六味地黃丸對老年大鼠神經(jīng)系統(tǒng)的抗衰老作用*

張偉偉 劉銀輝 孫啟新 審校 呂 方 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院(西安 710061)

LWDHW出自宋《小兒藥證直訣》,由熟地黃、山茱萸、淮山藥、牡丹皮、白茯苓、澤瀉組成。本方廣泛應(yīng)用于臨床各科,可用于調(diào)節(jié)機體免疫、防治腫瘤、降血壓、降血糖血脂、抗衰老、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等方面的疾病,其適應(yīng)證是陰虛火旺,具有滋補腎陰的功效,其療效也在長期醫(yī)療實踐中得到了充分證實。

1 LWDHW對記憶有關(guān)受體功能的影響 LWDHW對動物性激素及其受體產(chǎn)生明顯影響。研究發(fā)現(xiàn) LWDHW不僅提高老年大鼠血中雌激素的含量,而且增加更年期綜合征患者白細胞上雌激素受體[1],而雌二醇可促進老年雌鼠下丘腦的內(nèi)啡肽基因表達,使老年前期大鼠的精神神經(jīng)癥狀緩解,同時興奮下丘腦-垂體-性腺系統(tǒng)而延緩衰老[2]。LWDHW在劑量依賴性地增強耐力、改善學(xué)習(xí)記憶、增進神經(jīng)-肌肉的運動協(xié)調(diào)和操作能力的同時,提高大腦皮質(zhì)內(nèi)多巴胺(Dopam ine DA)、去甲腎上腺素(Norepinephrine NE)含量和減輕中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能衰老表現(xiàn)[3]。用該方煎劑灌胃,使老年陰虛模型大鼠的Morris迷宮逃避潛伏期、長時程突觸增強(longlasting potentia lation,L TP)潛伏期縮短和群峰電位均增強[4],并通過保護腦內(nèi)膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)或糾正快速老化模型小鼠海馬基因的異常表達來達到改善模型動物學(xué)習(xí)記憶和認(rèn)知障礙[5～8]。高、低劑量 LWDHW灌胃均使大鼠空間搜索和辨別的學(xué)習(xí)能力增強、腦組織單胺氧化酶(Monoamine oxidase M AO)、乙酰膽堿酯酶 (AChE)含量降低,改善 D-ga l引起的衰老大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙[9];芯片技術(shù)研究亦發(fā)現(xiàn)老年組有 13個基因表達顯著下調(diào),1個基因表達顯著上調(diào),經(jīng) LWDHW處理后部分恢復(fù)[10]。

2 LWDHW抑制神經(jīng)元的損傷和凋亡 衰老與自由基清除及超氧化物歧化酶(SOD)酶活性有關(guān)。當(dāng) SOD活性異常,不能及時清除自由基,使細胞過氧化脂質(zhì)升高,產(chǎn)生脂褐素。LWDHW方中所含熊果酸、黃酮類、酚類、甙類、烯萜類、梓醇、糖類、Fe2+、Fe3+、Cu2+、Co2+和 Cr2+為抗氧化活性較強的天然物質(zhì),對大腦細胞脂質(zhì)過氧化損傷有保護作用、改善神經(jīng)系統(tǒng)功能,延長壽命[11～13]。細胞凋亡不僅為機體正常生理活動所需,而且與老年癡呆的發(fā)生密切相關(guān)。凋亡的主要調(diào)控因素有鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)、自由基、興奮性毒性、線粒體功能障礙等。LWDHW可能通過影響這些因素、上調(diào)海馬區(qū)谷氨酸受體數(shù)目、提高谷氨酸與突觸后膜受體的結(jié)合能力,從而對海馬區(qū)腦神經(jīng)元起到保護作用。LW DHW含藥血清提高原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元的存活率的作用機制與穩(wěn)定線粒體膜電位關(guān)系密切,降低凋亡相關(guān)基因的表達,抑制細胞凋亡[14～15]。

3 LWDHW影響離體細胞代謝的酶活性 異丙腎上腺素造成大鼠腦缺血后,腦組織 Ca2+、M g2+-ATP酶活力顯著升高,口服 LWDHW后,缺血大鼠腦組織 Ca2+、Mg2+-ATP酶活力下降,有效防止其腦組織缺血損傷和 ATP耗竭,據(jù)此推測該方可能含有鈣拮抗活性物質(zhì)[16];同時還使甲狀腺素型陰虛陽亢模型動物腎內(nèi)顯著升高的 Na+-K+-ATP酶活性降至正常,有抑制鈉泵活性的作用[17];一些神經(jīng)損傷屬陰虛患者酪胺酸酶活性增高,LWDHW使該酶活性顯著降低、改善兒茶酚胺類遞質(zhì)

代謝[18-19]。

4 LWDHW易化突觸可塑性和突觸傳遞,影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)電生理活動 突觸聯(lián)系是神經(jīng)元的特點及其相互信號傳遞的形態(tài)學(xué)和功能學(xué)基礎(chǔ)。學(xué)習(xí)記憶等高級功能的神經(jīng)基礎(chǔ)是神經(jīng)元之間的連接,即突觸在形態(tài)和功能上的改變-突觸可塑性。視皮層、海馬等腦區(qū)的突觸效應(yīng)的 LTP是評價學(xué)習(xí)記憶等高級功能的電生理指標(biāo)。LWDHW明顯增加動物海馬神經(jīng)元自發(fā)放電和微小興奮性突觸后電流的產(chǎn)生頻率、易化突觸可塑性和突觸傳遞,也作用于突觸前位點而調(diào)節(jié)海馬神經(jīng)元突觸活動。通過促進磷酸酯酶 PP-1、PP-2A的表達,有效改善阿爾茨海默病(Alzheimer's disease AD)模型大鼠腦內(nèi)神經(jīng)元 Tau蛋白過度磷酸化[20]。血清藥理學(xué)方法結(jié)合膜片鉗技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)LWDHW含藥血清可減小原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元的延遲整流 K+通道電流和高電壓激活 Ca2+通道電流,這可能是LWDHW調(diào)節(jié)海馬神經(jīng)元的興奮性、易化突觸傳遞,進而發(fā)揮益智、抗衰老作用的機制之一[21]。

突觸傳遞是神經(jīng)元之間進行信息傳遞的基礎(chǔ),只有通過突觸傳遞才能實現(xiàn)神經(jīng)元之間的通訊,產(chǎn)生整個組織、器官(腦)的高級功能。也只有通過對衰老皮層神經(jīng)組織的突觸傳遞的研究才能獲得 LWDHW抗衰老的基本機制。而視皮層既可處理來自外界的主要傳入信息,可產(chǎn)生突觸的可塑性變化和形成新的神經(jīng)回路,參與學(xué)習(xí)記憶活動,是目前研究大腦皮層活動具有代表性的部位。

5 LWDHW使神經(jīng)組織的代謝活性降低 LWDHW則具有滋陰降火、補腎健腦功效,使神經(jīng)組織的代謝活性降低。全方煎劑、提取物對在體動物和新鮮腦片、培養(yǎng)動物腦組織均有良好的增加存活期、延緩衰老作用;顯著縮短動物被動回避反應(yīng)潛伏期、增強穿通纖維至齒狀回間的突觸傳遞,縮短齒狀回LTP潛伏期,從而改善動物的學(xué)習(xí)記憶行為和功能[22];使培養(yǎng)的動物海馬細胞突起增粗增長、生存時間明顯延長;使培養(yǎng)視皮質(zhì)腦片或視皮質(zhì)神經(jīng)元的突起出現(xiàn)延遲而數(shù)量減少;纖維分支的出現(xiàn)推遲且數(shù)量明顯少于對照;各生長階段均向后推移,總生存時期明顯延長[23]。

6 LWDHW可能通過調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達水平,從而調(diào)節(jié)系統(tǒng)功能起到延緩衰老的作用 有研究表明 LW DHW的活性成分能夠促使衰老小鼠脾細胞和抗體生成細胞的增殖,促進IgG的分泌,提高環(huán)磷酰胺處理的小鼠脾細胞γ干擾素(IFN-γ)的 m RNA表達水平,提高佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠脾淋巴細胞的IFN-γ、IL-4、IL-10的 m RN A表達水平。通過基因芯片技術(shù),發(fā)現(xiàn) 16個基因的表達水平可受 LWDHW用藥的影響。通過深入研究對我們深入理解 LW DHW抗衰老的分子機制可能有幫助[24]。

縱觀國內(nèi)外的研究狀況,各方基于神經(jīng)生物學(xué)的研究結(jié)果報道都對 LWDHW治療精神神經(jīng)性疾病、改善高級神經(jīng)功能、延緩衰老的作用給予了肯定。我們推測:LWDHW作為滋陰補腎和抗御衰老的兩個方面,可能都通過改變神經(jīng)遞質(zhì)的合成釋放與活性、相關(guān)受體的數(shù)量與功能狀態(tài)、神經(jīng)細胞膜上的酶類活性、通道的數(shù)量和活動狀態(tài),從而影響神經(jīng)元之間的通訊、突觸傳遞,乃至整個神經(jīng)系統(tǒng)的功能。

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