腸出血性大腸埃希菌O157:H7的分布及特征

陳智強(qiáng) 高仕瑛

腸出血大腸埃希菌(EHEC)O157:H7是世界范圍分布的重要食源性致病菌。1982年美國首次因其致人出血性腸炎暴發(fā)，隨后在其它一些國家相繼發(fā)現(xiàn)由它引起的感染，日本曾多次暴發(fā)流行。我國也報道過O157:H7引起的嚴(yán)重感染[1]。

O157:H7主要通過不潔食物，飲水傳播，感染者的典型臨床癥狀為血便、腹痛、低熱等，個別患者可發(fā)展為溶血性尿毒綜合征、血栓性血小板減少性紫癜，若發(fā)生在老年人或兒童,死亡率可超過10%。因此，O157:H7在外環(huán)境中的分布引起了人們的高度關(guān)注。

我們對H市外環(huán)境(食物、生活污水、土壤)中的腸出血性大腸埃希菌O157:H7進(jìn)行了檢測，現(xiàn)將有關(guān)結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 食源性O(shè)157:H7 分離自H市相關(guān)超市與農(nóng)貿(mào)市場的五類食品(雞肉、豬肉、淡水魚、海產(chǎn)品、蔬菜)，共10株[2]，按文獻(xiàn)[3]進(jìn)行鑒定。

1.2 其它來源O157:H7 在市郊菜地及市區(qū)居民生活污水排放口各選取三個采樣點，于2009年6～9月每隔五天采樣(100g/份)一次，按文獻(xiàn)[3]分離鑒定O157:H7。免疫磁珠為丹麥Dynal公司產(chǎn)品，O157單克隆抗體診斷血清及H7單因子血清由國家疾病預(yù)防控制中心流行病研究所產(chǎn)品。

1.3 O157:H7毒素基因檢測 基因引物(O157、H7、SLT1、SLT2、ereA及hly)為上海生工生物工程公司產(chǎn)品。

1.4 紙片瓊脂擴(kuò)散(K-B)法測定O157:H7菌株對常用抗生素耐藥性，藥敏結(jié)果判定按2006CLSI標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。質(zhì)控菌:大腸埃希菌ATCC25922。

2 結(jié)果

2.1 自H市外環(huán)境分離，鑒定腸出血大腸埃希菌O157:H7共15株，其中10株來自食品，3株來自污水，2株來自菜地土壤(表1)。農(nóng)貿(mào)市場食品污染嚴(yán)重，在雞肉、海產(chǎn)品、蔬菜中檢出O157:H7，而超市食品僅雞肉中檢出。食品中O157:H7的檢出率為1.42%～5.71%。菜地土壤與生活污水中O157:H7檢出率相應(yīng)為2.82%與4.34%。

2.2 15株EHEC O157:H7的毒素基因分布見表2。其中3株(20.00%)攜帶SLT1，SLT2,eae及hly四類毒素基因；11株(73.33%)攜帶SLT2，eae及hly三類毒素基因；1株未檢出。它們中93.33%(14/15)是能產(chǎn)生SLT2、eae、hly毒素的高致病性菌株。

2.3 測定了H市外環(huán)境EHEC O157:H7對8種常用抗生素(慶大霉素、哌拉西林、阿米卡星、氨芐西林、頭孢哌酮、亞胺培南、環(huán)丙沙星、左氟沙星)的敏感性。結(jié)果表明∶食源性EHEC O157:H7(10株)多重耐藥菌株多，耐藥譜廣、僅對哌拉西林，亞胺培南完全敏感、對氨芐西林及環(huán)丙沙星≥50%耐藥、對另四種抗生素20.00%～30.00%耐藥。生活污水與土壤中EHEC O157:H7(5株)除對氨芐西林(80.00%)、環(huán)丙沙星(40.00%)及慶大霉素(20.00%)耐藥外，對其它5種抗生素完全敏感。

3 討論

3.1 O157:H7是腸出血性大腸埃希菌(EHEC)的主要血清型，有諸多文獻(xiàn)報道過牛、羊、豬及家禽糞便中該菌的分布與檢出率[4-5]。本文證實，O157:H7在H市外環(huán)境中較廣泛分布，除在食物，也在污水、土壤中檢出該菌。O157:H7致病力強(qiáng)，100～1000個細(xì)菌就可致人食物中毒[6]。它可產(chǎn)生多種致病因素，認(rèn)為具有SLT2、eae、hly三類毒素基因的是高致病菌株的特征，SLT2對實驗動物的半數(shù)致死量比SLT1低價400倍[7-8]。SLT2菌株可致感染者嚴(yán)重的癥狀及組織病理學(xué)病變。H市外環(huán)境中O157:H7高致病性強(qiáng)毒株占93.33%(14/15)。

表1 H市外環(huán)境O157:H7分布與檢出率(%)

表2 H市外環(huán)境O157:H7毒素基因分布

3.2 H市食品中O157:H7主要污染對象是雞肉，在超市及農(nóng)貿(mào)市場的樣本中均檢出，檢出率相應(yīng)為2.27%及4.16%。農(nóng)貿(mào)市場食品O157:H7污染較超市嚴(yán)重，在海產(chǎn)品與蔬菜中也檢出該菌且檢出率較高。這應(yīng)是與農(nóng)貿(mào)市場從業(yè)人員素質(zhì)、衛(wèi)生習(xí)慣、食品售前處理(如蔬菜在池塘或水溝中浸泡過夜)及貨架管理方式等經(jīng)營行為緊密相關(guān)。

3.3 H市食源性O(shè)157:H7對抗生素的多重耐藥株多，而來自污水與土壤的O157:H7對試抗生素有較多敏感菌株(見2.3)。兩個來源的菌株對抗生素耐藥性顯示差異的原因應(yīng)與家畜、禽類飼料中抗生素長期的、廣泛添加使用，抗生素壓力明顯超過污水、土壤等外環(huán)境有關(guān)。

3.4 大腸埃希菌在外環(huán)境存活力強(qiáng)，廣泛分布在水、土壤、食物中。被O157:H7污染的水、食物是該菌傳播的主要媒介，O157:H7耐冷藏、耐酸，在pH=2的胃液中可存活2小時以上、發(fā)酵食品(酸乳、泡菜)4℃儲存一周后仍可檢出、新鮮蔬菜表面也可較長時間存活[3,9]。這些特點更增加了該菌對食品安全與人群健康的潛在威脅能力。

綜上，H市外環(huán)境(食品、污水、菜地土壤)分布有高致病性的腸出血性大腸埃希菌O157:H7。此研究可為政府有關(guān)部門在加強(qiáng)環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測與食品衛(wèi)生監(jiān)督的策略或措施制訂時提供科學(xué)證據(jù)。

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