復(fù)方柏椒提取液抗炎止痛效果的動物實驗研究①

焦順利 田錕 高智 陳曉華 佘小明

(1.山東省淄博市第一醫(yī)院口腔科; 2.山東省淄博市張店中醫(yī)院 山東淄博 255200;3.貴州貴陽市口腔醫(yī)院 口腔頜面外科 貴陽 550002)

口腔潰瘍是一種常見病癥,疼痛是其主要癥狀,目前在治療口腔潰瘍疼痛方面尚沒有特效藥,臨床上常用口服止痛藥物種類較多,但對胃腸道的副作用明顯,而局部止痛藥物特別是中藥的類型甚少。本研究采用中藥提取液-復(fù)方柏椒液通過動物實驗來探討其止痛、抗炎作用,擬為其臨床應(yīng)用提供實驗基礎(chǔ)。

1 實驗材料

1.1 動物及飼養(yǎng)

昆明種小鼠,SPF級,17～20g,由山東泰邦生物制品有限公司提供;合格證號:SCXK魯20030011;雌雄分籠飼養(yǎng),每籠10只。短毛豚鼠,清潔級,280～330g,雌雄各半,由山東泰邦生物制品有限公司提供;合格證號:SCXK魯20030011;雌雄分籠飼養(yǎng),每籠5只。

1.2 儀器與試劑

復(fù)方柏椒液:(山東美林制藥有限公司提供)。二甲苯:萊陽市康德化工有限公司,批號:20080814。扶他林乳膏:山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司,批號:1002192013。磷酸組織胺:中國藥品生物制品檢驗所,批號:150510～200412。電子天平:賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司。

2 實驗方法

2.1 復(fù)方柏椒液對小鼠二甲苯耳腫脹的影響

昆明小鼠50只,雌雄各半,隨機分5組,10只/組。分別為空白對照組,扶他林乳膏組,及復(fù)方柏椒液組,用20μL二甲苯涂于小鼠右耳兩面致炎,致炎后15min在小鼠右耳分別涂抹蒸餾水,扶他林乳膏,復(fù)方柏椒液。

2.2 復(fù)方柏椒液單次用藥對小鼠熱板法所致疼痛的影響

將室溫控制在20～23℃,對雌性小鼠進行篩選。將熱板水溫恒溫至(55±0.5)℃,小鼠放在熱板上5～30s內(nèi)出現(xiàn)舔后足反應(yīng)者為合格小鼠,將入選小鼠挑出,分別為空白對照組,扶他林乳膏組、復(fù)方柏椒液組,測定各組小鼠的痛覺潛伏期前,統(tǒng)計小鼠的痛覺潛伏期。

2.3 復(fù)方柏椒液多次用藥對小鼠熱板法所致疼痛的影響

將室溫控制在(20～23)℃,對雌性小鼠進行篩選。將熱板水溫恒溫至(55±0.5)℃,小鼠放在熱板上5～30s內(nèi)出現(xiàn)舔后足反應(yīng)者為合格小鼠,將入選小鼠挑出,分別為空白對照組,扶他林乳膏組。復(fù)方柏椒液組潛伏期按60s計。統(tǒng)計小鼠的痛覺潛伏期。

2.4 復(fù)方柏椒液對磷酸組織胺致癢作用的影響

將豚鼠隨機分為5組,每組8只。各組分別為:陰性對照組;扶他林乳膏;復(fù)方柏椒液高、中、低劑量組。試驗前剪去豚鼠右后足背毛并用砂紙擦傷皮膚,各組均勻涂抹相應(yīng)藥物或蒸餾水。最后一次給藥30min后,用0.1%磷酸組織胺0.05mL,分別涂在各組豚鼠的創(chuàng)面處。記錄并比較各組涂抹組織胺次數(shù)及致癢閾(最后出現(xiàn)豚鼠回頭舔右后足時所給予的磷酸組織胺累積用量)。

2.5 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 11.0軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理,測量數(shù)據(jù)結(jié)果用(±s)表示,2組比較采用t檢驗。

3 實驗結(jié)果

3.1 復(fù)方柏椒液對小鼠耳腫脹的影響

小鼠耳腫脹實驗結(jié)果表明:陽性對照組扶他林乳膏對小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用;與空白對照組相比,復(fù)方柏椒液組均對小鼠耳腫脹有顯著性抑制作用,且隨著劑量的增加其作用越強。

3.2 復(fù)方柏椒液一次用藥對小鼠熱板致痛的影響

熱板模型可反應(yīng)動物對熱刺激的耐受性和其痛覺敏感性。復(fù)方柏椒液在給藥40min后顯示出鎮(zhèn)痛效果。通過對復(fù)方柏椒液對鎮(zhèn)痛的時效曲線,可以發(fā)現(xiàn)在用藥60min時,鎮(zhèn)痛作用最強。

3.3 復(fù)方柏椒液多次用藥對小鼠熱板致痛的影響

小鼠熱板實驗結(jié)果表明:陽性對照組扶他林乳膏對小鼠熱板致痛有明顯的抑制作用;與空白對照組相比,復(fù)方柏椒液組均對小鼠熱板致痛有顯著性抑制作用,且隨著劑量的增加其作用越強。

3.4 復(fù)方柏椒液對磷酸組織胺致癢作用的影響

豚鼠對磷酸組織胺致癢作用實驗結(jié)果表明:陽性對照組扶他林乳膏對豚鼠有明顯的止癢作用;與空白對照組相比,復(fù)方柏椒液組均對磷酸組織胺致癢有顯著性抑制作用,且隨著劑量的增加其作用增強。

4 討論

復(fù)方柏椒提取液的組成及提取:本中藥制劑的配方組成:黃柏、花椒、枯礬、苦參、乳化碘。將上述中藥按一定比例經(jīng)過煎煮、醇沉、濃縮、過濾、凈化后與乳化碘混合取得提取液。(中藥配方及提取液均由山東美林制藥有限公司提供)花椒是傳統(tǒng)中藥,具有“溫中止痛,殺蟲止癢”的藥效。現(xiàn)代研究成果顯示國內(nèi)外花椒屬植物的化學(xué)成分主要有生物堿、酰胺、木脂素、香豆素、揮發(fā)油和脂肪酸等,具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗炎、局部麻醉、抑菌作用;對免疫機能、凝血功能等均有較強的藥理活性。另外,研究發(fā)現(xiàn)花椒的水煎劑、醚提取物和水提取物都能減少酒石酸銻鉀或乙酸引起的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù),延長熱痛反應(yīng)的潛伏。

花椒稀醇浸液也有局部麻醉作用。在家兔角膜的表面麻醉中,效力較地卡因稍弱。在豚鼠的浸液麻醉中,效力強于普魯卡因。黃柏治療口舌生瘡頗具良效。

通過本文實驗結(jié)果,復(fù)方柏椒液其抗炎作用明顯,鎮(zhèn)痛作用起效快,作用時間長,止癢作用顯著?？梢宰鰹橹委熆谇粷兲弁吹囊环N較理想的中藥方劑,雖然本研究證實復(fù)方柏椒液具有較強的抗炎作用,但其能否加速口腔潰瘍面愈合尚待進一步研究和探討。

[1]凌智群,魏居國,程寶宏,等.花椒功效的初步考證[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2008.

[2]張明發(fā).花椒溫經(jīng)止痛和溫中止瀉藥理研究[J].中藥材,1994.

[3]孫洪范,吳明燊.花椒對蟾蜍離體神經(jīng)的作用[J].貴州醫(yī)藥,1990.