宮頸錐切組織制片方法的改進(jìn)

王宏艷 周秀玉 王玉國(guó) 崔元日

1 黑龍江省大慶油田總醫(yī)院病理科（163000）

2 黑龍江省大慶油田總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科（163000）

在外檢標(biāo)本中，宮頸錐切組織比較多見，所以在實(shí)際工作中，做好宮頸錐切組織制片具有重要意義。通常情況下，宮頸錐切組織主要成分為肌肉組織和結(jié)締組織，制作切片時(shí)比較難切，主要原因一是硬、脆，二是切片易厚、易碎，三是容易脫片[1-3]。每天科室可收到20～30例宮頸錐切組織，如果制片不佳，就會(huì)拖延正常工作進(jìn)行，而且無形中會(huì)加大科室工作量。我們通過多年的實(shí)踐總結(jié)，對(duì)宮頸錐切組織的制片進(jìn)行了改進(jìn)，取得良好效果。

現(xiàn)總結(jié)改進(jìn)方法如下。

1 取 材

組織塊不宜過大，大約0.8cm×0.5cm×0.2cm。如果組織過大會(huì)導(dǎo)致標(biāo)本在正常處理時(shí)間內(nèi)處理效果差。

2 固 定

收到標(biāo)本后，為了防止宮頸錐切組織固定不充分，而影響切片質(zhì)量，導(dǎo)致延誤診斷。尤其是在北方寒冷季節(jié)里，12月至2月更容易出現(xiàn)。為了克服這一現(xiàn)象，我們首先從增強(qiáng)固定效果來解決這一問題。常規(guī)標(biāo)本選用在常溫下10%福爾馬林固定3h即可，而宮頸錐切標(biāo)本的固定就需要4h左右，現(xiàn)在我們選用20%福爾馬林固定液，并置于60℃環(huán)境中作為增強(qiáng)固定，只需要2h左右即可[4]。

3 脫 水

由于用乙醇脫水時(shí)需要時(shí)間長(zhǎng)，往往會(huì)造成組織變硬變脆，所以為了防止宮頸錐切組織過硬過脆，不應(yīng)采用乙醇脫水。我們的改進(jìn)方法是直接用丙酮脫水，因?yàn)楸纫掖冀附M織速度快，脫水時(shí)間短，所以組織不宜變硬。具體操作中，要視組織大小，來確定脫水時(shí)間，一般來說，脫水時(shí)間不易過長(zhǎng)，2～3h即可。

4 透 明

二甲苯雖然是組織的良好透明劑，但它容易使組織收縮、變脆，使含有肌肉纖維多的組織變得堅(jiān)硬難切，使含有膠質(zhì)豐富的組織發(fā)脆，影響切片。具體操作中，我們?cè)诔Ｒ?guī)透明程序中將二甲苯改為松節(jié)油，因?yàn)樗晒?jié)油對(duì)組織作用比較柔和，應(yīng)用時(shí)間要相對(duì)長(zhǎng)一些。改善以往病理常規(guī)制片，達(dá)到良好效果[5]。

5 浸 蠟

浸蠟宜用58～60℃熔點(diǎn)石蠟，時(shí)間3h，每1h更換一次石蠟，石蠟的熔點(diǎn)不得超過60℃，如果熔點(diǎn)過高，會(huì)導(dǎo)致宮頸錐切組織變硬，而中心浸蠟不佳，浸好蠟的組織應(yīng)該立即包埋于60℃的石蠟中。

6 切 片

切片時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：①蠟塊不要凍得過硬，否則組織硬脆，切片時(shí)易破碎。②修蠟塊時(shí)一般用8～10μm，不能修的太厚，易使組織從蠟塊上脫落，很難得到完整切片。③切片要用一次性鋒利的刀片，切片厚為3μm，不易過厚，否則染色時(shí)易脫片或染色過深，連續(xù)切片時(shí)可向蠟塊組織輕輕哈氣，以使組織軟化，這樣切出的宮頸錐切組織連續(xù)完整，不易破碎且平展。④烤片溫度應(yīng)于70℃左右，不易過高，時(shí)間為1h[6]。

多年實(shí)踐證明，要制作高質(zhì)量的宮頸錐切組織切片，對(duì)病理技術(shù)人員的要求是首先要熱愛病理技術(shù)工作，有敬業(yè)精神，要有高度的責(zé)任心，其次是要注意操作的每個(gè)細(xì)節(jié)，執(zhí)行規(guī)范化操作程序，認(rèn)真摸索，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就一定能獲得一張精良的宮頸錐切組織HE切片。

[1]龔志錦,詹熔洲.病理組織制片和染色技術(shù)[M].上海:科學(xué)技術(shù)出版社,1994:3-24.

[2]倪燦榮.免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)新技術(shù)及應(yīng)用[M].北京:北京科學(xué)出版社,1993:165-166.

[3]張哲,陳輝.實(shí)用病理組織染色技術(shù)[M].沈陽:遼寧科學(xué)技術(shù)出版社,1988:175.

[4]程國(guó)平,徐建業(yè),胡錦林等.超聲及微波輻射技術(shù)在制備穿刺活檢組織切片中的應(yīng)用[J].診斷病理學(xué)雜志,2007,14(6):475.

[5]印志琪,王政祿,張學(xué)義等.一種改良的肝穿刺活檢標(biāo)本快速制片方法[J].診斷病理學(xué)雜志,2007,14(1):80.

[6]蔡文琴,王伯云.實(shí)用免疫細(xì)胞化學(xué)與核酸分子雜交技術(shù)[M].成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,1994:524.