瑞苷對(duì)大鼠急性重癥胰腺炎肝損害的治療保護(hù)作用

牛曉明 岳海梅

1 大同市衛(wèi)校（037000）

2 大同市五醫(yī)院（037006）

急性胰腺炎是一個(gè)常見(jiàn)的外科急腹癥，其中重型病情兇險(xiǎn)，病死率高，是目前外科急腹癥中最棘手的疾病之一。然而在急性胰腺炎病例中，10%～25%屬于SAP，病死率高達(dá)20%～30%[1]。死亡的主要原因多系合并全身多臟器功能損害，而肝臟是最常受累的器官之一。急性胰腺炎所引起的肝損害不但可以加重胰腺炎病情，肝功能的好壞還直接關(guān)系到其他臟器并發(fā)癥的出現(xiàn)與否。盡管肝臟具有強(qiáng)大的功能代償作用和再生能力，肝功能紊亂仍是SAP進(jìn)展中嚴(yán)重的、甚至致死性的并發(fā)癥之一，能否及時(shí)、有效地處理肝損害直接關(guān)系到胰腺炎的病情變化及預(yù)后。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

采用由山西醫(yī)科大學(xué)生理實(shí)驗(yàn)室提供的雄性Wistar大鼠42只，每只體質(zhì)量在180～200g。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 SAP大鼠模型構(gòu)建

采用膽胰管內(nèi)逆行注射5%?；悄懰徕c溶液的方法復(fù)制SAP模型。術(shù)前禁食12h，飲水不限。1%戊巴比妥鈉腹腔麻醉（3mL/kg），固定大鼠。經(jīng)上腹正中切口進(jìn)腹，提起十二指腸以無(wú)損傷血管夾夾閉肝門(mén)部胰膽管。TB針經(jīng)十二指腸穿刺胰膽管，加壓注射5%牛黃膽酸鈉（1mL/kg），持續(xù)1min，助手捏緊十二指腸兩端，保持3min，觀(guān)察到胰腺迅速充血、間質(zhì)水腫并有散在出血點(diǎn)，術(shù)畢關(guān)腹。皮下注射生理鹽水2mL，以補(bǔ)充術(shù)中丟失的水分。

1.2.2 干預(yù)措施

隨機(jī)分為3組分別是對(duì)照組、胰腺炎組及治療組。通過(guò)胰管逆行注射法建成重癥急性胰腺炎模型，治療組于腹腔內(nèi)注射瑞苷另兩組用生理鹽水替代。分別于干預(yù)后2、6、12h 分批處死大鼠，各時(shí)段每組大鼠n =6檢測(cè)大鼠血清TNF-α、ALT、AST、ALB的水平，并取胰腺和肝臟組織進(jìn)行病理學(xué)分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 胰腺及肝臟組織病理變化

SAP組大鼠胰腺組織肉眼病理改變主要為:腹腔內(nèi)有淡血性腹水，部分大鼠有反應(yīng)性胸腔積液；胰腺表面及周?chē)梢?jiàn)多處皂化斑；胰腺組織明顯水腫，可見(jiàn)點(diǎn)狀或局灶性出血壞死。其病理改變隨時(shí)間延長(zhǎng)呈進(jìn)行性加重。治療組大鼠胰腺組織肉眼病理表現(xiàn)為:腹腔淡血性腹水，皂化斑較SAP組減少，胰腺組織水腫減輕，亦可見(jiàn)點(diǎn)狀出血壞死。

肝臟對(duì)照組無(wú)明顯病理改變。SAP組肝臟明顯水腫、色暗，可見(jiàn)散在點(diǎn)狀出血。鏡下可見(jiàn)肝細(xì)胞間隙增大并有紅細(xì)胞滲出，肝細(xì)胞濁腫變性有嗜酸性變；組織結(jié)構(gòu)呈灶狀壞死，隨時(shí)間延長(zhǎng)呈進(jìn)行性加重。治療組肝臟上述病理改變有所減輕。

2.2 血清白蛋白濃度比較

SAP組、治療組血清白蛋白含量低于對(duì)照組，與對(duì)照組比較有顯著差異（P＜0.05），治療組2、6、12h各時(shí)段血清白蛋白含量高于SAP組，與SAP組比較2和12h有顯著差異（P＜0.05），而6h無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.3 血清ALT濃度比較

SAP組、治療組ALT含量高于對(duì)照組，與對(duì)照組比較有顯著差異（P＜0.05），2、6、12h各時(shí)段治療組ALT含量低于SAP組，與SAP組比較有顯著差異（P＜0.05）。

2.4 血清AST濃度比較

SAP組、治療組AST含量高于對(duì)照組，與對(duì)照組比較有顯著差異（P＜0.05），2、6、12h各時(shí)段治療組AST含量低于SAP組，與SAP組比較有顯著差異（P＜0.05）。

2.5 血清TNF濃度比較

SAP組、治療組TNF含量高于對(duì)照組，與對(duì)照組比較有顯著差異（P＜0.05），2、6、12h各時(shí)段治療組TNF含量低于SAP組，但治療組2h與SAP2h組比較無(wú)顯著差異 （P＞0.05），而治療組6、12h與SAP組比較有顯著差異（P＜0.05）。

3 討 論

隨著人們生活水平的提高、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展及疾病之間的相互影響，引起AP的發(fā)病因素則逐漸增多導(dǎo)致該病的發(fā)病率逐年升高。在影響AP尤其是SAP轉(zhuǎn)歸中的關(guān)鍵致死因素在于是否合并其他臟器的損害，研究發(fā)現(xiàn)，SAP合并肝損傷者高達(dá)88.9%，而SAP合并肝功能衰竭時(shí)病死率達(dá)70%～100%[2,3]。因此在治療SAP的同時(shí)，對(duì)肝功能損害進(jìn)行治療和處理對(duì)穩(wěn)定病情、減少并發(fā)癥的發(fā)生、改善全身情況是十分有益的。

研究表明，TNF-α是介導(dǎo)全身反應(yīng)的介質(zhì)，也是導(dǎo)致胰腺炎時(shí)胰腺及胰腺外器官組織損傷的重要細(xì)胞因子。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，所有SAP大鼠血清中TNF-α的濃度均較對(duì)照組大鼠有明顯升高，其分析原因可能有以下幾個(gè)方面：首先TNF-α可以激活多形核粒細(xì)胞，釋放多種致?lián)p傷物質(zhì)[4]，可直接損傷血管內(nèi)皮[5]，增加毛細(xì)血管通透性導(dǎo)致血漿外滲；其次抑制纖溶反應(yīng)，促進(jìn)微血栓形成，導(dǎo)致血液流變學(xué)和血流動(dòng)力學(xué)改變[6,7]，各臟器產(chǎn)生缺血性病變；最后TNF-α能誘導(dǎo)IL-1、IL-6等基因表達(dá)[8]，活化磷脂酶A2，從而加劇炎性反應(yīng)和微循環(huán)障礙。因此SAP時(shí)血漿TNF-α含量升高，與疾病嚴(yán)重程度及最終的病死率呈正相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)瑞苷治療后其結(jié)果顯示，所有治療組TNF-α含量低于SAP組，說(shuō)明瑞苷治療有效。

在SAP的病理過(guò)程中，由于胰腺組織釋放多種毒性物質(zhì)及各種破壞因子，如氧自由基、血清磷脂酶A2等，通過(guò)靜脈回流入肝臟，這些因子在肝臟損害中起非常重要的作用。ALT、AST均存在肝細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞膜上，酶活性的改變可直接反映肝細(xì)胞受損程度。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，在SAP中，ALT和AST可升高達(dá)正常數(shù)倍以上，同時(shí)血清白蛋白水平下降，說(shuō)明在急性胰腺炎病理過(guò)程中，肝臟有不同程度的損害，并與胰腺炎輕重程度密切相關(guān)。其中TNF-α水平明顯升高，且升高的程度與病情的嚴(yán)重程度呈正比，隨著病情緩解，TNF-α水平逐漸下降到接近正常人水平，其下降程度也與病情嚴(yán)重程度有關(guān)。瑞苷可以通過(guò)參與三羧酸循環(huán)及核酸的合成，為肝細(xì)胞提供能量，進(jìn)一步激活肝臟的解毒功能，清除對(duì)人體有害的氧自由基，并參與肝細(xì)胞的再生和修復(fù)過(guò)程，從而減少肝細(xì)胞的損傷，迅速恢復(fù)肝功能。該實(shí)驗(yàn)證明瑞苷對(duì)急性胰腺炎肝損害的治療和保護(hù)作用是有效的，并為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

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