子宮內(nèi)膜異位癥動(dòng)物模型應(yīng)用研究進(jìn)展

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(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院 婦產(chǎn)科，黑龍江 哈爾濱 150040)

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EM)多發(fā)于生育期婦女，臨床主要表現(xiàn)為痛經(jīng)、不孕和性交痛等，是一種良性疾病，卻有著一些類似惡性疾病的生物學(xué)特征。限制該疾病研究的一個(gè)主要原因是這種疾病僅發(fā)生于人類和靈長類動(dòng)物。由于實(shí)際操作與倫理學(xué)方面的約束，很難在人體中進(jìn)行內(nèi)異癥的對(duì)照研究，更不能反復(fù)進(jìn)行創(chuàng)傷性檢查，所以人們不停地在探索能夠復(fù)制該疾病的模型。動(dòng)物模型種類有大鼠、小鼠、家免、獼猴、狒狒、小毛猴、巴馬香豬、雞胚尿素膜(CAM)等[1-5]。本文就EM動(dòng)物模型應(yīng)用研究進(jìn)展，綜述如下。

1 在EM發(fā)病機(jī)制的應(yīng)用研究

1.1 種植學(xué)說 Hooghe[6]成功地在狒狒體內(nèi)將經(jīng)血中的子宮內(nèi)膜自體移植入腹腔，并通過外源性激素的支持，使種植的內(nèi)膜得以存活，該實(shí)驗(yàn)有利地支持了子宮內(nèi)膜種植學(xué)說。

宗利麗等[7]成功構(gòu)建了獼猴模型,發(fā)現(xiàn)獼猴內(nèi)膜異位生長，從大體形態(tài)到組織病理改變與人類子宮內(nèi)膜異位癥很相似。腸套疊是實(shí)驗(yàn)獼猴死亡的主要原因，說明子宮內(nèi)膜種植在盆腔不僅僅產(chǎn)生盆腔黏連，對(duì)獼猴全身狀態(tài)均有明顯的影響，這一現(xiàn)象也為子宮內(nèi)膜種植學(xué)說提供了一個(gè)客觀依據(jù)。

1.2 遺傳因素 宗利麗等[7]研究發(fā)現(xiàn)并不是所有異位的內(nèi)膜均能形成內(nèi)異癥，4只建模型的獼猴中有1只未形成盆腔內(nèi)異癥，重要的是這只獼猴盆腔無任何黏連(對(duì)照獼猴有盆腔黏連)，此現(xiàn)象說明內(nèi)異癥的發(fā)生與個(gè)體遺傳因素有關(guān)。

1.3 激素影響 通過在裸鼠腹腔種植培養(yǎng)的人子宮內(nèi)膜細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，混合培養(yǎng)細(xì)胞未經(jīng)過任何處理，種植成功率為25%。種植前用孕激素處理細(xì)胞不影響種植成功率;而用雌激素處理后成功率提高達(dá)66%,證明雌激素能促進(jìn)異位病灶的形成。異位子宮內(nèi)膜中存在細(xì)胞色素芳香化酶p450的表達(dá),可以促進(jìn)局部雌激素產(chǎn)生增加[8]。這些實(shí)驗(yàn)都提示EM是雌激素依賴性疾病。

1.4 免疫因素與炎癥 免疫因素在內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。NK細(xì)胞具有多種免疫功能，可殺傷和清除機(jī)體病原微生物及其他異物,在免疫監(jiān)護(hù)中起重要作用。Ota等[9]將EM大鼠模型的脾切除，并將脾細(xì)胞再注入大鼠靜脈中，然后測量脾細(xì)胞中NK細(xì)胞的活性；結(jié)果顯示該模型中NK細(xì)胞活性較正常大鼠明顯下降，但比未注入脾細(xì)胞的EM大鼠模型的NK細(xì)胞活性下降要小；證實(shí)EM大鼠中NK細(xì)胞活性下降，清除異位內(nèi)膜的能力降低，使得異位內(nèi)膜得以種植和生長。

補(bǔ)體C3在免疫反應(yīng)中參與炎癥反應(yīng),可活化巨噬細(xì)胞、介導(dǎo)淋巴細(xì)胞功能。

1.5 血管形成和神經(jīng)因素 子宮組織在異位必須經(jīng)過“黏附、侵襲和血管形成”才能生存、生長[10]。異位灶的形成需要有血管的建立來提供能量。Gashaw等[11]應(yīng)用狒狒模型研究發(fā)現(xiàn)，異位病灶內(nèi)的血管生成因子前體CYR61水平升高，進(jìn)一步認(rèn)為,種植病灶存在反饋機(jī)制，升高了CYR61水平，促進(jìn)了局部病灶的生長。微血管密度(MVD)是對(duì)新生血管生成做出定量描述的一個(gè)指標(biāo)。張穎等[12]對(duì)皮下筋膜層與腹壁肌層之間移植自體子宮內(nèi)膜制作的EM模型進(jìn)行評(píng)估，檢測EM模型大鼠的在位與異位子宮內(nèi)膜MVD的變化,發(fā)現(xiàn)異位內(nèi)膜病灶區(qū)的MVD值明顯增高，證實(shí)病灶的出現(xiàn)及維持與局部血供密切相關(guān)。

Berkley等[13]將大鼠自體子宮內(nèi)膜移植于腸系膜根部血管周圍誘導(dǎo)EM模型,證實(shí)異位內(nèi)膜生長過程中不但形成本體感覺神經(jīng)，而且有交感神經(jīng)傳出。這些神經(jīng)不僅導(dǎo)致EM相關(guān)的癥狀，且可能維持著異位病灶的生長。并且這些大鼠都表現(xiàn)有陰道痛覺增敏。

另外,近年已有學(xué)者將EM的機(jī)制研究深入到基因水平。Konno等[14]進(jìn)行自體子宮移植建立SD大鼠EM模型，進(jìn)行病灶和子宮cDNA微陳列比對(duì)，發(fā)現(xiàn)骨橋蛋白、Lyn、Vav 1、Runx1以及I-選擇蛋白的cDNA量明顯增高，認(rèn)為其在EM的發(fā)病中發(fā)揮作用。

2 在EM引起不孕的應(yīng)用研究

史常旭[15-16]報(bào)道EM患者腹腔液在不孕中的作用，將患EM而不孕婦女的腹腔液作用于小鼠的胚胎植入期，小鼠的植入數(shù)減少且白細(xì)胞抑制因子在植入時(shí)表達(dá)。觀察腹腔液涂片，模型鼠腹腔液巨噬細(xì)胞增多，同時(shí)被包裹的卵泡液中亦見大量的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞。說明EM的腹腔液對(duì)不孕有一定的作用。

LUFS(黃素化未破裂卵泡綜合征)是引起不孕癥的原因之一。徐邦生等[17]對(duì)EM模型鼠進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)大量的卵泡液被結(jié)締組織包裹，卵泡液不能排出。

3 在EM治療方面的應(yīng)用研究

Efstathiou等[18]證實(shí)，不同非甾體抗炎藥抑制病灶生長的程度不同，而且不影響小鼠的發(fā)情周期。與控制組相比，塞來昔布、消炎痛、萘普生、樞力達(dá)、羅非昔布、布洛芬均不同程度減小了病灶面積。而阿司匹林無明顯療效。建議臨床醫(yī)生應(yīng)選擇性應(yīng)用非甾體抗炎藥，以達(dá)到抑制病灶的最大療效。

徐穎等[19]用大鼠模型做研究發(fā)現(xiàn)，芳香化酶抑制劑單用及聯(lián)合環(huán)氧化酶抑制劑治療可短暫(1周)降低大鼠血清雌激素水平，但隨著治療時(shí)間的延長(4周)該作用消失而使血清雌激素水平恢復(fù)至與未治療組相近。鼠類雌激素主要來源于卵巢，說明芳香化酶抑制劑并不能徹底抑制卵巢來源的雌激素水平。單用芳香化酶抑制劑、聯(lián)合環(huán)氧化酶抑制劑治療均使異位囊腫縮小，聯(lián)合治療囊腫消失率高于單用組。

動(dòng)物模型對(duì)EM研究意義重大，克服了許多對(duì)人體進(jìn)行直接研究的實(shí)踐問題。但在選擇動(dòng)物模型時(shí)要權(quán)衡各種模型的利弊，充分發(fā)揮不同動(dòng)物模型的長處，為臨床研究提供指導(dǎo)。

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