乳第1周迅速上升，7 d達(dá)到峰值 18.82μmol·L－1。隨后精胺濃度迅速降低，28 d 降至 4.28 μmol·L－1；精胺的濃度隨哺乳期延長(zhǎng)持續(xù)升高，從 3 d的4.67μmol·L－1升至28 d的9.01μmol·L－1；常乳腐胺濃度保持穩(wěn)定，濃度范圍1.53～1.84 μmol·L－1，差異不顯著（P＞0.05）[8]。

2 豬乳中多胺濃度的分析

2.1 豬乳中應(yīng)該同時(shí)含有3種多胺

Kelly等的試驗(yàn)結(jié)果顯示，亞精胺是唯一在常乳中能夠檢測(cè)出來的多胺，精胺和腐胺在任何樣品中都沒有檢測(cè)到[5]。Motyl等只研究和檢測(cè)了豬乳中的亞精胺和精胺，沒有設(shè)計(jì)對(duì)腐胺進(jìn)行試驗(yàn)檢測(cè)。筆者認(rèn)為，豬乳中應(yīng)該同時(shí)具有腐胺、亞精胺和精胺3種多胺。主要原因包括以下幾點(diǎn)。Loret等和 Cheng等檢測(cè)豬乳，均發(fā)現(xiàn)了3種多胺，尤其是Cheng等用適合的檢測(cè)方法和試驗(yàn)步驟，給出了豬初乳和常乳中3種多胺濃度隨哺乳時(shí)間延長(zhǎng)的具體數(shù)值；在人乳和大鼠、牛以及羊乳中均檢測(cè)出了3種多胺分子，這也佐證了同為高等哺乳動(dòng)物的豬，其豬乳中也應(yīng)該同時(shí)含有3種多胺[2－4]；O′Quinn等利用母豬乳腺組織細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)，證明了豬乳腺組織細(xì)胞可以通過多胺從頭合成途徑合成腐胺、亞精胺和精胺3種多胺分子，試驗(yàn)還對(duì)這一合成途徑的關(guān)鍵酶活性進(jìn)行了測(cè)定[9]。Bardocz等證明，包括乳腺組織細(xì)胞在內(nèi)的所有哺乳動(dòng)物細(xì)胞，腐胺是亞精胺和精胺合成的前體，腐胺通過丙胺基轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成亞精胺，亞精胺再經(jīng)過丙胺基轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成精胺，因此腐胺是所有高等哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)多胺從頭合成途徑的第1個(gè)多胺分子[10]。如果豬乳中能檢測(cè)到亞精胺或精胺，就應(yīng)該有其前體分子的存在，因?yàn)?種多胺都可以從豬乳腺組織細(xì)胞內(nèi)合成，外排進(jìn)入乳汁中，因此，豬乳中不應(yīng)該單單存在這一代謝途徑的某一種或者兩種分子，尤其不應(yīng)該只檢測(cè)到亞精胺這一連續(xù)反應(yīng)過程的中間合成的分子。研究證明，豬乳應(yīng)與其他哺乳動(dòng)物的乳汁一樣含有3種多胺，其主要來自乳腺組織細(xì)胞內(nèi)的多胺從頭合成途徑。

2.2 豬乳中腐胺的合理濃度

多胺的檢測(cè)方法很多，Kelly等的研究采用Seiler等建立的多胺檢測(cè)法，測(cè)定豬乳中多胺濃度[5]。這一方法主要用于測(cè)定組織器官的3種多胺濃度，而一般組織器官（細(xì)胞內(nèi)）的多胺比乳中（從乳腺組織細(xì)胞外排進(jìn)入乳汁中）豐富，這說明Seiler等方法對(duì)多胺檢測(cè)的靈敏度偏低，不適合低濃度多胺的檢測(cè)[11]。Cheng等的研究采用專門用于測(cè)定組織液和尿液中微量多胺的檢測(cè)方法，檢測(cè)出豬乳中含有腐胺[8]。此多胺檢測(cè)方法靈敏度優(yōu)于Seiler等，這可能是Kelly等無法檢測(cè)出腐胺的主要原因。

研究報(bào)道顯示，豬乳中多胺濃度的數(shù)值變異系數(shù)較大，說明多胺從乳腺組織細(xì)胞外排進(jìn)入乳汁的過程不穩(wěn)定。這一點(diǎn)與人乳、大鼠、牛以及羊乳中多胺濃度數(shù)值變異大的結(jié)果相符[2－4]。由此可見，試驗(yàn)動(dòng)物的個(gè)體差異和生理狀態(tài)影響乳中多胺的濃度。Kelly等試驗(yàn)只是使用4頭母豬進(jìn)行測(cè)定研究，在試驗(yàn)數(shù)據(jù)變異較大的情況下，4頭母豬的試驗(yàn)設(shè)計(jì)從統(tǒng)計(jì)學(xué)角度考慮，處理重復(fù)數(shù)偏少，這樣的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果不足以得出有說服力的結(jié)論。

筆者認(rèn)為L(zhǎng)oret等和Cheng等的腐胺檢測(cè)結(jié)果較一致且合理。Loret等測(cè)得哺乳25 d乳中腐胺濃度為 1.83 μmol·L－1，Cheng 等測(cè)得產(chǎn)后 24 h 內(nèi)豬初乳中腐胺濃度范圍 1.15～1.52 μmol·L－1，哺乳期3～28 d 常乳中腐胺濃度范圍 1.53～1.84 μmol·L－1。試驗(yàn)均說明，無論豬初乳還是常乳中腐胺濃度均較低[7－8]。O′Quinn等檢測(cè)了體外培養(yǎng)的母豬乳腺組織細(xì)胞中多胺濃度，結(jié)果顯示，腐胺濃度較低，精胺和亞精胺濃度差異不顯著，約是腐胺的3～4倍[9]。O′Quinn等試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，母豬乳腺組織細(xì)胞內(nèi)鳥氨酸脫羧酶（ODC）活性高[9]。因此推測(cè)，腐胺在乳腺組織高ODC活性作用下，迅速轉(zhuǎn)化為精胺和亞精胺，造成乳腺細(xì)胞內(nèi)腐胺濃度降低，外排進(jìn)入乳汁的腐胺較少，結(jié)果致使豬乳中腐胺濃度持續(xù)偏低。

2.3 豬乳中亞精胺的合理濃度

Motyl等報(bào)道，0～35 d的哺乳期，豬乳中亞精胺濃度最大值為 7.14 μmol·L－1，出現(xiàn)在哺乳 14 d，隨后亞精胺濃度顯著降低[6]。Cheng等報(bào)道，哺乳14 d 亞精胺濃度為 5.64 μmol·L－1，數(shù)值雖然與Motyl等的結(jié)果接近，但隨后豬乳中亞精胺濃度呈顯著一次線性增加的趨勢(shì)[7]。顯然，對(duì)于哺乳14 d亞精胺濃度和整個(gè)哺乳期亞精胺濃度的變化趨勢(shì)，Motyl等與Cheng等存在一定差異。筆者認(rèn)為，這些差異可能與以下3個(gè)原因有關(guān)。

2.3.1 試驗(yàn)?zāi)肛i窩帶仔豬數(shù)不同

Motyl等為了研究窩仔豬數(shù)與豬乳亞精胺濃度可能相關(guān)性，用7頭母豬進(jìn)行試驗(yàn)，且這7頭母豬的窩仔豬數(shù)依次設(shè)定為7、8、9、10、11、12、13頭。試驗(yàn)結(jié)果顯示，窩仔豬數(shù)與豬乳亞精胺濃度有極顯著的正相關(guān)性（r=0.94，P＜0.01）。這一結(jié)果說明，窩仔豬數(shù)多，乳腺組織細(xì)胞多胺合成加強(qiáng)，泌乳量高，乳腺細(xì)胞合成并外排進(jìn)入乳汁的多胺增多，因此乳汁中多胺的濃度升高[6]。Cheng等選取10頭妊娠母豬進(jìn)行試驗(yàn)，且窩仔豬數(shù)調(diào)整為10頭。筆者推測(cè)，2篇報(bào)道由于試驗(yàn)?zāi)肛i的窩帶仔豬數(shù)量不同，造成母豬泌乳量的個(gè)體差異，這可能是試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果不同的主要原因。

2.3.2 試驗(yàn)?zāi)肛i的胎次不同

一般而言，母豬第3、4胎平均泌乳量顯著高于第1、2胎母豬。Cheng等試驗(yàn)統(tǒng)一使用第3胎母豬，而Motyl等使用了1～3胎的母豬，未統(tǒng)一母豬胎次[6,8]。筆者推測(cè)兩篇報(bào)道由于試驗(yàn)?zāi)肛i的胎次不同，造成母豬泌乳量的個(gè)體差異，因此豬乳中多胺濃度有差異。這可能是Motyl等與Cheng等試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果不同的另外一個(gè)主要原因。

2.3.3 哺乳0 d的定義不同

Cheng等定義每頭母豬的第一頭仔豬出生的當(dāng)天為 0 d，Motyl等定義每頭母豬的第一頭仔豬產(chǎn)后2～13 h吮吸初乳時(shí)間為0 d。由于母豬產(chǎn)仔一般在較安靜的中午或深夜這兩個(gè)時(shí)間段，這就可能造成Cheng等對(duì)0 d的時(shí)間點(diǎn)定義比Motyl等提早1 d。因此，雖然Cheng等測(cè)定14 d亞精胺濃度數(shù)值低于Motyl等14 d的數(shù)據(jù)，但按照Cheng等結(jié)果顯示的亞精胺濃度隨哺乳時(shí)間延長(zhǎng)而逐步升高的趨勢(shì)分析，如果將Cheng等的試驗(yàn)測(cè)定后延1 d，其結(jié)果就有可能與Motyl等的數(shù)據(jù)相符。

此外，對(duì)于豬乳中亞精胺濃度，Kelly等的報(bào)道與Cheng等試驗(yàn)結(jié)果最接近。Kelly等測(cè)定的28 d豬乳中亞精胺濃度為5～10μmol·L-1，Cheng等測(cè)定結(jié)果為9.01 μmol·L-1；且 Kelly等報(bào)道 1～4周豬乳中亞精胺濃度呈升高趨勢(shì)[6]，這一趨勢(shì)與Cheng等的統(tǒng)計(jì)結(jié)果基本相符。

以上分析顯示，Kelly等、Motyl等與Cheng等對(duì)豬乳中亞精胺濃度的報(bào)道結(jié)果基本一致。然而，按以上3篇報(bào)道對(duì)豬乳中亞精胺濃度的描繪變化趨勢(shì)，在哺乳25 d，以上3篇報(bào)道的亞精胺濃度數(shù)值均小于Loret等的測(cè)定結(jié)果。這可能與試驗(yàn)?zāi)肛i的品種不同有關(guān)。

2.4 豬乳中精胺的合理濃度

Kelly等未檢測(cè)出豬乳中精胺的存在，這可能主要與試驗(yàn)過程有關(guān)。Kelly等是將采集的乳樣品先進(jìn)行冰凍儲(chǔ)存，待所有樣品采集完后的第3天才解凍乳樣品，統(tǒng)一進(jìn)行多胺的分析測(cè)定[5]。由于哺乳動(dòng)物乳汁中普遍含有多胺氧化酶（PAO），PAO來源于乳腺細(xì)胞外排入乳汁，這個(gè)酶的作用是氧化分解精胺和亞精胺，降低精胺和亞精胺的濃度和含量。Kelly等將乳樣貯存時(shí)間過長(zhǎng)，又經(jīng)過解凍過程，乳中多胺氧化酶可能將精胺和亞精胺部分甚至完全降解，致使無法檢出精胺。另外，Kelly等檢測(cè)多胺的方法靈敏度較低，這也是其未檢測(cè)出豬乳中精胺的另一個(gè)重要原因。這一推斷得到 Cheng等的證實(shí)。

排除Kelly等的試驗(yàn)結(jié)果，Motyl等、Loret等和Cheng等均檢測(cè)出豬乳中含有精胺。Motyl等報(bào)道豬乳精胺濃度峰值為21.6μmol·L-1，出現(xiàn)在哺乳7 d，Cheng等測(cè)得豬乳中精胺濃度峰值為18.82 μmol·L-1，同樣出現(xiàn)在哺乳7 d，且兩篇報(bào)道均發(fā)現(xiàn)哺乳7 d后，豬乳中精胺濃度呈下降趨勢(shì)。這些結(jié)果證明，Motyl等和Cheng等測(cè)定的豬乳精胺濃度較合理。

雖然Loret等測(cè)得25 d豬乳中精胺濃度為2.64 μmol·L-1，從數(shù)值上較Motyl等和 Cheng等略低，但依據(jù)哺乳7 d后精胺濃度持續(xù)降低的趨勢(shì)以及這3篇報(bào)道的試驗(yàn)?zāi)肛i品種差異，可以認(rèn)為Motyl等、Loret等和Cheng等對(duì)豬乳中精胺濃度的研究結(jié)果基本一致。

3 總結(jié)

豬乳中同時(shí)含有3種多胺分子，豬乳中腐胺的濃度相對(duì)較低；亞精胺的濃度隨哺乳期的延長(zhǎng)呈持續(xù)升高；精胺濃度變化較復(fù)雜，尤其是哺乳后期乳汁中精胺濃度持續(xù)降低。豬乳中3種多胺濃度的不同變化規(guī)律暗示，多胺可能對(duì)幼齡仔豬腸道發(fā)育和成熟有重要影響，且不同多胺的影響和作用效果可能有差異。

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