膽汁標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)鑒定和藥敏結(jié)果分析

彭衛(wèi)華，廖晚珍，余 陽，陳開森，胡雪飛，胡妮婭

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 南昌 330006)

膽道感染是常見疾病，抗生素的應(yīng)用是必不可少的，隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，尤其是近年出現(xiàn)的濫用狀況，使細(xì)菌耐藥性不斷增多，因而細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏監(jiān)測更為重要，本文回顧性分析我院膽道感染患者膽汁標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果，為臨床醫(yī)生合理使用抗生素提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2008年6月至2010年6月南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院膽道感染患者膽汁標(biāo)本中分離的病原菌。

1.2 儀器和試劑 細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)采用法國梅里埃公司的VITEK2 COMPACT全自動(dòng)微生物鑒定儀，專用G-桿菌鑒定卡GN和藥敏卡GN13，G＋球菌鑒定卡GP和藥敏卡P535。血瓊脂平板、巧克力平板為英國OXOID公司哥倫比亞基礎(chǔ)瓊脂，中國蘭平板為杭州微生物試劑有限公司產(chǎn)品。

1.3 質(zhì)控菌株 金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、糞腸球菌ATCC33186。

1.4 方法

1.4 .1 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定 將無菌采集的膽道感染患者膽汁標(biāo)本注入無菌管或增菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，按常規(guī)培養(yǎng)方法及時(shí)接種于血平板、中國蘭和巧克力平板，35℃孵育18～24h，如有細(xì)菌生長，采用VITEK2 COMPACT全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)。

1.4 .2 分析方法 耐藥結(jié)果分析采用世界衛(wèi)生組織細(xì)菌耐藥性監(jiān)測中心推薦的WHONET 5.4軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果 339份膽汁標(biāo)本中178份陽性，其中19份為2種細(xì)菌混合感染，總陽性率為52.5%、共分離出197株需氧菌和真菌，其中革蘭陰性桿菌151株(占76.6%)，革蘭陽性球菌44株(占22.3%)、假絲酵母菌2株(占1.1%)。引起膽道感染最多見的有大腸埃希菌86株占43.6%，其次是肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌各占8.6%，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌47株(54.6%)，肺炎克雷伯菌5株(29.4%)；糞腸球菌和屎腸球菌分別占7.6%和6.6%，各病原菌構(gòu)成比見表1。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 大腸埃希菌和肺炎克雷菌對阿米卡星、亞胺培南和美羅培南敏感性最高，其余都有不同程度耐藥，陰溝腸桿菌對亞胺培南，美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦最敏感。腸球菌敏感性最高的是替考拉寧(耐藥率為零)，其次是萬古霉素和利奈唑烷耐藥率為8.6%，幾種多見菌耐藥率見表2、表3。

3 討論

膽道感染是常見的感染性疾病，多來源于腸道細(xì)菌的逆行感染，病原菌種類和腸道細(xì)菌大致相同。本文回顧性分析了膽汁標(biāo)本普通培養(yǎng)分離細(xì)菌的種類及主要細(xì)菌的耐藥性，從以上結(jié)果顯示，本組細(xì)菌培養(yǎng)陽性率為52.5%，低于年華等[1]報(bào)道的70.9%，與聶哲群等[2]和陸屏等[3]報(bào)道的51.2%和53.0%相近，主要病原菌為革蘭陰性桿菌占76.6%，以大腸埃希菌為主(占43.6%)高于文獻(xiàn)報(bào)道[1]，其次為肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌(各占8.6%)。革蘭陽性球菌占(22.3%)，主要為糞腸球菌(7.6%)，屎腸球菌(6.6%)，其它腸球菌(3.5%)，略低于文獻(xiàn)報(bào)道[1，3]，但腸球菌總感染率相符[4]。另外，本組資料中有19份膽汁為兩種細(xì)菌混合感染占(10.7%)，主要原因可能是抗生素藥品的濫用，引起腸道常見菌群的混亂，增加了細(xì)菌的耐藥性所致。

表1 197株病原菌構(gòu)成比

表2 主要G－桿菌的耐藥率

表3 腸球菌耐藥率

藥敏結(jié)果顯示，86株大腸埃希菌和肺炎克雷菌對阿米卡星和碳青酶烯類藥物未檢出耐藥株。大腸埃希菌耐藥率較低的有呋喃妥因(3.5%)。哌拉西林/他唑巴坦(5.8%)和妥布霉素(11.6%)，其余抗生素都有較高的耐藥，特別是氨芐西林耐藥率高(75.6%)、喹諾酮類，頭孢二、三代都在(50～70%)，可能由于產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌(54.6%)含量較高所致。肺炎克雷伯菌對氨芐西林呈天然耐藥，其產(chǎn)ESBLs株也有(29.4%)，抗生素的耐藥率較大腸埃希菌低，但呋喃妥因、妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦比前者要高許多。陰溝腸桿菌的耐藥率也普遍高，除外碳青霉烯類和哌拉西林/他唑巴坦，總的來說，阿米卡星，碳青霉烯類藥和哌拉西林/他唑巴坦可作為膽道感染腸桿菌科細(xì)菌的經(jīng)驗(yàn)用藥。腸球菌屬除對替考拉寧未檢出耐藥株，3株萬古霉素和利奈唑烷耐藥株為鉛黃腸球菌和醇雞腸球菌，其它腸球菌對萬古霉素都敏感，但常用的其它抗生素有較高的耐藥性 (30～90%)，包括高水平慶大霉素和高水平鏈霉素，因此，當(dāng)治療膽系感染經(jīng)驗(yàn)用藥的同時(shí)，要盡早做細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)及藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏結(jié)果，及時(shí)調(diào)整敏感用藥，盡量減少耐藥菌的發(fā)生。

[1]年 華,丁麗萍,褚玉卓.608份膽汁標(biāo)本中分離細(xì)菌菌譜及其藥敏結(jié)果分析[J].微生物學(xué)雜志,2009,29(2):93-96.

[2]聶哲群,尹家俊.膽汁中細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏分析[J].中國微生物學(xué)雜志,2004,16(3):179.

[3]陸 屏,蔡葉樨,楊丹蓉.128例膽道疾病患者膽汁細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2009,19(11):1442-1443.

[4]李 濤,熊自忠,沈繼錄,等.膽汁細(xì)菌種類及主要分離菌株耐藥性分析[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,2009,21(12):1080-1083.