一例雞新城疫的診斷與防制報告

王 鵬 郝慎文 （山東省萊蕪市畜牧獸醫(yī)局 271100）

新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起禽的一種急性高度接觸性傳染病。臨床上該病常呈敗血癥經(jīng)過，主要特征是呼吸困難、下痢、神經(jīng)機能紊亂、黏膜和漿膜出血。該病是目前嚴(yán)重危害我國養(yǎng)禽業(yè)、必須通過疫苗進行防控的重大動物疫病之一。

NDV屬于副粘病毒科(Paramyxo-viridae)副粘病毒亞科(Paramyxovi-rinae)禽腮腺炎病毒(Avulavirus)，為單股負鏈RNA病毒，基因組大小約為15kb，編碼6種主要的結(jié)構(gòu)蛋白，分別是血凝素一神經(jīng)氨酸酶(HN蛋白)、融合蛋白(F蛋白)、核衣殼蛋白(NP蛋白)、基質(zhì)蛋白(M蛋白)、磷酸化蛋白(P蛋白)和大蛋白(L蛋白)。雖然近年來已引起專業(yè)技術(shù)人員和養(yǎng)雞戶的高度重視，并且采取了相應(yīng)的措施，但由于雞新城疫病毒毒力的增強，尤其因環(huán)境污染、消毒不嚴(yán)，往往在某些雞群中出現(xiàn)免疫失敗的情況，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。

某大型雞場，在2010年3月份分別引進不同品種的商品代雛雞各2000只，雞在7周前均生長良好，成活率達97%。但自第8周左右出現(xiàn)發(fā)病情況，呼吸困難，下痢者漸多，飼料消耗量相對降低，產(chǎn)蛋率上升緩慢，最高產(chǎn)蛋率僅60%。經(jīng)尸體剖檢及實驗室診斷，確診為雞新城疫。

1 流行特點

本病不受季節(jié)的影響，一年四季均可發(fā)生，但以冬春兩季多發(fā)。雞發(fā)病急，傳播快，有的突然死亡。各種日齡的雞均有易感性，大多3～5d死亡，發(fā)病率與死亡率主要由雞的免疫抵抗力和病毒的毒力決定。在免疫雞群中，可散在發(fā)生非典型性新城疫。

2 臨床癥狀

2.1 外觀檢查 先觀察群體病禽的營養(yǎng)狀況；羽毛是否蓬亂、污穢及有無脫毛等現(xiàn)象；皮膚有無瘀血、出血、腫脹、結(jié)痂等；再檢查天然孔有無分泌物流出，分泌物的顏色、性狀如何，數(shù)量多少等；還要個別檢查可視黏膜的色澤，是否有充血、瘀血、出血、貧血等病變；觀察泄殖腔周圍的羽毛有無糞便污染，糞便顏色、氣味如何；關(guān)節(jié)、腿、爪(蹼)有無 腫脹、扭曲、粗大、變形或其它異常。

2.2 觀察結(jié)果 開始時無明顯的癥狀，突然死亡。隨著病情的發(fā)展，病雞出現(xiàn)精神沉郁，羽毛松亂，伏地不動，翅下垂，呆立，嗜睡，食欲不振或拒食，手觸嗉囊空空無物，低頭采食或倒提時從口腔中流出酸臭的液體，排綠色或黃綠色稀便。少數(shù)病雞出現(xiàn)勾頭，跛行。病雞張口呼吸發(fā)出“咕嚕”聲，常有神經(jīng)癥狀，表現(xiàn)有甩頭和吞咽動作， 雞冠及肉垂紅或青紫。運動失調(diào)轉(zhuǎn)圈，扭頸，不能站立。大約半天時間即倒地死亡。

3 病理變化

3.1 剖檢方法 將病死禽或處死禽浸于常水或消毒水中使羽毛浸濕，洗去塵垢、污物，先將腹壁和大腿內(nèi)側(cè)的皮膚切開，用力將大腿按下，使髖關(guān)節(jié)脫臼，將兩大腿向外展開，從而固定尸體。再于胸骨末端后方將皮膚橫切，與兩側(cè)大腿的豎切口連接，然后將胸骨末端后方的皮膚拉起，向前用力剝離到頭部，使整個胸腹及頸部的皮下組織和肌肉充分暴露，以便檢查皮下組織和肌肉是否存在病變(如水腫、出血、結(jié)節(jié)、變性、壞死等)。然后在胸骨后腹部橫切穿透腹壁，從腹壁兩側(cè)沿肋骨頭關(guān)節(jié)處向前方剪斷肋骨和胸肌，然后握住胸骨用力向上向前翻拉，去掉胸骨露出體腔，觀察內(nèi)部情況(如位置、顏色、腹水性狀、有無腫脹、充 血、出血、壞死等)。剖檢術(shù)應(yīng)由表及里先實質(zhì)器官，后腔性器官進行檢查。剖檢時，要仔細檢查各組織器官的病變，并逐一做好 記錄，以便歸類分析，做出正確的病理學(xué)診斷。

3.2 剖檢變化 全身黏膜和漿膜出血，以呼吸道和消化道最為嚴(yán)重；腺胃黏膜水腫，乳頭和乳頭間有出血點；腺胃兩端黏膜出血，潰瘍；盲腸扁桃體腫大、出血、壞死；肌胃角質(zhì)膜下游條紋狀出血，脾臟腫脹，有嚴(yán)重出血；整個腸道發(fā)生卡他性炎癥，腸腔內(nèi)充滿粘液，十二指腸和直腸黏膜出血，部分可見纖維素性壞死病變；十二指腸近末端，回腸起始部局部黏膜腫脹，充血，出血性壞死；腸淋巴濾泡腫脹出血，直腸點狀，條紋狀出血。腦膜充血和出血；鼻道、喉、氣管黏膜充血，增厚，偶有出血，肺可見淤血和水腫，腹腔脂肪廣泛性點狀出血。如圖1、2：

圖1 脾臟腫脹，有大面積出血

圖2 小腸彌漫性出血，淋巴濾泡腫脹出血

3.3 組織學(xué)病變 根據(jù)上述臨床癥狀、病勢發(fā)展速度及病理剖檢變化特點，初步診斷為雞新城疫。后采病料送實驗室診斷，最終確診為新城疫

（1）石蠟切片器材：切片機、切片刀、磨刀具、容蠟及包埋工具。（2）石蠟切片方法。①取材：盡量選用新鮮病料，組織塊大小一般為0.5。②固定：采取的組織塊立即投入10%中性福爾馬林你固定液中，固定24hr即可。③脫水：已固定好的組織塊進行適當(dāng)修整后經(jīng)流水沖洗12～24hr。然后用梯度酒精使組織塊充分脫水，脫水用的酒精梯度和所需時間是：70%酒精(過夜)，80酒精(2hr)，95%酒精1(30min)，95%酒精2(30min)，100%酒精1(30min，100%酒精2(30min)。④透明：脫水的組織塊需要用二甲苯透明，將組織塊中的無水酒精置換出來，為浸蠟作準(zhǔn)備。透明分2次進行，在二甲苯1中停留10min，二甲苯2中停留10min。⑤浸蠟：將透明好的組織塊浸入熔化的石蠟燒杯內(nèi)，已熔化好的石蠟分裝在2個蠟杯內(nèi)，每個蠟杯停留時間約30min。以上步驟均需在石蠟熔化狀態(tài)下進行。⑥包埋：將浸好石蠟的組織塊放入盛有熔化石蠟的包埋框里，使組織埋于石蠟中。待蠟塊冷卻后進行適當(dāng)修整，并將去粘附于臺木上。⑦切片：將制成的組織蠟塊用切片機按需要的厚度切成薄片(一般5～7um，先粗切后細切)。⑧展片和貼片：將切下的切片用毛筆 托起放入展片槽內(nèi)的水面，讓其自然伸展(水溫要求40～45攝氏度，溫度過低不易伸展，過高則可將切片熔化)。切片展開，取一潔凈載玻片在切片附近垂直插入水中，緩緩上提，切片可自動貼附于載玻片上，然后將其置溫箱中烘干。⑨脫蠟、進水、染色及封藏：將組織切片放入二甲苯中20min，然后無水酒精中停留3min，90%酒精2中3min，80%酒精中3min，70%酒精中3min，蒸餾水中3min，蘇木素染液中5～7min，常水沖洗至不脫色為止，然后再1%的鹽酸酒精中分化(迅速)，自來水藍化(20～30min)，然后在伊紅染液中停留0.5min，在無水酒精1中停留2min，在無水酒精2中停留2min，然后在二甲苯中停留10min，然后取出滴加中性樹膠，蓋上蓋玻片，待干燥鏡檢即可。切片觀察如下：

圖3 十二指腸出血，淋巴濾泡壞死、崩解

圖4 非化膿性腦炎的血管袖套現(xiàn)象

多種臟器的血管充血、出血，消化道黏膜血管充血、出血，喉氣管、支氣管黏膜纖毛脫落，血管充血、出血，有大量淋巴細胞浸潤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)可見非化膿性腦炎，神經(jīng)元變性，血管周圍有淋巴細胞和膠質(zhì)細胞浸潤形成的血管套。

多數(shù)在腺胃和肌胃交界處的黏膜上有輕微潰瘍，有的只在心臟，腸黏膜等處有少數(shù)散在出血點。

4 預(yù)防措施

雞新城疫是雞的烈性傳染病，是養(yǎng)雞業(yè)最大的危害，無季節(jié)、年齡、性別、品種之分，應(yīng)引起高度重視。有的養(yǎng)殖戶以為定期進行了免疫接種就萬無一失，從而掉以輕心，應(yīng)該知道，免疫時間、疫苗的優(yōu)劣及操作等諸多因素都會影響免疫效果甚至引起免疫失敗。為此，要做好新城疫的預(yù)防工作。

4.1 一般預(yù)防措施（1）杜絕病原侵入雞群控制和消滅新城疫流行，最根本措施是杜絕新城疫病毒侵入易感雞群，這就需要有嚴(yán)格的衛(wèi)生防疫制度，防止帶毒雞(包括鳥類)和污染物品進入雞群，進出雞場的人員和車輛必須經(jīng)過消毒，飼料來源要安全，嚴(yán)禁從疫區(qū)引進種蛋和雛雞。新購進的雞需經(jīng)檢疫，并嚴(yán)格隔離飼養(yǎng)2周以上，再經(jīng)新城疫疫苗免疫接種后，證明健康者，方可與原有雞合群飼養(yǎng)，隨時觀察雞群的健康情況，發(fā)現(xiàn)有可疑病雞，立即隔離，并采取緊急措施。為了杜絕傳染源傳入，有條件的雞場盡可能做到自繁自養(yǎng)，種雞場、孵化廳、育雛、育成和生產(chǎn)雞群須分區(qū)域飼養(yǎng)，加強種雞群疫病的監(jiān)測。（2）嚴(yán)格執(zhí)行消毒措施消毒是防止新城疫傳播的一項重要措施，其目的是切斷病原的傳播途徑，特別是大型養(yǎng)雞場，應(yīng)該有完善的消毒設(shè)施，雞場進出口應(yīng)設(shè)消毒池。飼養(yǎng)員和工作人員進入飼養(yǎng)區(qū)要經(jīng)消毒后，更換工作服和鞋靴方可進入，進入場區(qū)的車輛和用具也要經(jīng)消毒，應(yīng)該形成一個制度，做到臨時性和定期消毒相結(jié)合。（3）肉用雞場可以采用全進全出的飼養(yǎng)法，在進雞前對雞舍進行1～2次嚴(yán)格消毒，待全群雞出售完畢再進行1～2次雞舍清潔和徹底消毒，這樣可避免雞群疾病的傳播機會，但平時對雞舍周圍環(huán)境也應(yīng)定期進行消毒。

4.2 免疫接種（1）常用的疫苗種類。大致可分為兩類，即弱毒菌和油乳劑滅活苗。I系疫苗用中等毒力的病毒制成，一般用于70日齡以上(體重大于0.75kg)的雞。接種途徑為肌肉注射或飲水。系疫苗的特點為注射后迅速產(chǎn)生免疫力(3～4d)，維持時間長(240～365d)，但不能用于幼齡雛雞。III和IV系苗毒力較弱，常用于雛雞的免疫，可飲水、滴鼻和點眼。用后7d左右產(chǎn)生免疫力，免疫期為1～2個月。此外，Clone-30也是目前常用的弱毒疫苗。油乳劑滅活苗不含活病毒，由于加入了乳劑，注射后可延緩吸收，延長抗原的作用時間，增進效果。油乳劑疫苗的突出特點為可突破母源抗體的干擾，并能產(chǎn)生強而持久的免疫力(用于成年雞免疫期可達1a)，目前已被廣泛用于養(yǎng)雞生產(chǎn)中。（2）常用的免疫程序。①蛋雞：7～10日齡、30日齡用Ⅳ系苗或Clone-30點眼滴鼻；60日齡用I系苗肌肉注射；120日齡用I系苗和新城疫油乳劑滅活苗肌肉注射，半年后再用3倍量Ⅳ系苗或I系苗飲水免疫。②肉仔雞：7～10日齡、30日齡用Ⅳ系苗滴鼻點眼免疫2次，新城疫嚴(yán)重污染區(qū)20日齡可補防1次，也可7～10日齡一免時同時進行新城疫油乳劑滅活苗注射。合理做好雞群預(yù)防接種免疫接種是增強雞群的特異免疫力，使雞群保持堅強的免疫狀態(tài)，抵抗新城疫病毒的感染，因此給雞群合理進行疫苗接種，是防制雞新城疫關(guān)鍵措施之一。做好免疫接種應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)匾卟×餍星闆r，雞場衛(wèi)生防疫制度嚴(yán)密與否，飼養(yǎng)類型，雞的種類(肉雞或蛋雞)，雛雞母源抗體效價的高低以及前次免疫的HI抗體情況等，來確定采取疫苗種類、免疫日齡、免疫次數(shù)和免疫的方法。近年來我國對新城疫的免疫程序進行大量研究，積累了許多經(jīng)驗，使新城疫的免疫程序更加科學(xué)化和合理化，這對控制和消滅新城疫起著重要作用。（3）建立免疫監(jiān)測制度。為了保證各次免疫接種獲得良好免疫效果，避免免疫接種工作的盲目性，必須通過免疫監(jiān)測的方法，檢查免疫雞群中HI抗體效價。根據(jù)HI抗體水平確定首免和再次免疫時間，是最科學(xué)的方法。免疫監(jiān)測也是制訂免疫程序的依據(jù)。HI抗體測定，會受到許多因素的影響，同一份抗血清在不同實驗室測定其結(jié)果不同，為了獲得準(zhǔn)確結(jié)果，一方面對操作人員進行訓(xùn)練，另一方面應(yīng)設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)抗血清做對照，從而使HI抗體測定標(biāo)準(zhǔn)化。一般在首免后10～14d，抽檢免疫雞HI抗體水平。抽樣比例大雞群按0.2%，500羽雞群按3%～5%。以后每間隔3～4周抽檢1次，使用I系疫苗免疫的雞群，每隔2個月抽檢1次，通過免疫監(jiān)測手段，可以判定疫苗的免疫效果，當(dāng)發(fā)現(xiàn)HI抗體沒有上升，應(yīng)及時檢驗疫苗的品質(zhì)，或檢查是否有其他的疾病影響，并及時采取補救措施，改換疫苗或改變免疫方法以及同時注意其他病免疫接種。免疫監(jiān)測還能判定該雞場是否受到新城疫強毒的感染。因為各類疫苗免疫雞后，正常情況HI抗體效價保持一定的水平，當(dāng)發(fā)現(xiàn)該雞群HI抗體突然上升很高，比原來的抗體效價增加了3個滴度以上，說明該雞群可能感染了新城疫強毒，那么必須注意其他雞群防疫措施。

加強飼養(yǎng)管理，提高雞群抵杭力。保證飼料配方的合理、飼養(yǎng)密度均勻、通風(fēng)良好、減少應(yīng)激等。接種操作技術(shù)要規(guī)范，使用疫苗質(zhì)量要保證。做到早發(fā)現(xiàn)、早確診、早采取有效措施。