牛多殺性巴氏桿菌病的診斷與防治

張飛燕

（山西省農(nóng)業(yè)廳，山西太原030001）

巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的野生動(dòng)物、家畜和家禽共患的傳染性疾病。急性病例以敗血癥和出血性炎癥為臨床特征，因此曾被稱為出血性敗血癥（簡(jiǎn)稱出?。1]。慢性病例則表現(xiàn)為皮下、關(guān)節(jié)以及各臟器的局灶性化膿性炎癥。

由于巴氏桿菌病在不少動(dòng)物中并不表現(xiàn)“出敗”特點(diǎn)，而不少其他疾病卻出現(xiàn)出血性敗血癥，因此，目前以巴氏桿菌病命名比較恰當(dāng)，以免發(fā)生混淆。該病世界各地均有發(fā)生，熱帶地區(qū)更為嚴(yán)重，給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重?fù)p失。各種動(dòng)物均可發(fā)生，呈散發(fā)性流行。

現(xiàn)將山西某奶牛場(chǎng)奶牛多殺性巴氏桿菌病的診治報(bào)告如下。

1 發(fā)病情況

山西某奶牛場(chǎng)有奶牛230頭，從2006年5月初開(kāi)始，新生犢牛陸續(xù)出現(xiàn)不明原因的死亡，到5月底死亡數(shù)達(dá)到7頭，使用青鏈霉素、哌拉西林等藥物治療效果不佳。

2 臨床表現(xiàn)

病牛呼吸困難，呼吸40次/min，精神沉郁，耳下垂，四肢冰冷，心跳120次/min，體溫升高至40～41℃。病牛尾翹起，廢食2 d，大小便困難，胃稍鼓脹。

3 剖解變化

主要病理變化為喉頭黏膜有大小不等的出血點(diǎn)。呼吸道、氣管、支氣管內(nèi)有粉紅色氣泡，胸腔內(nèi)有大量淡紅色滲出液，其間混有纖維素性絮狀物，胸膜及肺膜上有大小不等的出血點(diǎn)，并附有一層灰白色纖維膜。肺呈深紅色或暗紅色，間質(zhì)增厚，切面流出多量帶泡沫血液，右肺呈深紅色，部分壞死。肝稍腫大、質(zhì)脆，與周圍組織有粘連。腹膜炎嚴(yán)重有大量腹水。膽囊腫大，膽汁稀薄。脾未出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)病變。膀胱及腸道黏膜有不同程度的出血斑點(diǎn)。小腸有大量出血斑，腸系膜有出血點(diǎn)且大部分粘連腸。腸內(nèi)容物稀薄并混有血液。腎稍腫大，表面有少量出血點(diǎn)。

4 實(shí)驗(yàn)室檢查

取病死牛的肝、脾和心，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查。

4.1 鏡檢

4.1.1 瑞氏染色法

4.1.1.1 病料觸片 先用鑷子夾持組織局部，然后以滅菌剪刀剪取一塊，夾出后以其新鮮切面在載玻片上壓印或涂成一薄層，室溫中自然干燥。

4.1.1.2 染色[2]室溫中自然干燥后，滴加瑞氏染色液于載玻片上，為了避免很快變干，染色液可稍多加，看情況補(bǔ)充滴加；經(jīng)10 min后直接用水沖洗，晾干，鏡檢，用油鏡觀察細(xì)菌形態(tài)、排列等?？梢?jiàn)兩極濃染的藍(lán)色卵圓形細(xì)菌。

4.1.2 革蘭氏染色法（復(fù)色染色法）

4.1.2.1 病料觸片 方法同4.1.1.1。

4.1.2.2 染色 在已干燥、固定的觸片上，滴加草酸銨結(jié)晶紫染色液，經(jīng)1～2 min，水洗。加革蘭氏碘液于觸片上媒染，經(jīng)1～3 min，水洗。加95%酒精于觸片上脫色，經(jīng)1 min，水洗。加10倍稀釋石炭酸復(fù)紅液復(fù)染1～2 min，水洗。吸干染液，鏡檢，可見(jiàn)兩極濃染的藍(lán)色卵圓形細(xì)菌。

4.2 細(xì)菌培養(yǎng)

將病料分別接種于有葡萄糖的營(yíng)養(yǎng)肉湯中，在37℃下培養(yǎng)24 h，觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，可見(jiàn)營(yíng)養(yǎng)肉湯試管底生長(zhǎng)成黏稠狀沉淀物，液體呈輕度渾濁，輕輕振搖則形成小辮樣盤旋的混懸液。釣取營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物接種于鮮血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板上，置37℃保溫箱中培養(yǎng)24 h，鮮血瓊脂平板上見(jiàn)淡灰白色、表面光滑、閃光的露珠樣小菌落，菌落中間呈藍(lán)綠色、邊緣呈橘紅色、帶金光；在麥康凱瓊脂平板上未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)。

4.3 動(dòng)物試驗(yàn)

取營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物注射到小白鼠皮下，劑量為0.5 mL/只。小白鼠多數(shù)24～48 h死亡，死后取其肺進(jìn)行涂片，用美蘭染色后鏡檢，可見(jiàn)兩極濃染的藍(lán)色卵圓形細(xì)菌。對(duì)小白鼠進(jìn)行剖解，在接種局部可見(jiàn)到肌肉及皮下組織發(fā)生水腫和炎灶；胸腔和心包有漿液性纖維素性滲出物；心外膜有大量出血點(diǎn)；淋巴結(jié)水腫并增大；肝臟淤血。

4.4 生化試驗(yàn)

該巴氏桿菌能產(chǎn)生靛基質(zhì)，M.R.試驗(yàn)和V-P試驗(yàn)均為陰性，能發(fā)酵葡萄糖和蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不能發(fā)酵乳糖、麥芽糖、棉實(shí)糖；石蕊牛乳呈中性。

5 診斷

根據(jù)疫情調(diào)查、臨床癥狀、流行病學(xué)、剖解變化可作出初步診斷，經(jīng)過(guò)細(xì)菌的分離培養(yǎng)、形態(tài)學(xué)觀察、生化試驗(yàn)、動(dòng)物試驗(yàn)，可診斷為牛多殺性巴氏桿菌病。

6 治療

建議畜主用四環(huán)素配入5%葡萄糖生理鹽水中緩慢靜脈滴注，1次/d；同時(shí)用2.5%恩諾沙星按0.1～0.2 mL/kg體質(zhì)量進(jìn)行肌肉注射，連用4 d，疫情可得到控制，或選用頭孢噻肟、美洛西林、丁胺卡那霉素進(jìn)行肌肉注射（用藥量參照說(shuō)明書）。利用恢復(fù)健康?；?yàn)l死期屠宰犢牛的血清給患病牛進(jìn)行注射，每頭20～40 mL/次，連用5 d，并及時(shí)對(duì)同群及本村牛只進(jìn)行逐頭檢查，將可疑病牛和健康牛隔離。當(dāng)疫情緩解后，用該牛場(chǎng)分離的多殺性巴氏桿菌制成自家苗給奶牛接種，每頭5 mL。

預(yù)防措施主要包括加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、對(duì)新進(jìn)動(dòng)物加強(qiáng)檢疫和護(hù)理、疫苗預(yù)防接種及患病動(dòng)物的隔離和治療等綜合性預(yù)防措施[3]。

高度免疫血清也應(yīng)用于緊急接種，但免疫期僅10 d，可作為治療和預(yù)防接種。

對(duì)被污染場(chǎng)地欄舍及周圍環(huán)境用20%氫氧化鈉溶液全面消毒，每周1次，連續(xù)4次。并定期（每年2次）做好牛巴氏桿菌病的免疫。對(duì)病死牛只進(jìn)行深埋，嚴(yán)禁死后出售。

采取上述措施后，其余牛再?zèng)]有發(fā)生死亡，該病得到了有效的控制。

7 分析討論

該牛場(chǎng)地處山西省雁門關(guān)地區(qū)，2006年5月上旬因氣溫下降出現(xiàn)降雪。由于巴氏桿菌病的發(fā)生與環(huán)境條件及動(dòng)物抵抗力狀況緊密相關(guān)，一切降低動(dòng)物抵抗力的因素都會(huì)促使該病發(fā)生和流行。氣溫的突然下降導(dǎo)致動(dòng)物抵抗力降低，使多殺性巴氏桿菌通過(guò)外源性和內(nèi)源性傳染侵入動(dòng)物機(jī)體，很快通過(guò)淋巴結(jié)進(jìn)入血液形成菌血癥，并可在24 h內(nèi)發(fā)展為敗血癥而死亡[4-5]。

該病臨床癥狀很容易與牛肺疫和牛惡性卡他熱相混淆[6]，診斷時(shí)應(yīng)加以區(qū)別，有條件的應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。

通過(guò)藥敏試驗(yàn)篩選經(jīng)濟(jì)、療效好的高敏藥物進(jìn)行治療，既可取得良好的治療效果，又可為以后該病的治療提供參考。

臨床藥物治療，除應(yīng)用抗菌素、高免血清及磺胺類藥物外，根據(jù)機(jī)體臨床癥狀，可結(jié)合支持療法和糾正酸堿、離子平衡及脫水等綜合治療措施。許多疾病常因脫水、酸、堿中毒和離子平衡失調(diào)等發(fā)生各種意外，使病情更加復(fù)雜。

臨床處理應(yīng)采取綜合性治療措施[7-10]：按傳染病流行特點(diǎn)隔離患病動(dòng)物，以切斷病原微生物在動(dòng)物中間通過(guò)空氣、污染物品進(jìn)行傳播和流行的途徑；加強(qiáng)對(duì)患病動(dòng)物的全面護(hù)理，以增強(qiáng)機(jī)體抵抗力。

綜上所述，對(duì)于牛多殺性巴氏桿菌應(yīng)采取以預(yù)防為主、治療為輔的防治措施。

［1］ 張紅見(jiàn)，韓志輝，李成業(yè)，等.牛多殺性巴氏桿菌病病原的分離與鑒定[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2005（3）：35-36.

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