microRNA 與肺癌

牛曉曉 綜述 王秦秦 審校

1 microRNA概述

1.1 microRNA的形成過程及作用機(jī)制 microRNA被認(rèn)為是從DNA轉(zhuǎn)錄、不被翻譯但能調(diào)控其它基因表達(dá)的分子。microRNA的初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物-初微microRNA（pri-miRNA）在細(xì)胞核內(nèi)被核酸酶Drosha加工成miRNA前體（premiRNA）[4]，然后經(jīng)Ran-GTP及其受體Exportin-5轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞核[5,6]。60 nt-90 nt的pre-miRNA形成莖環(huán)的結(jié)構(gòu)，細(xì)胞之中的RNaseIII-Dicer酶將成熟的miRNA從發(fā)夾狀的premiRNA的莖區(qū)域中剪切出來，最后成熟的miRNA裝配進(jìn)RNP形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體（RNA induced silencing complex, RISC），執(zhí)行RNAi相關(guān)的基因沉默[7]。

microRNA可以指導(dǎo)效應(yīng)復(fù)合物RISC通過兩種不同的機(jī)制即mRNA剪切和翻譯抑制下調(diào)靶基因的表達(dá)。根據(jù)目前公認(rèn)的觀點(diǎn)，microRNA與其靶基因的互補(bǔ)程度決定了它以何種機(jī)制沉默靶基因。一旦microRNA組裝進(jìn)入效應(yīng)復(fù)合物RISC，當(dāng)其與靶mRNA部分互補(bǔ)特別是與3′UTR的堿基配對后可阻抑翻譯；如果其與靶mRNA完全互補(bǔ)，mRNA可被類似siRNA的機(jī)制降解。

1.2 microRNA的命名原則 研究人員[8,9]對發(fā)現(xiàn)的microRNA制定了如下命名規(guī)則：①microRNA簡寫成miR，再根據(jù)其被克隆的先后順序加上阿拉伯?dāng)?shù)字，如miR-21；②高度同源的microRNA在數(shù)字后面加上英文小寫字母（a、b、c等），如miR-199a和miR-199b；③由不同染色體上的DNA序列轉(zhuǎn)錄加工而成的具有相同成熟體序列的microRNA，則在后面加上阿拉伯?dāng)?shù)字以區(qū)分，如miR-199a-1和miR-199a-2；④如果一個前體的兩個臂分別加工產(chǎn)生microRNA，則根據(jù)克隆實驗在表達(dá)水平較低的miRNA后面加“*”，如miR-199a和miR-199a*，或進(jìn)行如下命名，如：miR-142-5p（也可命名為miR-142-s，表示從5′端的臂上加工而來）；⑤將物種縮寫置于microRNA之前，如has-miR-199；⑥確定命名規(guī)則之前發(fā)現(xiàn)的microRNA，如let-7等保留原來的名字。

1.3 microRNA和siRNA 小RNA分子是非編碼的RNA分子，控制著真核細(xì)胞的許多功能，影響基因的表達(dá)、細(xì)胞周期和個體發(fā)育等多種行為。小RNA主要包括小干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）和微RNA（microRNA）。

siRNA是一種短片段雙鏈RNA分子，能夠以同源互補(bǔ)序列的mRNA為靶目標(biāo)降解特定的mRNA，這個過程也就是RNA干擾（RNA interference, RNAi）。microRNA與siRNA并不相同，但又密切相關(guān)；他們之間很容易混淆，有很多共同點(diǎn)也有許多不同點(diǎn)。

主要區(qū)別點(diǎn)包括： ①來源不同：siRNA通常是外源的，如病毒感染和人工插入的dsRNA被剪切后產(chǎn)生外源基因進(jìn)入細(xì)胞，而microRNA是內(nèi)源性的，是一種非編碼的RNA，由miRNA基因表達(dá)出最初的pri-miRNA分子加工后形成；②作用機(jī)制不同：siRNA滲入RISC中，引導(dǎo)復(fù)合物與miRNA完全互補(bǔ)，通過其自身的解旋酶活性解開siRNA，通過反義siRNA鏈識別目的mRNA，通過內(nèi)切酶活性切割目的片段，再經(jīng)細(xì)胞外切酶進(jìn)一步降解目的片段。siRNA也可以抑制具有短片段互補(bǔ)mRNA的翻譯。microRNA通過與miRNP核蛋白體復(fù)合物結(jié)合，識別靶基因mRNA，并與之部分互補(bǔ)，從而抑制翻譯；③生物學(xué)意義不同：siRNA不參與生物發(fā)育，是RNAi的產(chǎn)物，原始作用是抑制轉(zhuǎn)座子活性與抵御病毒感染。microRNA主要在發(fā)育過程中發(fā)揮作用，調(diào)節(jié)內(nèi)源性基因的表達(dá)，具有高度保守性、時序性和組織特異性。

1.4 microRNA表達(dá)譜高通量分析方法 2002年首次報道了microRNA分子與癌癥的關(guān)系，研究[10]發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞存在特異的microRNA缺失或表達(dá)下調(diào)。接著一系列的報道指出在各種癌癥中許多microRNA分子的表達(dá)都有明顯降低，但也有一部分microRNA分子表達(dá)是上調(diào)的。鑒于這些研究結(jié)果，科學(xué)家們試圖建立起不同癌癥的microRNA表達(dá)譜庫，以期應(yīng)用于臨床診斷。

最后端上八寶飯，我猜他一定不會碰了。沒想到，梁先生居然大笑說：“這個我要?！迸笥烟嵝阉骸袄锩婕扔刑怯钟酗??！绷合壬鷦t笑說：“我前面不吃，是為了后面吃?。∫驗槲已歉?，得忌口，所以必須計劃著，把那‘配額’留給最愛?！?/p>

迄今為止，尋找microRNA分子表達(dá)模式的高效率、高通量方法對于研究microRNA分子功能與癌癥的關(guān)系是非常重要的。目前常用的方法有microRNA克隆、微陣列分析法（microarray analysis）、微珠表達(dá)分析和其它方法。由于microRNA分子片段小，在進(jìn)行高通量表達(dá)分析時需要特殊考慮，另外microRNA家族成員序列高度相似性的存在也使問題變得更復(fù)雜，因此微陣列的運(yùn)用已成為最主要的方法。

微陣列分析法實際上是一種微型生物傳感器，在不同的基質(zhì)表面有序地點(diǎn)陣排列了一系列生物分子，固定在每一點(diǎn)陣上的分子都是已知的。在相同條件下，點(diǎn)陣上的分子與其配體分子反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)果用核素、熒光、化學(xué)發(fā)光或酶標(biāo)法顯示，再通過計算機(jī)軟件分析，綜合成可讀總信息，實現(xiàn)對化合物、蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞或其它生物組分準(zhǔn)確、快速、高通量地篩選或檢測。microRNA的微陣列分析法目前已廣泛用于特異組織或細(xì)胞內(nèi)microRNA表達(dá)譜的研究。但對microRNA表達(dá)特征的研究是間接的，在分析過程中仍存在特異性和敏感度不高等缺點(diǎn)，因此結(jié)果有一定的假陽性，需要輔助其它更為準(zhǔn)確的表達(dá)研究方法加以驗證，如PAGE/Northern blot等[11]。

2 microRNA和肺癌

Volinia等對123例肺癌組織與123例正常肺組織進(jìn)行了microRNA的表達(dá)差異比較研究，發(fā)現(xiàn)有38種microRNA存在表達(dá)差異，如let-7家族、miR-16-2、miR-21、miR-191、miR-17-5p以及miR-155等。Yanaihara等利用microRNA基因芯片分析法，對104例非小細(xì)胞肺癌組織與正常肺組織研究發(fā)現(xiàn)，有43種microRNA有明顯的表達(dá)差異，15種microRNA發(fā)生上調(diào)及28種microRNA發(fā)生下調(diào)。這些發(fā)現(xiàn)[12]均為microRNA在肺癌中的研究奠定了基礎(chǔ)。

2.1 let-7與肺癌 let-7最早在線蟲中發(fā)現(xiàn)，它調(diào)控細(xì)胞的分化和增殖的時序，成熟的let-7序列在線蟲和人類中是保守的。目前發(fā)現(xiàn)人類let-7家族有12種，包括let-7a-1 、let-7a-2、let-7a-3、let-7b、let-7c、let-7d、let-7e、let-7f-1、let-7f-2、let-7g、 let-7i 和miR-98。人類let-7家族成員大多定位于9、11、22號染色體上。

Takamizswa[13]在2004年通過Northern blot分析了20個人類肺癌細(xì)胞株和2個永久人類正常肺上皮細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)在正常肺上皮細(xì)胞株中易檢測到成熟let-7，與正常肺組織表達(dá)水平相似，60%肺癌細(xì)胞株let-7表達(dá)水平明顯下降。同樣在143例原發(fā)性肺癌組織標(biāo)本中也發(fā)現(xiàn)let-7表達(dá)下調(diào)，其中表達(dá)水平下降＞80%的病例占44%，說明let-7在肺癌體內(nèi)和體外表達(dá)均下調(diào)。在肺癌細(xì)胞系中，let-7家族的過表達(dá)能夠抑制細(xì)胞的增殖、分化和侵襲轉(zhuǎn)移。

let-7的靶基因包括Ras家族、高遷移組A蛋白（HMGA2）、c-Myc、CDC25A、CDK6和Cyclin D2。其中最典型的是促進(jìn)細(xì)胞增殖的Ras家族和參與細(xì)胞增殖分化的HMGA2。Ras原癌基因是Ras基因家族成員之一，屬于膜相關(guān)的鳥苷三磷酸酶信號蛋白，可調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化。HMGA2是與染色體結(jié)合的非組蛋白，通過抑制核苷酸切除修復(fù)途徑引起基因不穩(wěn)定，促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。2005年Johnson等[14]證實肺癌中l(wèi)et-7的降低使其調(diào)控的靶點(diǎn)Ras基因過表達(dá)。let-7在肺癌的低表達(dá)和Ras的高表達(dá)提示microRNA可以作為抑癌基因。研究發(fā)現(xiàn)HMGA2在一些惡性腫瘤中如乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌表達(dá)增高，對惡性腫瘤的生長、分化和轉(zhuǎn)移起重要作用。Mayr等研究發(fā)現(xiàn)let-7主要依賴于HMGA2的3′UTR，由于染色體移位毀壞了HMGA2的3′UTR結(jié)構(gòu)，無法與let-7結(jié)合而失去對let-7的抑制作用，引起以不依賴支持物生長為特征的致瘤性轉(zhuǎn)化。

2.2 microRNA-29家族與肺癌 目前認(rèn)為腫瘤的發(fā)生和發(fā)展同時受遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)的調(diào)控。表觀遺傳學(xué)只影響表型不改變基因型，包括DNA甲基化改變、組蛋白修飾和非編碼RNA誘導(dǎo)的改變。基因組甲基化的改變受DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferase, DNMT）的調(diào)控，DNMT催化S腺苷甲硫氨酸的甲基基團(tuán)轉(zhuǎn)移至胞嘧啶環(huán)的5′端。DNMT3A和DNMT3B在肺癌中也經(jīng)常出現(xiàn)上調(diào)，且DNMT3A和DNMT3B出現(xiàn)上調(diào)的肺癌預(yù)后差。一些miRNA在肺癌中表達(dá)下調(diào)，其中miR-29家族（miR-29a、miR29b和miR29c）與DNMT3A和DNMT3B的3′UTR互補(bǔ)。Fabbri等[15]將DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的互補(bǔ)位點(diǎn)克隆至熒光素酶基因的3′UTR中，然后與miR-29a、miR29b和miR29c共轉(zhuǎn)染入肺癌A549細(xì)胞。結(jié)果顯示總DNA甲基化水平與對照組相比有明顯下降，轉(zhuǎn)染48 h后下降30%，72 h后下降40%，H1299細(xì)胞也有類似情況。因此在肺癌組織中miR-29的表達(dá)與DNMT3A和DNMT3B呈負(fù)相關(guān)，miR-29直接靶定DNMT3A和DNMT3B。Fabbri等還發(fā)現(xiàn)在肺癌細(xì)胞株中表達(dá)miR-29可以修復(fù)異常的DNA甲基化，誘導(dǎo)甲基化相關(guān)沉默腫瘤抑制基因的重新表達(dá)，抑制腫瘤生長。Rajewsky[16]也認(rèn)為DNMT1、DNMT3A和DNMT3B可能都是miRNA潛在的靶點(diǎn)。

2.3 miR-34家族與肺癌 p53是經(jīng)典的抑癌基因，在多種腫瘤相關(guān)應(yīng)激信號的刺激下被激活，引起細(xì)胞周期阻滯、促進(jìn)DNA修復(fù)、誘導(dǎo)細(xì)胞衰老死亡等生物學(xué)效應(yīng)。近期研究[17,18]發(fā)現(xiàn)miR-34家族作為p53靶基因參與傳統(tǒng)的p53抑癌網(wǎng)絡(luò)。

在脊椎動物中，miR-34家族有3個成員，即miR-34a、miR-34b和miR-34c。人miR-34a位于初始轉(zhuǎn)錄子的第二外顯子，而miR-34b和miR-34c分別位于同一初始轉(zhuǎn)錄子的第一內(nèi)含子和第二外顯子[19,20]。 Xi等[21]通過全基因組掃描分析，發(fā)現(xiàn)miRNA中超過46%的啟動子區(qū)有p53潛在的結(jié)合位點(diǎn)，說明這些miRNA有可能直接受野生型p53的調(diào)控。研究還發(fā)現(xiàn)miR-34家族成員與p53的狀態(tài)明顯相關(guān)，只有野生型p53能明顯誘導(dǎo)miR-34的活化。在電離輻射誘導(dǎo)DNA損傷后，小鼠不同臟器組織中成熟的miR-34以p53依賴的方式被激活，在阿霉素誘導(dǎo)p53活化后，miR-34a也以依賴p53的方式明顯升高，而在DOX誘導(dǎo)下，肺癌細(xì)胞中miR-34a的表達(dá)水平升高300多倍。miR-34b在超過90%的非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)下降[22]。

2.4 miR-17-92與肺癌的關(guān)系 miR-17-92是由7個microRNA（miR-17-5p、miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20、miR-19b-1和miR-92-1）組成的表達(dá)簇，是一個microRNA的多順反子，位于染色體13q31。與正常組織相比，miR-17-92族在肺癌中表達(dá)水平明顯升高，以大多數(shù)進(jìn)展期的小細(xì)胞肺癌為甚[23]。miR-17-92族可加快肺癌細(xì)胞的生長，但其在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制尚不清楚，預(yù)測可能是通過抑制兩個腫瘤抑制基因PTEN和Rb2而發(fā)揮其致癌作用。O'Donnell[24]研究發(fā)現(xiàn)miR-17-92族與小細(xì)胞肺癌中多發(fā)性高表達(dá)的致癌基因c-Myc相關(guān)，Myc基因過表達(dá)引起了miR-17-92的高表達(dá)。此外，近年來腫瘤microRNA表達(dá)譜的研究[25]也涉及到miR-17-92家族過表達(dá)的研究，表明在肺癌中miR-17-92家族的成員呈廣泛過表達(dá)趨勢。

2.5 Dicer酶與肺癌 Dicer是RNaseIII家族的成員，在進(jìn)化上高度保守。Dicer的N端是1個RNA解旋酶結(jié)構(gòu)域，隨后是1個PAZ結(jié)構(gòu)域，在C端是2個RNaseIII結(jié)構(gòu)域和1個雙鏈RNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（double-stranded RNA binding domain,dsRBD）[26]。Dicer的作用見microRNA形成過程所述。

有研究[27]表明在肺腺癌的前期病變即不典型腺瘤樣增生及細(xì)支氣管肺泡癌中Dicer呈短暫性高表達(dá)。免疫組化和蛋白質(zhì)印跡分析表明Dicer在肺鱗癌中表達(dá)高于肺腺癌，而在進(jìn)展期肺腺癌中表達(dá)下調(diào)。

2.6 miR-128b和miR-7與肺癌 研究顯示，約43%-89%非小細(xì)胞肺癌患者的肺組織標(biāo)本中檢測到表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor, EGFR）表達(dá)或高表達(dá)。大量證據(jù)[28]表明EGFR過度表達(dá)和/或激活與非小細(xì)胞肺癌患者生存期短、預(yù)后差、放化療敏感性下降密切相關(guān)。胡雪君等[29]檢測73例青年和65例老年非小細(xì)胞肺癌標(biāo)本EGFR的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)EGFR在非小細(xì)胞肺癌標(biāo)本中的陽性表達(dá)率為51.4%。

鑒于EGFR在肺癌中的調(diào)控作用，研究人員將注意力轉(zhuǎn)移到研究EGFR與microRNA的關(guān)系上來。Weiss等[30]挑選了miR-128b來進(jìn)行此研究，因為其定位于肺癌缺失的3p22染色體上，結(jié)果顯示在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系中miR-128b可與EGFR的3′UTR端結(jié)合從而影響蛋白質(zhì)的翻譯。研究人員[31]發(fā)現(xiàn)在肺癌細(xì)胞系中miR-7也可以下調(diào)EGFR及蛋白的表達(dá)。

2.7 miR-107和miR-185與肺癌 細(xì)胞周期分為4期：DNA合成前期即G1期、DNA合成期即S期、DNA合成后期即G2期和細(xì)胞分裂期即M期。細(xì)胞周期調(diào)控的理論與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系是一個十分重要的研究領(lǐng)域。研究表明細(xì)胞的增殖、分化、衰老和凋亡均是細(xì)胞周期依賴性的，腫瘤細(xì)胞同樣也是周期依賴性的。

2008年Kumar等[32]在研究多元化非小細(xì)胞肺癌小鼠模型K-RasG12D時發(fā)現(xiàn)，let-7g可抑制肺癌細(xì)胞的生長，使肺癌細(xì)胞周期停止或死亡。Takahashi等[33]將miR-107和miR-185轉(zhuǎn)染至肺癌細(xì)胞中，流式細(xì)胞儀分析顯示這些miRNA可使H1299細(xì)胞和A549細(xì)胞停滯在G1期，其抑制作用比let-7更強(qiáng)。他們定位于人類肺癌的染色體易變區(qū)域，是新的調(diào)控人類惡性腫瘤細(xì)胞的周期調(diào)節(jié)因子。

2.8 miR-221、miR-222與肺癌 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（TNF-related apoptosis-inducing ligand, TRAIL）是近年發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor, TNF）家族成員，與死亡受體結(jié)合后可特異性地誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞和惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞凋亡[34]。Garofalo等[35]與Miller等[36]篩選出對TRAIL敏感性不同的4個非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系，通過比較它們在microRNA表達(dá)譜上的區(qū)別，最終證實高表達(dá)的miR-221及miR-222通過下調(diào)P27kip1抑制了TRAIL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號通路。PTEN是重要的抑癌基因之一，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和凋亡。Michela等[37]研究證實肺癌細(xì)胞系中miR-221及miR-222過表達(dá)，通過靶向結(jié)合PTEN 3′UTR端抑制PTEN的表達(dá)從而增加了肺癌的發(fā)生率。少量研究表明基質(zhì)金屬蛋白酶（ matrix metalloproteinases, MMP）抑制因子TIMP3也是miR-221及miR-222下游靶標(biāo)，其通過抑制TIMP3的表達(dá)而激活MMP，以增強(qiáng)肺癌的侵襲能力。

2.9 microRNA與肺癌的診斷、治療及預(yù)后 microRNA的表達(dá)模式與人類腫瘤的診斷、分期、進(jìn)展、預(yù)后等密切相關(guān)，microRNA甚至可以直接作為癌癥基因治療的靶標(biāo)。

2.9.1 microRNA與肺癌的診斷 許多研究表明，肺癌組織與正常肺組織的microRNA表達(dá)譜有明顯的差別，越來越多的研究者將microRNA作為腫瘤的生物學(xué)標(biāo)志物來探討。Mitchell等[38]研究發(fā)現(xiàn)，在血清中可以有效分離出microRNA，并且microRNA在血清中以穩(wěn)定的形式存在，無論是高溫、驟冷還是強(qiáng)酸強(qiáng)堿條件下都不會被降解，這就說明血清中microRNA可以作為穩(wěn)定的生物學(xué)標(biāo)志物來檢測癌癥。Chen等[39]采用Solex測序方法對健康人血清和非小細(xì)胞肺癌患者血清中的小分子RNA進(jìn)行測序分析。結(jié)果顯示，肺癌血清與健康人血清相比microRNA表達(dá)譜明顯不同，肺癌患者血清中有28種正常血清中存在的microRNA缺失，但是檢測出了63種在正常血清中沒有的microRNA分子。目前，對循環(huán)microRNA與腫瘤的關(guān)系研究還處于起步階段，但是這已為腫瘤的無創(chuàng)診斷開辟了一條新的道路。此外，研究[40]還發(fā)現(xiàn)在福爾馬林固定過的石蠟包埋組織中（甚至保存10年的標(biāo)本）能夠有效地檢測出microRNA分子，具有廣泛的臨床應(yīng)用前景。

2.9.2 microRNA與肺癌治療 在肺癌治療方面，microRNA還沒有得到應(yīng)用，但是一些microRNA可以作為抑癌基因發(fā)揮作用，例如Trang等[41]通過建立小鼠非小細(xì)胞肺癌模型將let-7導(dǎo)入小鼠體內(nèi)，結(jié)果顯示let-7可以有效抑制腫瘤的生長，剔除let-7可促進(jìn)小鼠肺癌的發(fā)生；盡管接受let-7治療小鼠的腫瘤沒有消失，但是66%的腫瘤均在縮小。對于抑癌基因的microRNA治療策略是重新表達(dá)這些下調(diào)基因，理論上可以消退腫瘤。因此針對microRNA開發(fā)的microRNA相關(guān)藥物不會產(chǎn)生如siRNA引起的完全基因表達(dá)抑制，而更接近于正常生理調(diào)節(jié)作用。

有資料認(rèn)為90%的腫瘤患者死亡與腫瘤的抗藥性有關(guān)，大量研究表明microRNA與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)，也有少量研究揭示microRNA與腫瘤細(xì)胞對化療藥物的敏感程度相關(guān)。microRNA的突變、異常表達(dá)和異常加工均會影響microRNA的正常功能，導(dǎo)致靶基因的蛋白表達(dá)水平異常，如果此類靶基因與腫瘤細(xì)胞對藥物的反應(yīng)程度相關(guān)，將改變腫瘤細(xì)胞的藥物敏感度。2007年Bertino等[42]提出了“microRNA的藥物基因組學(xué)”概念，指出通過研究microRNA及microRNA的突變?nèi)绾胃蓴_microRNA的正常功能進(jìn)而改變病人對藥物的反應(yīng)程度，最終可找出某些特定的microRNA用以指導(dǎo)病人的個性化用藥。Shin等[43]發(fā)現(xiàn)A549細(xì)胞接受20 Gy、40 Gy放射后microRNA分別有4種、10種的改變，這些變化的microRNA與放射引起的細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控等有關(guān)，這就提示在放射治療學(xué)中microRNA也有潛在應(yīng)用價值。

2.9.3 microRNA與肺癌的預(yù)后 Yanaihara等[44]對104例非小細(xì)胞肺癌（65例腺癌、39例鱗癌，65例I期、17例II期、22例III-IV期）術(shù)后患者進(jìn)行了研究，在腺癌患者中miR-155、miR-17-3p、miR-106a、miR-93高表達(dá)者和let-7a-2、miR-145、let-7b低表達(dá)者預(yù)后差。其中miR-155和let-7a-2的表達(dá)水平和患者的生存率有著密切的關(guān)系。有研究者[45]對112例非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行了檢測，研究人員通過Cox模型和風(fēng)險評分發(fā)現(xiàn)了5個預(yù)測非小細(xì)胞肺癌治療效果的microRNA信號。帶有這些microRNA信號的高風(fēng)險基數(shù)的病人相對于低風(fēng)險基數(shù)的病人，治療效果較差。因此研究人員認(rèn)為這些microRNA信號是非小細(xì)胞肺癌患者復(fù)發(fā)和存活的獨(dú)立預(yù)測因子。

3 展望

隨著基因芯片、RT-PCR和Northern blot等各種技術(shù)方法的應(yīng)用和完善，檢測microRNA的表達(dá)日益精確可靠，為肺癌的研究及基因診斷開辟了新的途徑，也為肺癌的發(fā)生機(jī)制研究以及相關(guān)的生物治療策略提供了新的視角。但是研究結(jié)果同時顯示了microRNA作用的復(fù)雜性，如單個microRNA可以同時調(diào)控多個靶基因，而多個microRNA也可同時調(diào)控一個靶基因的表達(dá)，而且這些調(diào)控具有一定的特異性，給全面研究microRNA的功能以及構(gòu)建microRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)帶來了困難。相信這些困難的解決將有利于進(jìn)一步理解microRNA在生物發(fā)展中的作用，并為利用microRNA進(jìn)行臨床診斷和治療提供新的依據(jù)。