蟲類中藥抗腫瘤作用的研究進(jìn)展

吳秋玲 ，盧宏達(dá) ，郭繼龍 ，孔慶志

（1.湖北中醫(yī)藥大學(xué)，湖北 武漢 430064； 2.武漢中心醫(yī)院，湖北 武漢430014； 3.山西中醫(yī)學(xué)院，山西 太原030024）

蟲類中藥可以破血逐瘀、軟堅散結(jié)，其藥力竣猛，已被廣泛應(yīng)用于臨床各種瘕積痞塊和疑難雜癥。中醫(yī)認(rèn)為其“以毒攻毒”，近年來研究發(fā)現(xiàn)，很多蟲類中藥有顯著的抗癌抑癌作用，而且在攻克癌癥方面不斷取得進(jìn)展。

1 蟲類中藥抗腫瘤作用

1.1 水 蛭

水蛭苦咸，微寒，有小毒，功效破血瘀、散結(jié)聚，通經(jīng)脈，利水道。水蛭素具有軟堅縮瘤、活血化瘀、通絡(luò)解痙之功效，臨床廣泛用于治療各種疑難雜癥。實(shí)驗(yàn)研究表明，水蛭素為一種較強(qiáng)的抗凝素［1］，能顯著降低血液黏度，中和凝血酶原，對抗ADP誘導(dǎo)的血栓形成，緩解動脈痙攣、擴(kuò)張血管等。其高抗凝作用有利于抗癌藥物進(jìn)入組織殺傷腫瘤細(xì)胞［2］。水蛭素還可以控制精原細(xì)胞的分裂，體外試驗(yàn)證實(shí)對腫瘤細(xì)胞有抑制作用，如對小鼠肝癌有明顯的抑制活性，臨床對食道癌、腸癌、胃癌有較好的療效，已顯示出良好的應(yīng)用前景。于瑞發(fā)等［3］研究發(fā)現(xiàn)復(fù)方水蛭素提取物對小鼠移植性腫瘤具有顯著影響，使荷瘤小鼠低下的Th1類細(xì)胞因子增多，免疫力提高，使漂移失調(diào)的Th1/Th2類細(xì)胞達(dá)到平衡狀態(tài)。劉京生等［4］用水蛭提取液灌胃荷瘤小鼠（L-1212），電鏡觀察腫瘤組織凋亡的形態(tài)學(xué)變化，以流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞周期動力學(xué)變化和凋亡率，以MTT法檢測NK細(xì)胞活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，水蛭可通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡抑制荷瘤小鼠腫瘤生長，提高荷瘤小鼠的細(xì)胞免疫功能，并能顯著延長荷瘤小鼠的存活時間。

1.2 全 蝎

全蝎，有攻毒散結(jié)、熄風(fēng)鎮(zhèn)痙、通絡(luò)鎮(zhèn)痛的功效。蝎毒為一種具有多種生物活性的蛋白和多肽混合物，全蝎的抗腫瘤藥理作用主要依賴于蝎毒，其作用機(jī)制主要有以下幾方面。①抑制腫瘤細(xì)胞生長和細(xì)胞毒作用：董偉華等［5］用不同濃度蝎毒多肽處理4種腫瘤細(xì)胞——人早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株HL-60、人胃癌細(xì)胞株MGC-803、人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721和人低分化鼻咽上皮癌細(xì)胞株CNE-2Z，結(jié)果不同濃度的蝎毒多肽均有顯著的細(xì)胞生長抑制作用和細(xì)胞毒性。 盧娜等［6］報道蝎毒組分Ⅲ（SVC-Ⅲ）能抑制人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株（AGZY-973）和人肝癌細(xì)胞的生長，抑制率分別為68.96%和64.36%。②誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡：張月英等［7］發(fā)現(xiàn)在蝎毒多肽提取物的作用下，前列腺癌DU-145細(xì)胞出現(xiàn)顯著的細(xì)胞凋亡征象，增殖指數(shù)降低，凋亡指數(shù)明顯增高，AI/PI明顯增高（P＜0.05）。蝎毒多肽處理DU-145細(xì)胞能顯著提高凋亡相關(guān)基因bax的表達(dá)水平，使bcl-2/bax比值明顯減?。≒＜0.05）。 解霞等［8］報道蝎毒（3.0 μg/mL）聯(lián)合多柔比星后增強(qiáng)了對人乳腺癌耐藥MCF-7細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用。③調(diào)節(jié)及增強(qiáng)免疫功能：董偉華等［9］報道蝎毒多肽單獨(dú)給藥可明顯提高小鼠白細(xì)胞數(shù)和小鼠NK細(xì)胞活性，與氟尿嘧啶組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。楊志華等［10］研究蝎毒多肽對X線照射小鼠免疫功能的影響發(fā)現(xiàn)，加用蝎毒多肽的照射中藥組，X線照射后外周血白細(xì)胞數(shù)、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)均無明顯下降，明顯高于單純照射組，表明蝎毒多肽對免疫器官有一定的保護(hù)作用；照射組CD4+、CD8+亞群百分率降低、CD4+/CD8+下降，與正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，照射中藥組CD4+、CD8+下降不多，與正常組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.3 地 龍

地龍，其抗腫瘤成分主要是蛋白成分，因?yàn)樘崛∥飶?fù)雜，帶來其抗腫瘤作用機(jī)制的多樣性。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，其抗腫瘤作用機(jī)制主要有促進(jìn)細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤生長、抗氧化、增強(qiáng)免疫力、改善血液高凝狀態(tài)等［11］。有研究將蚯蚓粗提物用DEAE-SepharoseFF層析柱分離純化得到3個蛋白峰 （QY-I、QY-Ⅱ、QY-Ⅲ），并分別對各組分行抗腫瘤研究，發(fā)現(xiàn)QY-I對H22腹水瘤具有顯著的抑制作用，使荷瘤小鼠生命延長率達(dá) 65.4%［12］。 趙銳等［13］從赤子愛勝蚓中提取到一組活性蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其乙醇沉淀物中組分D2（8）腫瘤抑制作用及激酶活性最強(qiáng)；G-90不僅具有纖溶酶活性，同時具有抗氧化酶作用，其抑制腫瘤生長的作用可能來源于它的抗氧化作用［14］。謝江碧等［15-16］從赤子愛勝蚓中分離提取得到一組抗腫瘤活性蛋白成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)絲氨酸蛋白是其殺傷腫瘤細(xì)胞的必要成分。

1.4 蛇 毒

蛇毒已被廣泛應(yīng)用于臨床治療各種惡性腫瘤，蛇毒素主要含毒蛋白質(zhì)和酶類物質(zhì)，是由毒蛇中提取的有效抗癌成分，被證實(shí)對多種癌癥有抑制活性。韋世秀［17］研究銀鏡蛇毒對人類小涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞在體外生長的抑制作用，發(fā)現(xiàn)眼鏡蛇毒對其有明顯的抑制作用，并且與濃度和作用時間呈正相關(guān)。孫晉民等［18］在研究蛇毒神經(jīng)生長因子（NGF）時發(fā)現(xiàn)NGF對四種人腫瘤細(xì)胞（人白血病細(xì)胞株K562、人肺癌細(xì)胞株AGZY-83a、人胰癌細(xì)胞株JF305和人胃癌細(xì)胞株MG-80）有生長抑制和細(xì)胞毒性作用。吳國土等［19］報道舟山眼鏡蛇毒細(xì)胞毒素-Ⅻ對人肝癌Bel-7404細(xì)胞和人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞的生長有抑制作用。劉成軍等［20］研究發(fā)現(xiàn)中華眼鏡蛇毒對NACC細(xì)胞株有明顯的抑制作用，作用于培養(yǎng)的NACC細(xì)胞48 h后，腫瘤細(xì)胞凋亡率為52.4%，而對照組的細(xì)胞凋亡率僅為5.7%。顏汝平等［21］觀察了中華眼鏡蛇毒膜毒素（MT-12）對膀胱癌細(xì)胞的作用，發(fā)現(xiàn)MT-12有顯著誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用。

1.5 斑 蝥

斑蝥的抗腫瘤作用表現(xiàn)為誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其主要藥理作用成分是斑蝥素和去甲斑蝥素。何太平等［22］發(fā)現(xiàn)斑蝥素對高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞HO-8910PM的IC50為47.99 μmol/L，且使S期的細(xì)胞減少，可見明顯的凋亡峰，熒光雙染出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)學(xué)特征。黃學(xué)強(qiáng)等［23］發(fā)現(xiàn)10～40 mg/L劑量的去甲斑蝥素作用T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株6T-CEM細(xì)胞24 h及10 mg/L劑量的去甲斑蝥素作用6T-CEM細(xì)胞18 h可出現(xiàn)典型的細(xì)胞凋亡特征。戎熠等［24-25］用10 mg/L去甲斑蝥素處理體外培養(yǎng)的人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7，12 h后細(xì)胞變形、脫落，且隨著時間的延長，凋亡細(xì)胞百分比逐漸升高，考慮可能與細(xì)胞內(nèi)活性氧以及鈣離子濃度、線粒體膜電位有關(guān)。范躍祖等［26］通過MTT法、光電顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)研究了去甲斑蝥素對原發(fā)性膽囊癌GBC-SD細(xì)胞系增殖和凋亡的影響，研究結(jié)果表明，濃度為10μg/mL時，對GBC-SD細(xì)胞的生長有抑制作用，且隨著藥物濃度升高抑制作用逐漸增強(qiáng)，呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系；實(shí)驗(yàn)還顯示，去甲斑蝥素通過抑制人膽囊癌GBC-SD細(xì)胞增殖相關(guān)基因蛋白PCNA和Ki-67的表達(dá)而抑制人膽囊癌PCNA的細(xì)胞增殖［27］。去甲斑蝥素抑制GBC-SD細(xì)胞的侵襲和運(yùn)動能力的機(jī)制可能與增加TIMP2表達(dá)、干擾GBC-SD細(xì)胞的MMP2分泌、維持MMP2/TIMP2動態(tài)平衡，減少ECM和BM降解破壞有一定關(guān)系［28］。臨床實(shí)踐和藥理實(shí)驗(yàn)均表明，去甲斑蝥素對正常骨髓細(xì)胞沒有抑制作用，卻有很好的升白細(xì)胞的效果［29］。

1.6 壁 虎

劉菲等［30］研究了中藥壁虎的抗腫瘤作用，對小鼠腫瘤組織進(jìn)行細(xì)胞凋亡及VEGF、bFGF蛋白的測定。結(jié)果表明，壁虎可抑制小鼠肉瘤S180生長，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，減少VEGF、bFGF蛋白的表達(dá)，說明其機(jī)制可能與促進(jìn)細(xì)胞凋亡、抗腫瘤血管新生有關(guān)。

1.7 華蟾素

《中華大辭典》記載蟾蜍：“性味辛涼，有毒，能破癥結(jié)，行水濕，化毒、殺蟲、定痛?！比A蟾素是由中華大蟾蜍之陰干全皮經(jīng)嚴(yán)格工藝提取而成。實(shí)驗(yàn)研究表明，華蟾素能抑制癌細(xì)胞，對動物移植性腫瘤抑制率為30.4%～63.7%，尤其對小鼠肝癌有明顯的抑制作用，還具有短期穩(wěn)定病灶、縮小病灶和改善癥狀的作用，以及明顯的抗炎、消腫、升高白細(xì)胞、鎮(zhèn)痛止血的作用［31］。

1.8 蜈蚣

蜈蚣可抑制人體肝癌細(xì)胞［31］，對胃癌細(xì)胞亦有效，伊紅法對腹水瘤細(xì)胞有較明顯的抑制作用。實(shí)驗(yàn)研究表明，蜈蚣對小鼠肉瘤、艾氏腹水癌、宮頸癌均有抑制活性。臨床上蜈蚣多用于間葉組織與神經(jīng)組織腫瘤，如腦腫瘤、骨腫瘤、軟組織惡性腫瘤以及腫瘤骨轉(zhuǎn)移等［31］。

1.9 穿山甲

穿山甲能增強(qiáng)機(jī)體免疫力、升高白細(xì)胞，對乳腺癌、白血病、淋巴瘤等都有很好療效，其中所含穿山甲堿具有抗白血病及乳頭狀癌細(xì)胞活性的作用［31］。

2 結(jié) 語

總之，臨床實(shí)驗(yàn)均證實(shí)蟲類中藥抗癌鎮(zhèn)痛效果顯著，與放療化療配合可以減毒增效，顯示了廣闊的應(yīng)用前景。隨著醫(yī)學(xué)的不斷進(jìn)步以及對抗腫瘤中藥研究的不斷深入，蟲類中藥對腫瘤的作用及其機(jī)理研究將更加深入和細(xì)致，這無疑將為腫瘤患者帶來福音。

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